HPLC法测定复方氯霉素滴耳液中氯霉素及地塞米松磷酸钠的含量

潘文嘉 林 晓 蔡海珠 林坚涛*

（广东医学院，广东 东莞 523808）

HPLC法测定复方氯霉素滴耳液中氯霉素及地塞米松磷酸钠的含量

潘文嘉 林 晓 蔡海珠 林坚涛*

（广东医学院，广东 东莞 523808）

目的 建立复方氯霉素滴耳液的质量标准。方法 采用高效液相色谱法对复方氯霉素滴耳液中的氯霉素和地塞米松磷酸钠进行定性鉴别及含量测定。结果 在高效液相色谱法中，氯霉素在 0.02652 ～ 0.2122mg/mL 范围内线性关系良好（r2=0.9999），平均回收率为99.2%，RSD ＝ 0.19%；地塞米松磷酸钠在 0.01068 ～ 0.08262mg/mL 范围内线性关系良好（r2=0.9999），平均回收率为 101.5%，RSD ＝ 0.47%。结论 所建立的方法能可靠准确地进行定性定量测定，可用于复方氯霉素滴耳液的质量控制。

复方氯霉素滴耳液；氯霉素；地塞米松磷酸钠；高效液相色谱法

复方氯霉素滴耳液是东莞市人民医院生产的一种医院制剂，由氯霉素和地塞米松磷酸钠为主药制成，含氯霉素0.025%、地塞米松磷酸钠0.005%，具有抗炎、抗过敏作用，临床上主要用于治疗急性或慢性化脓性外耳道炎和中耳炎的治疗[1]。为有效控制制剂的质量，本实验用HPLC法同时测定氯霉素及地塞米松磷酸钠的含量，获得了较理想的结果[2]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent LC-10AD 高效液相色谱仪，Mettler AB265-S 精密分析电子天平。

1.2 试剂

氯霉素对照品（中国药品生物制品鉴定所，批号：130555-200501），地塞米松磷酸钠对照品（中国药品生物制品鉴定所，批号：100016-200011B），复方氯霉素滴耳液（由东莞市人民医院制剂室提供），乙腈为色谱纯（天津四友）；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为SynergiC18（4.6mm×250mm）；流动相为0.1%庚烷磺酸钠溶液（取0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混匀）-乙腈（75∶25）[3]；检测波长：272nm；流速：1mL/min。

2.2 氯霉素和地塞米松磷酸钠线性试验

精密称取氯霉素和地塞米松磷酸钠适量，用流动相进行溶解，制成浓度范围分别在0.02652～0.2122mg/mL和0.01068～0.08232mg/mL内的5种不同浓度的溶液。上述5种浓度的溶液各取20µL注入液相色谱仪，记录色谱图。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，求出得氯霉素回归方程为：y=2024666.87x+206.39（n=5，r=0.9999）；地塞米松的回归方程为y=6733296.5x-61.2（n=5，r=0.9999）结果表明，氯霉素在0.02652～0.2122mg/mL，地塞米松磷酸钠在0.01068～0.08232mg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好。

2.3 样品测定

精取本品适量，用流动相定量稀释制成每1mL中含氯霉素0.1mg的溶液，取续滤液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另精称氯霉素对照品和地塞米松磷酸钠对照品适量，加流动相定量稀释制成每1mL中各含0.1mg和0.02mg的溶液，摇匀，取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得[4]。

氯霉素和地塞米松磷酸钠的液相测定图谱如图1、表1所示。

图1 氯霉素和地塞米松磷酸钠液相图谱

2.4 回收试验

精密称取氯霉素和地塞米松磷酸钠适量，制成浓度为0.1030mg/m和0.2033mg/mL的溶液。分别精取3，5，7mL上述两种溶液置100mL容量瓶中，加2mL供试品，用流动相定容。同法制备3种不同浓度的样品。测得氯霉素和地塞米松磷酸钠的平均回收率分别为99.2%和101.5%，RSD分别为0.19和0.47%，说明本方法回收率良好。

2.5 精密度试验

同一份样品连续进样6次，地塞米松磷酸钠和氯霉素峰面积的RSD%分别为0.96、1.23，结果表明，本方法的精密度良好。

2.6 溶液稳定性试验

取本品样品一份，按含量测定方法测定其峰面积，再分别于2，4，6，8h后测定，对地塞米松磷酸钠和氯霉素峰面积进行比较，结果表明，地塞米松磷酸钠和氯霉素峰面积的RSD%分别为0.65、1.32说明，本品溶液稳定性良好。

表1 三批样品的含量测定数据

3 讨 论

按文献资料[6,7]，实验中曾采用甲醇-水（65∶35）和phenomenex luna柱进行实验，但由于未能使两组分的峰形或分离度达到要求，故最终实验后选用色谱柱SynergiC18（4.6mm×250mm）和流动相0.1%庚烷磺酸钠溶液（取0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混匀）-乙腈（75∶25）作为色谱条件，结果主峰峰形好且分离度符合要求。

[1]中华人民共和国卫生部药政局.中国医院制剂规范[M].2版.北京:中国医药科技出版社,1995:103.

[2]国家药典委员会编.中国药典(第2部)[S].北京:化学工业出版社, 2005.

[3]王增寿.高效液相色谱法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素与水杨酸的含量[J].温州医学院学报,2001,43(3):194-195.

[4]费寿耆.紫外分光光度法测定痤疮搽剂中甲硝唑和氯霉素的含量[J].中国医院药学杂志,1994,14(2):75-78.

[5]吴美芳.高效液相色谱法测定氯霉素注射液中氯霉素的含量[J].海峡药学,2007,19(1):39-40.

[6]Gwendolyn S Campbell GS,,Richard P,et al. Detection and Quantitation of chloramphenicol by Com-petitive Enzyme-Linked Immunoassay[J].Antimicrobial Agents Chemotherapy,1984,25 (2):205-211.

[7]金克宁.高效液相色谱法测定氯麻滴鼻液中氯霉素和盐酸麻黄碱的含量[J].中国医院药学杂志,2002,22(3):145-146.

Determination of Chloramphenicol and Dexamethasone Sodium Phosphate in Compound Chloramphenicol of Ear Drops by HPLC

PAN Wen-jia, LIN Xiao, CAI Hai-zhu, LIN Jian-tao
(Guangdong Medical College, Dongguan 523808, China)

ObjectiveTo establish a method for the quality control of compound chloramphenicol auristillae.MethodsThe discrimination and determination of compound chloramphenicol auristillae were performed by the high performance liquid chromatography (HPLC).ResultsThe linear range for chloramphenicol was 0.02652～0.2122mg/mL ,the average recovery rate was 99.2%,RSD was 0.19%; The linear range for Dexamethasone Sodium Phosphate was 0.01068～0.08262mg/mL ,the average recovery rate was 101.5%,RSD was 0.47%.ConclusionThe method is reliable and accurate, and can be applied to the quality control of compound chloramphenicol auristillae.

Compound chloramphenicol ear drops; Chloramphenicol; Dexamethasone sodium phosphate; Performance liquid chromatography

R927.2

：B

：1671-8194（2013）08-0046-02

*通讯作者