提高液相色谱法检测食品中食品添加剂准确性的对策

郝丽红

大同市质量技术监督检验测试所，山西大同 037008

提高液相色谱法检测食品中食品添加剂准确性的对策

郝丽红

大同市质量技术监督检验测试所，山西大同 037008

本文针对工作中应用液相色谱法来检测食品中食品添加剂时经常出现的情况，从三个方面：准备工作、样品的分析过程以及实验后处理，分析了可能发生的情况，并总结出相应的对策，对提高液相色谱法检测食品中食品添加剂准确性有一定的指导作用。

液相色谱法；食品添加剂；准确性；对策

为了改善食品的品质、口感以及防腐和在加工工艺中的需要，食品生产厂家常常会在食品中添加一种或者几种食品添加剂。目前，食品添加剂的种类很多，主要有23种：抗结、酸度调节、消泡、漂白、增味、抗氧化、膨松、护色、着色、胶基糖果咀嚼和吹泡、乳化、面粉增白和提高焙烤制品质量、酶制催化、被膜剂、防腐、水分保持、营养强化、稳定和凝固、增甜、增稠、食品加工助剂、食品香料、其他。

近年来，一些商家为了更大限度地延长保质期或者使食品的口感更佳，往往会在食品中添加超量的食品添加剂，甚至法律规定食品中禁止添加的添加剂，这给广大人民群众的生命健康造成很大的威胁。目前，检测食品中添加剂的方法主要是用高效液相色谱［2］。但利用高效液相色谱仪来检测食品中的添加剂时时常出现一些问题。因此，如何提高液相色谱法对食品添加剂检测的准确性意义十分重大。

1 准备工作

1.1 流动相的过滤与脱气

一般样品溶液和流动相中都会存在一些直径在0.45μm以上的颗粒。而色谱柱中的填充物很细，色谱柱的内腔很小，这样造成样品和溶剂中的细小颗粒容易堵塞色谱柱以及毛细管。所以，所有的溶剂在使用之前必须经过过滤，去除溶剂中的杂质颗粒。

流动相必须预先经过脱气处理，否则，在系统内容易逸出气泡，影响泵的正常工作。同时也会对HPLC检测器的基线稳定性和灵敏度产生影响，甚至无法检测。对低沸点溶剂采用煮沸法或者抽气法时需要注意溶剂挥发可能造成组成的变化问题。目前最常见的脱气做法是利用超声脱气。超声脱气的优点是不会对溶剂的组成造成影响。一般超声脱气处理流动相只需20min～30min之间。应该避免溶剂瓶和超声槽壁以及超声槽底部相接触，以免超声处理时溶剂瓶破裂。再者，容器内的液面不要比水面高出太多。

1.2 检查HPLC的柱压与排气泡

检查HPLC的柱压是否是正常的状态。柱压过高或者过低都会对检测的结果造成一定的影响。通常情况下，HPLC常常会出现柱压过高的问题。解决这个问题一般采用以下的步骤：第一步，拆下保护柱，观察柱压。如果柱压下降，则是保护柱出现问题，如果柱压仍然过高，则进行下一步检查；第二步，从HPLC上取下色谱柱，观察柱压。如果柱压仍然过高，则是管路出现阻塞，需要进行清洗，如果柱压下降，则进行下一步检查；第三步，反接色谱柱的进出口，接着用十倍于柱子体积的流动相清洗色谱柱，观察柱压。如果柱压没有下降，则进行下一步检查；第四步，更换色谱柱的入口筛板，观察柱压。如果柱压下降，则是因为样品或者溶剂中含有杂质颗粒，堵塞了入口筛板，如果柱压仍然很高，则需要联系厂商。通常情况下，避免柱压过高的做法是在HPLC的进样器和保护柱之间安装在线过滤器。

另外，输液管路中气泡的及时排出也是提高检测结果准确性的关键步骤之一。如果管道中有气泡存在，则分析的时候柱压会出现不稳定，谱图上表现为基线不稳，甚至出现假峰的现象。对样品的定性与定量造成非常大的影响。

1.3 其它准备工作

为了提高检测的准确性，试验前还需做以下工作，如检查室内的温度变化情况、电压的波动情况、比例阀、单向阀、泵密封垫、保护柱、流动性过滤头等。

1.4 色谱柱的清洗与平衡

上述准备工作完成以后，必须对色谱柱进行清洗和平衡。清洗的步骤为：先用含有甲醇或者乙腈约80%的纯水冲洗半个小时左右，接着用甲醇或者乙腈冲洗半个小时左右，然后用流动相平衡色谱柱到基线平稳。

