金黄色葡萄球菌显色培养基在细菌性食物中毒中的应用

林金丽 梁玉潮 梁卫桥 冯婉丽 李银凤

金黄色葡萄球菌是常见的食物中毒病原菌之一，为有效控制病原菌的发生和扩散，准确及时的检测手段是预防和控制金黄色葡萄球菌传播的关键。目前金黄色葡萄球菌传统的检验方法(国标法) 需要分离培养、镜检观察、生化鉴定等多个步骤，检测周期长，整个过程大约需要4～7 d，且操作复杂，已不能满足细菌性食物中毒中病原菌快速检测的现实需要[1]。而金葡菌显色培养基中添加了针对金葡菌的选择性色素，因而具有较高的特异性和灵敏度[2]。而且同常规培养基相比，能较好地消除假阳性。金葡菌显色培养基仅需通过单一菌落的典型色彩即可进行初步鉴定，大大提高了对金葡菌的检出率。为探讨显色法的实用价值，本研究在用传统方法处理细菌性食物中毒时，使用金葡菌显色培养基同时进行检测，为金葡菌显色培养基的应用提供借鉴。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取自2011年3月-2012年3月间广东省江门市新会区124 例可疑细菌性食物中毒患者作为研究对象，其中男性患者为73 例，女性患者为51 例，其中年龄最大的患者为72 岁，年龄最小的患者为5 岁。其中儿童患者为12 例。

1.2 材料 金黄色葡萄球菌显色培养基由法国科玛嘉公司提供，快速革兰氏染色液由环凯公司提供。

1.3 方法

1.3.1 金黄色葡萄球菌显色培养基平板制备 称取一定量的金黄色葡萄球菌显色培养基干粉，倒入三角烧瓶中，缓慢倒入一定量的蒸馏水，搅拌均匀至琼脂粉完全溶解，加热至100℃,并按常规不断搅拌，直至琼脂完全溶解。将培养基水浴冷却至48℃，在无菌操作台中将培养基倒入已灭菌的培养皿中，待液体凝固后用封口膜将平皿封好，放置在4℃冰箱留用。

1.3.2 患者呕吐物等样品金黄色葡萄球菌显色培养的检验 将采集送检食物中毒患者的呕吐物等样品用灭菌后的生理盐水进行10 倍递次稀释，使用不同稀释浓度的样品进行划线接种，放置在37℃培养箱中倒置培养24 h。肉眼观察菌落颜色，然后挑取菌落涂片，使用快速革兰氏染色液染色后进行镜检和血浆凝固酶试验，进一步确认结果。

2 结果

2.1 中毒患者资料 对发生食物中毒的患者资料进行整理，结果发现，在家里就餐中毒的情况比在外边多，在家里发生中毒的情况一般是食用了存放过久的食物造成的中毒，而发生食物中毒例数最多的季节为夏季。见表1。

表1 发生食物中毒患者的资料

2.2 金黄色葡萄球菌显色培养基检测结果

2.2.1 金黄色葡萄球菌显色培养基菌落生长特征及诊断例数 葡萄球菌在金黄色葡萄球菌显色培养基上菌落生长特征各有不同，单个菌落呈现的颜色也不相同，金黄色葡萄球菌在显色培养基上菌落生长特征为紫红色，其他细菌为蓝色、无色或奶油色。在124 例细菌性食物中毒患者中，检测到金黄色葡萄球菌的患者例数为25 例。

2.2.2 血浆凝固酶试验结果 使用血浆凝固酶试验验证结果，将血浆凝固酶验证试验与金黄色葡萄球菌显色培养基方法所得结果进行比较，两者的准确率均为100%，可以得出金黄色葡萄球菌显色培养基方法准确率较高，见表2。

表2 血浆凝固酶验证实验与显色培养基方法比较

2.2.3 金黄色葡萄球菌显色培养基在不同样品中金葡菌的检出率 使用金葡菌显色培养基检测细菌性食物中毒患者的不同样品，呕吐物、咽拭子和肛拭子均检出金葡菌，其中呕吐物的检出率最高，见表3。

表3 金黄色葡萄球菌显色培养基在不同样品中金葡菌的检出率

3 讨论

使用金黄色葡萄球菌显色培养基方法检测，金黄色葡萄球菌呈紫红色，其他细菌为蓝色、无色或奶油色，肉眼容易区分和鉴别，124 例可疑细菌性食物中毒患者的金葡菌检测传统法与显色培养基法结果一致，鉴定的灵敏度和特异性与葡萄球菌血平板法这种常规检验方法无显著差异。金葡菌显色培养基对患者的不同样品均能检出，说明这种培养基受不同样品中其他物质的干扰较少。这种方法不但简化了分离培养鉴定程序，而且加快了检测的速度，对细菌性食物中毒患者得到及时和正确的治疗争取了时间，显色培养基是有价值的分离鉴定平板，可以作为传统平板的补充，显色培养基在微生物检测中的应用，可大大提高测效率，满足应急需要[3-5]。

综上所述，金葡菌显色培养基有易于鉴别，选择性好，优势远大于普通培养基的选择性，特别是突发公共卫生事件处理中和有混合菌的金葡菌处理中，显色培养基是首选的，并能取得较好的结果。将显色培养基与传统检测方法结合对食源性致病菌进行快速检验已成为微生物快速检测技术发展的重要方向。

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