HPLC法测定蛇床子素的油/水分配系数

禚旭晶 苑振亭 赵中华 李志强

（解放军第230医院，辽宁 丹东 118000）

HPLC法测定蛇床子素的油/水分配系数

禚旭晶 苑振亭 赵中华 李志强

（解放军第230医院，辽宁 丹东 118000）

目的 采用 HPLC 法研究了蛇床子素的油 /水分配系数。方法 通过测定已知 logP 值的系列化合物和蛇床子素的 logK′值，来推算蛇床子素的 logP 值。结果 采用 C18，以乙腈 -甲醇 -磷酸氢二钠（11 ∶ 62 ∶ 27，0.05mol/L 磷酸调 pH 值 3.7）为流动相，检测波长254nm，流速 1mL/min 测定蛇床子素 logP 值为 3.46。 结论 采用高效液相色谱法测定蛇床子素 logP 值具有快速、重现性好、样品不需特殊纯化及能测溶解度较小的化合物。

蛇床子素；高效液相色谱法；油/水分配系数

蛇床子的主要有效成分蛇床子素将其制成凝胶用于亚急性湿疹的治疗[1-9]，为探讨蛇床子素的透皮吸收情况，现采用HPLC法研究了蛇床子素的油/水分配系数，介绍如下。

衡量药物的亲脂性最常用的方法是测量药物的油/水分配系数，而常见的分析手段有摇瓶、色谱法等。现根据公式logK′=log（trto）-logto、logP=logK′+logK，采用正辛醇-水体系研究药物在角质层-水中分配[10]。利用高效液相色谱法法研究蛇床子素的油/水分配系数[11-14]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

L-7110型高效液相色谱仪，L-7420 UV-VIS检测器（HITACHI）；AEL-160-21型分析天平（日本SHIMADZU公司）；UV-VIS8500紫外/可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；KQ-100E医用超声波清洗器，产地：昆山市超声仪器有限公司。

1.2 试药

蛇床子素对照品（中国药品生物制品检定所）；实验中所用菲、萘、联苯、二苯甲烷、二苯胺等其他试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18，150mm×4.6mm，5µm；流动相：乙腈-甲醇-磷酸氢二钠（11∶62∶27，以0.05mol/L磷酸缓冲液调pH值为3.7）；检测波长：254nnm；流速：1mL/min。

2.2 实验方法

把已知logP值的化合物菲、萘、联苯、二苯甲烷、二苯胺和待测样品蛇床子素等用流动相配成浓度为1mg/mL的溶液，分别精密量取20μL注入液相色谱仪中，测定tr，代入公式计算，蛇床子素图谱见图1。

图1

2.3 实验模型的建立

根据预试验结果表明，蛇床子素在流动相中溶解情况基本符合HPLC的测定要求。选择已知logP值的上述系列化合物，以上述流动相，分别测定logK′值，根据公式求出各自的logK值，并与联苯的logK作比较得KN值。

如果KN接近于1，那么各化合物在此条件下属于液-液分配，从而能经此求出线性回归方程。测定结果见表1。

表1 HPLC测定各种物质的参数

从表1结果可知，表中各样品的色谱行为应基本属于液—液分配。根据测定结果求出回归方程为：logP=1.854+2.44logK′（n=5 ，r =0.9700）

2.4 蛇床子素的logP值计算可以通过测定蛇床子素的保留值logK′，再代入该线性回归方程，求出蛇床子素logP值为3.46。

3 讨 论

3.1 采用HPLC法测定蛇床子素的含量有较多报道[15-17]。但多为测定复方组份中蛇床子素的含量，不适合蛇床子素油水分配系数测定。经过筛选优化，选取乙腈-甲醇-磷酸氢二钠（11∶62∶27，0.05mol/L以磷酸调pH值为3.7）；作为流动相，取得了较好效果。

3.2 实验表明，摇瓶法和高效液相色谱法测定的蛇床子素油水分配系数基本一致。而传统的摇瓶法测定操作繁杂，采用高效液相色谱法可以克服上述的不足，优点：快速，重现性好；能测溶解度较小的化合物。

3.3 蛇床子素的logP值为3.46，具有较高的脂溶性，易于吸收。我们通过调整凝胶处方的组份，研制成蛇床子素凝胶用于亚急性湿疹的治疗，取得较好疗效。

[1]国家 药典 委员会.中 华人民 共和国 药典 [M].北 京:化 学工 业 出版社,2005:219-220.

