胶质瘤相关癌基因蛋白－1预测乳腺癌复发转移的价值

张勇 贾静 江颖 童汉兴 邵叶波 徐静 朱隽 陆维祺

（1．复旦大学附属中山医院普外科，上海 200032；2．福建省泉州市第一医院普外科，福建泉州 362000）

乳腺癌术后的肿瘤复发、转移是影响患者生存的关键因素。目前临床上尚缺乏能预测乳腺癌术后肿瘤复发、转移的特异性指标。胶质瘤相关癌基因蛋白－1（glioma oncogene protein－1，GLI－1））属 于Hedgehog信号传导通路下游的转录调控因子，它可以激活该信号传导通路。研究［1］显示，GLI－1在肿瘤组织内的表达水平与多种恶性肿瘤的肿瘤浸润深度、淋巴结侵犯、远隔器官转移等关系密切。然而目前对乳腺癌病灶中GLI－1的表达水平及其与乳腺癌临床病理学特征及术后复发转移的关系尚无定论。本研究拟用免疫组织化学技术检测乳腺癌原发病灶中GLI－1的表达水平，分析其与乳腺癌临床病理特征之间的关系，并初步探讨GLI－1在预测乳腺癌复发、转移中的作用。

1 资料与方法

1．1 一般资料 入选标准：2001—2004年入住复旦大学附属中山医院普外科、接受首次乳腺癌手术并经病理检查确诊的乳腺癌患者；既往无任何恶性肿瘤病史；上海市患者；术前检查未见肿瘤转移；术前未接受放疗和（或）化疗。

收集有完整随访资料的患者221例，在随访过程中出现肿瘤转移、复发者42例，作为复发转移组；采用统计学软件从其余患者中随机抽取42例作为无复发生存组；另随机抽取2001—2004年在复旦大学附属中山医院确诊的良性乳腺肿瘤患者30例，作为对照组。

1．2 免疫组织化学法 应用免疫组织化学技术（S－P法）检测乳腺癌患者原发病灶中GLI－1的表达情况。实验试剂：GLI－1一抗购自SANTA CRUZ生物科技有限公司、S－P法二抗试剂盒购自上海麦约尔生物技术有限公司。

1．3 GLI－1在乳腺癌病灶中表达水平的判定 染色强度：弱阳性记为1分，中等强度记为2分，强阳性记为3分；阳性细胞百分比：＜5%记为0分，5%～25%记为1分，25%～50%记为2分，50%～75%记为3分，＞75%记为4分。计算免疫反应积分（immunoreactive score，IRS），将上述两者得分相乘即为每一标本的IRS，IRS 0～6分为GLI－1低表达；IRS 7～12分为 GLI－1高表达［1］。

1．4 统计学处理 采用Stata7．0统计学软件进行分析，采用χ2检验及Logistic回归分析乳腺癌患者临床病理特征与预后的关系；采用COX生存分析研究乳腺癌患者临床病理特征与患者术后总体生存时间的关系。以P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结 果

2．1 3组患者病灶中GLI－1的表达 复发转移组和无复发生存组的84例患者中，乳腺癌病灶中GLI－1 高 表 达 59 例 （70．24%）；低 表 达 25 例（29．76%）；对照组原发病灶中GLI－1的表达为0例。乳腺良性肿瘤与乳腺癌病灶中GLI－1的表达差异有统计学意义（P＜0．01）。

2．2 乳腺癌病灶中GLI－1的表达与临床病理学特征的关系 见表1。乳腺癌病灶中GLI－1的表达与患者年龄、腋窝淋巴受累情况、肿瘤激素受体表达均明显相关（P＜0．05），而与其他临床病理学特征无明显相关。