1.5 样品处理

样品处理必须按标准要求。否则，会出现以下两种情况。一是不能彻底分离与待测组分结构相近的组分而导致检测的结果偏高；二是待测组分未能彻底分离而导致检测的结果偏低。因此，处理样品时应按照标准要求，比如试剂加入的量，样品处理所需的时间和温度等等。平行样应注意处理条件相同。

2 样品的分析过程

2.1 定性

一般采用加标同类样品来定性的方法，即向不含待测组分的同类样品中加入一定浓度的标样，通过与样品的保留时间的比较来进行定性。如果两者的保留时间差不多，则在待测样品中加入含量与样品待测组分基本相同的等体积标液进行定性。若加标样品中待测组分的峰出现叉峰，则可以确定不是待测组分；若加标样品中待测组分的峰没有出现叉峰，根据HPLC测出的待测组分含量、样品和标样的混合计算出来的含量基本相同，则可以确定是待测组分，反之，非待测组分。

2.2 定量

在一定的条件下分别加入一系列相同体积的标样，测得相对应的响应值，绘制出响应值与标样含量的校准曲线，接着检测待测样品，从校准曲线上找出待测组分响应值对应的组分含量。所以，在实际检测工作中，若待测组分的浓度低于检测低限，或者按照标准方法无法浓缩的，结果为未检出；若可以浓缩，浓缩后再进行检测；若可以增加样品量，应增加样品量后再进行检测；若待测组分的浓度高于校准曲线的上限，则应对待测样品进行适当稀释后再进行检测。

在进行山梨酸、糖精钠、苯甲酸［4］的分析过程中，在苯甲酸前有时会有安赛蜜峰的出现，并在糖精钠前有时会有脱氢乙酸峰的出现，而且这些峰非常接近，且不能完全分离，形成分叉峰或者馒头峰，严重影响样品的定性与定量。如果通过样品标签的信息能确定添加剂，就可以直接定性。如果待测组分超标，则要降低流动相的极性彻底分开杂质峰后再进行定量。如果不能确定样品中的添加剂，则要通过样品加标来定性，再定量。如果标准中声明不允许添加的，但在待测峰的附近出现这些添加剂峰的，则要通过样品加标来定性，再定量，并注意待测峰应与杂质峰完全分离开，否则，要降低流动相的极性来使杂质峰彻底分离开后才可定量。

3 实验后处理

完成实验后，必须彻底清洗HPLC的色谱柱。用含甲醇或乙腈约80%的纯水来冲洗，冲洗到柱压恢复至实验前用含甲醇或乙腈约80%的纯水冲洗时的柱压。用甲醇或者乙腈来冲洗，冲洗到柱压恢复至实验前用甲醇或者乙腈冲洗时的柱压。

一般半个月至一个月要清洗单向阀、泵密封垫、保护柱、流动性过滤头等易堵塞的部件一次。清洗用纯水要现做，现过滤，现用。在过滤好的清洗用纯水中加入10%的甲醇或乙腈溶剂，可防止细菌滋生，延长纯水的使用时间。

4 结论

综上所述，在食品中食品添加剂检测高标准的环境下，高效液相色谱仪的分析技术以其灵敏度、分辨率和定量精度高的优点，在食品检测领域中被广泛应用。为了迎合检测的高标准，我们必须提高液相色谱法检测食品中食品添加剂准确性。本文研究表明，准备工作、样品的分析过程以及实验后处理相应对策的总结对提高液相色谱法检测食品中食品添加剂准确性有一定的指导作用。

[1]陈燕茹，夏菁.食品添加剂的检测技术研究[J].中国科技博览，2012(8):277-277.

[2]张立立.浅论食品添加剂的检测方法[J].科学之友，2011(9):36-37.

[3]刘英，尹州，邹晓筱等.高效液相色谱法同时测定蜜饯中的16种食品添加剂[J].分析测试学报，2011，30(6):651-655.

[4]张丽妮，范勇.高效液相色谱法同时测定月饼中五种食品添加剂[J].商品与质量·学术观察，20(9):235.

[5]苗述.高效液相色谱技术在食品检测中的应用[J].黑龙江科技信息，2013(4):39.

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1674-6708（2013）97-0116-02