[2]秦路 平,吴焕,苏中武,等.蛇床子和兴安蛇床果实 挥发油的成分分析[J].中草药,1992,23(6):330.

[3]向 仁 德 ,傅 晓 红 .蛇 床 子 化 学 成 分 的(Ⅰ)研 究 [J].中 草 药,1984, 15(9):14-15.

[4]向仁德,王丹,傅晓红.蛇床子化学成分的研究(Ⅱ)[J].中草药,1986, 17(2):6-7.

[5]张新勇,向仁德.蛇床子化学成分的研究[J].中草药,1997,28(10): 588-590.

[6]柯昌毅 ,薛 茂 ,夏 雨.蛇 床子素软膏 治 疗婴儿 湿 疹38例[J].中国 药业,2003,12(5):67.

[7]王 锦 兰 .蛇 床 子 搽 剂 治 疗 湿 疹 39 例 [J].中 国 民 间 疗 法 ,2007, 15(10):21.

[8]郭 汉香,廖镜云.复方 蛇床子洗液治疗湿60 例临床观 察[J].实用中医药杂志,2006,22(6):365-366.

[9]武 在 和 .加 味 蛇 床 子 汤 治 疗 阴 囊 湿 疹 240 例 [J].江 西 中 医药,1990,21(6):21.

[10]丁平田.用油/水分配系数预测药物的经皮渗透性[J].中国医药工业杂志,1998,29(4):186-189.

[11]郑俊民.经皮给药新剂型[M].北京:人民卫生出版社,1997:13.

[12]Bronaugh RL,Stewart RF,Congdon ER.Methods for in vitro percutaneous absorption studies:Animal model for human skin[J]Toxico.Appl Pharmacol,1982,62(3):481.

[13]Walter RB.Pharmaceutical Skin Penetration Enhancement[M]. New York:Marcel Dekker,Inc,1993:113.

[14]蔡 巍,杜洪 光,张 恩 宏,等.高 效 液相色谱 法测定 左 炔诺孕酮 的 油水分配系数[J].分析仪器,2007(1):30-32.

[15]李松,徐以亮.高效液相色谱法测定蛇床子浓缩颗粒中蛇床子素含量[J].时珍国医国药,2000,11(11):992-993.

[16]吴承云,郭力,董晓萍.HPLC测定寄生追风液中独活的有效成分蛇床子素[J].华西药学杂志,2000,15(2):129-130.

[17]刘新宇,吴芳.复方蛇床子洗剂中蛇床子素的RP-HPLC测定[J].中草药,2001,32(9):790-793.

HPLC Determination of Osthole Oil/Water Partition Coefficient

ZHUO Xu-jing, YUAN Zhen-ting, ZHAO Zhong-hua, LI Zhi-qiang
(PLA 230 Hospital, Dandong 118000, China)

ObjectiveTo study the HPLC method Osthol oil/water distribution coefficient.Methodby measuring the known logP value of a series of compounds and Osthole logK 'values to calculate the logP value of osthol. The results were C18, acetonitrile-methanol-phosphate disodium(11∶62∶27, 0.05 mol/L phosphoric acid pH,3.7) as mobile phase, detection wavelength 254nm,flow rate 1mL/min measured osthole logP value of 3.46.ConclusionDetermination of logP values osthole a rapid, reproducible, and the sample can be measured without special purification, and solubility of the smaller compounds.

Osthole; Performance liquid chromatography; Oil/water partition coefficient

R282.71

：B

：1671-8194（2013）09-0053-02