表1 乳腺癌病灶中GLI－1的表达水平与临床病理学特征的相关性n（%）

2．3 乳腺癌病灶中GLI－1表达与肿瘤复发、转移的关系 乳腺癌患者病灶中GLI－1高表达与术后肿瘤复发、转移率增高密切相关（P＝0．001）；多因素分析显示，肿瘤病灶中GLI－1高表达与乳腺癌复发、转移密切相关（OR＝7．534，95%CI为2．104～26．974）。进一步分析显示，腋窝受累淋巴结数目不超过3个的乳腺癌患者（pN 0～3）原发病灶中GLI－1的高表达与肿瘤复发、转移率增高明显相关（P＝0．009）。肿瘤病灶中 GLI－1高表达与患者术后出现肿瘤肝转移（P＝0．03）、骨转移（P＝0．023）密切相关，而与肿瘤的局部复发、对侧转移及肺转移无明显相关性（P＞0．05）。

2．4 乳腺癌患者术后总体生存时间的COX生存分析 肿瘤病灶中GLI－1的表达水平对患者术后生存时间有明显影响（HR＝1．852，95%可信区间为1．146～2．994），肿瘤病灶中 GLI－1高表达的患者术后总体生存时间明显缩短。

3 讨 论

GLI－1是Hedgehog信号传导通路下游的转录调控因子之一，是该信号传导通路活化的标志。Hedgehog信号通路在果蝇、多种脊椎动物及人类胚胎发育过程中的细胞分化和增生中起着重要作用。最近研究［1］表明，Hedgehog信号通路与多种恶性肿瘤的侵袭和转移有密切的关系。Hedgehog信号通路的异常活化与乳腺癌的发生、进展也密切相关，乳腺癌病灶中GLI－1表达水平明显高于正常乳腺组织［2－3］。

本研究发现，乳腺癌病灶中GLI－1表达率明显高于良性乳腺肿瘤（P＜0．01），说明 GLI－1的高表达率可能和恶性肿瘤的发生相关。本研究结果还显示，乳腺癌病灶中GLI－1高表达与肿瘤复发转移率的增高及患者术后生存时间的缩短密切相关，与国外研究结果［4］一致，提示乳腺癌病灶中GLI－1的表达水平有望成为乳腺癌预后评估的一个新指标。

有学者［4－5］认为，乳腺癌病灶中 GLI－1的表达水平与患者腋窝淋巴受累情况明显相关，GLI－1的表达水平可作为临床分期辅助指标［4］。目前对于pN1期乳腺癌的合理治疗尚有争议［6－8］。我们建议对GLI－1高表达的pN1期乳腺癌患者应采取更为积极的治疗策略。

本研究结果显示，乳腺癌病灶中GLI－1表达水平与ER受体表达有关，提示Hedgehog信号传导通路可能参与激素介导的乳腺癌发生过程。此外，本研究结果还显示，乳腺癌病灶中的GLI－1表达水平与乳腺癌 HER－2表达无明显的相关性，说明Hedgehog信号传导通路可能独立于表皮生长因子家族调控途径，而自行调控乳腺癌的发生及进展过程。因此，是否可将该信号通路作为乳腺癌治疗新的分子靶点是今后的研究课题。

乳腺癌的骨转移机制一直是研究的热点。近期的研究［9－10］发现，Hedgehog信号传导通路在调控乳腺癌骨转移过程中也有重要的作用。Hedgehog信号传导通路通过促进肿瘤细胞释放甲状旁腺激素相关肽而促进骨质破坏以及肿瘤骨转移，但目前该调控过程的机制尚不清楚［11］。本研究认为，GLI－1在该调控过程中可能具有重要作用，值得今后进行进一步研究。本研究中的肿瘤复发肝转移患者，其原发病灶中GLI－1表达率明显高于未发生肿瘤肝转移的患者，而目前尚无类似报道，提示Hedgehog信号传导通路在肿瘤细胞转移过程中可能还有其他未知的调控途径。因此，对Hedgehog信号通路促进肿瘤转移机制的研究，可能为乳腺癌的分子诊断、预后判断以及分子靶向治疗开辟新的方向。

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