外周血淋巴细胞亚群及其细胞因子在反复自然流产患者的变化及临床意义

何育英 蔡巧青

1.深圳市盐田区盐田街道计生中心,广东深圳518000;

2.深圳市北京大学医院妇产科,广东深圳518000

反复自然流产(RSA)是妇产科常见病,约40%～60%不明原因,指连续2次及以上的自然流产.目前多数研究表明,母体免疫系统能否识别并耐受胚胎抗原是关键.大量研究结果显示,正常妊娠中母体对胚胎的免疫反应以Th2体液免疫为主,而Th1细胞免疫过强极有可能导致流产.为探讨研究外周血淋巴细胞亚群Th1/Th2的水平及其细胞因子德变化和临床意义,辅助临床治疗.现回顾性分析该院2010年10月-2011年10月收治的60例妇女的临床资料,将结果报道如下.

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取在深圳市盐田区计生中心经过妇检,B超,尿HCG都正常无不孕,无死胎或流产史,要求人流的妇女30例为正常早孕组.同期经我中心排除因遗传,感染及血型不合,抗精子抗体阳性等因素,确诊为RSA的妇女30例为病例组.见表1.

表1 两组妇女临床资料比较

1.2 设备及试剂

采用BeckmanCoulter FC500及其原装试剂,利用表面分子将其分类细胞.ELISA试剂盒购自美国GBD公司.

1.3 标本收集

分析前收集RSA组和对照组孕妇空腹取静脉血5 mL,注入5.0 mL于EDTA.K2管,空腹静脉血4 mL,分离血清,-20℃保存待检测.严格按照操作程序.

1.4 统计方法

采用SPSS13.0统计学处理软件包进行数据分析,计量资料采用均值±标准差(±s)表示,进行t检验.

2 结果

2.1 病例组与对照组资料比较

表2 对照组与病例组比较

表3 对照组与病例组外周血IFN-γ、IL-10水平的检测(pg/mL)

3 讨论

大多认为早期妊娠母体对胚胎的免疫耐受主要有以下:①妊娠期对母体免疫反应的抑制.②胎盆的屏障作用可将胚胎抗原封闭,避免与母体免疫接触,同时将母体抗体及其免疫因子进入胎儿导致免疫反应隔离.Greco等[1]分别把妊娠与产妇,男性与未孕的女性的外周血淋巴细胞在体外与胎盘生物制剂进行MLC培养,发现前者可令淋巴细胞转化而后者不能,证实了早孕期间的免疫耐受是动态的.相关研究结果显示:"免疫细胞分泌的细胞因子影响胚胎的着床、发育,生殖的神经内分泌以及胎盘功能,以维持正常妊娠活动".

Th1细胞分泌IL-2,TNF-α,IFN-γ等,引起局部炎症反应和迟发细胞免疫反应,Th2细胞分泌IL-4,IL-5,IL-6,IL-10等,引起体液免疫促进B细胞增殖和抗体形成.Piccinni等[2]报道,孕鼠胎盘IL-4比血中高5-10倍.而流产鼠胎盘IL-4等浓度相对低,但IL-2,TNF-α,IFN-γ等浓度高.Makhseed等[3]对流产倾的妇女进行实验研究,发现其成功怀孕组以Th2型的细胞因子为主,而失败的以Th1型的细胞因子为主.Th1型细胞因子通过直接或间接激活NK、细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)、巨噬细胞等多种毒性细胞妨碍妊娠.Th2型细胞因子主要是通过抑制Th1型细胞因子的产生及其作用来维持妊娠,大部分反复自然流产均是由于患者机体不能产生足够的Th2型细胞因子来抑制Th1型细胞因子所致.国内刘庆之等[4]对此亦有论述.

大量研究表明Th2淋巴细胞有利于妊娠,而Th1则相反.但需注意适量的Th1型细胞是有利于促进胎儿生长和母体抗感染能力.Haynes等[5]认为,对妊娠来说,Th1与Th2的平衡更应该考虑.现已证实,Th2型细胞因子对维持正常妊娠起重要作用,而Th1型细胞因子则不利于妊娠的正常进行[6];两种细胞因子之间的平衡对维持正常妊娠发挥重要作用.正常妊娠时Th1/Th2的比值下降,母体免疫反应偏离Th1型而偏向Th2型.在RSA中Th1/Th2比值上升,母体免疫反应呈相反变化.可见,细胞因子自身、与妊娠有关的激素、感染等因素均对两型因子间平衡起重要调节作用

该研究主要从淋巴细胞的表面分子和淋巴细胞因子进行实验研究,发现RSA的患者和IFN-γ相对正常妊娠妇女表达增强,而,和IL-10表达相对较弱.提示正常妊娠为一种特殊的Th2现象,Th1受到抑制.陈巧儿[7]等报道,RSA患者经过免疫治疗后,促进机体向Th2淋巴细胞转化,利于妊娠成功.综上所述,利用流式细胞仪对RSA快速诊断,结合运用淋巴细胞免疫治疗[8]或者给予细胞因子如Th2类因子制剂或抗Th1类因子制剂,调节优势应答的类型,达到早预防,早治疗,达到妊娠成功的目标.

[1]Greco CR,Koncurat MA.Different responsen of lymphocyte to huaman placenta conditioned medium in vitro[J].J Investig Clin Immumol,1998,8(1):42-45.

[2]Piccinni MP,Romagnana S.Regulation of fetal allograft survival byhormone-controlled[J].Th1-and Th2-type cytokines immonol Res,1996,15(2):141-150.

[3]Makhseed M,Raughupathy R,Azizieh F,et al.Th1 and Th2cytoline profiles in recurren aborters nwith successful pregnancy and with subsequent abortions[J].Hum Reprod,2001,16(10):2219-2226

[4]刘庆芝,黄山鹰姚吉龙,等.反复自然流产患者外周血中Th1/Th2型细胞因子的表达及其意义[J].东南大学学报,2011,30(4):565-568.

[5]Haynes MK,Smith JB.Can Th1-like immune responses esplain the immuno-pathology of recuurent miscarriage[J].Reprod Immunol,1997,35(1):65-71.

[6]Rezaei A,Dabbagh A.T-helper(1)cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous abortion[J].Med Sci Monit,2002,8(8):607-610.

[7]陈巧儿,秦卫兵,杨宁,等.免疫治疗原因不明反复自然流产后Th1/Th2型细胞因子和NK细胞的变化[J].中国妇幼保健,2005,20(20):2637-2639.

[8]廖丹,李凤英,谭秋慧,等.淋巴细胞免疫治疗反复早期自然流产53例[J].临床医学,2009,29(1):75-76.