五加皮挥发油的气相色谱-质谱联用分析※

赵长胜 郭树科 张小东 杨嘉玲 钟 鸣

五加皮挥发油的气相色谱-质谱联用分析※

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目的分析五加皮挥发油的化学成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取五加皮的挥发油，用气相色谱-质谱法分析鉴定挥发油中的化学成分，并用面积归一化法计算各成分的相对含量。结果从五加皮中共分离得到29个成分，经计算机谱库检索鉴定了25个化合物，占挥发油总量的99.56%。五加皮挥发油中含量较高的成分是柏木脑（41.53%）、软脂酸甲酯（20.31%）、β-雪松烯（10.93%）、亚油酸甲酯（9.17%）。结论本实验为该药材的综合利用和开发提供了一定科学依据。

五加皮；挥发油；气相色谱-质谱法

五加皮（Cortex Acanthopanacis）为五加科植物细柱五加（Acanthopanax gracilistylus W. W. Smith）的干燥根皮，主产于湖北、河南、安徽、四川等地[1]。本品性辛温，味苦，具有祛风除湿、补益肝肾、强筋壮骨、利水消肿的功效，用于治疗风湿痹病、筋骨瘘软、小儿行迟、体虚乏力、水肿、脚气等[2-3]。五加皮使用方便，煎汤、入丸、散或浸酒均可，常用于风湿关节痛等。现代药理研究表明其具有镇痛、增强免疫、抗肿瘤等作用[4]。近年来对其化学成分的研究表明，五加皮中含有丁香苷、紫丁香苷、β-谷甾醇、异贝壳杉烯酸、4-甲氧基水杨醛等有效成分[5-8]。本文采用水蒸气蒸馏法提取五加皮中的挥发油，并采用气相色谱-质谱法（GC-MS）分析其中的挥发性成分，为五加皮药材的综合利用和开发奠定基础。

1 仪器与试剂

SW177药材粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)，挥发油提取器，GCMS-QP2010 Plus气相色谱-质谱联用仪（日本Shimadzu公司），色谱柱：DB-5MS毛细管气相色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm，美国J&W公司）。五加皮药材购自广州市药材公司，经鉴定为五加科植物细柱五加的干燥根皮。乙醚、正己烷和无水硫酸钠均为分析纯（广州化学试剂厂）。

2 方法与结果

2.1 样品提取取五加皮药材粉碎成粗粉，在2000mL圆底烧瓶中放一定量沸石，称取250g样品置圆底烧瓶中，加1500mL蒸馏水浸泡24h后，按2010版《中国药典》一部附录[9]挥发油测定法的甲法操作，用挥发油提取装置提取5h，得浅黄色油状液体。将所得馏出液用乙醚萃取，用无水硫酸钠脱水干燥后回收乙醚，得到浅黄色挥发油。挥发油以正己烷稀释10倍，过0.45µm滤膜，待分析。

2.2 分析条件色谱条件：DB-5MS弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；进样口温度250℃；不分流进样，不分流时间2min，2min后分流比1：30；恒流速模式，载气为高纯氦气（99.995%），色谱柱载气流量1.0mL/min；进样量1.0μL。程序升温：初始温度40℃，保持3min；以5℃/min升至250℃；再以10℃/min升至300℃，保持10min。

质谱条件：离子源为电子轰击电离源（EI），电离电压70eV，传输线温度250℃，离子源温度220℃；电子倍增器电源1.10KV，全扫描模式，扫描质量范围40～500amu，质谱分辨率1amu，扫描间隔0.1s。

2.3 数据处理和质谱检索各组分离子采用计算机NIST2005标准质谱图库检索，参照文献加以确认，定量采用色谱峰面积归一化法。

2.4 成分分析五加皮挥发油成分采用GC-MS进行分析，挥发油通过毛细管色谱分离共检测得到29个组分，通过NIST2005标准质谱图库进行检索，并结合图谱解析对各组分进行分析鉴定。按峰面积归一化法计算各化合物在挥发油中的相对百分含量。五加皮挥发油中已鉴定的主要成分及其在总挥发油中的相对含量见表1，色谱总离子流图见图l。参照标准谱图和质谱特征碎片的信息，鉴定了其中25个成分，占总挥发油的99.56%。总挥发油中含量最高的是柏木脑，占总挥发油的41.53%，其次是软脂酸甲酯、β-雪松烯，分别占总挥发油的20.31%和10.93%。在五加皮挥发油中，尚有4个成分通过质谱库计算机检索和其他标准谱库对照，无法准确定性，有待于今后工作中进一步确认。

图1 五加皮挥发油的总离子流图

表1 五加皮挥发油的化学成分及相对含量

3 讨论

气相色谱-质谱法（GC-MS）是测定挥发性成分的常用方法。本实验通过对五加皮挥发油的GC-MS分析，研究了其挥发性的成分。五加皮挥发油中相对含量大于5%的是柏木脑(41.53%)、软脂酸甲酯(20.31%)、β-雪松烯(10.93%)、亚油酸甲酯(9.17%)，这四个成分占总挥发油的81.94%。另外，α-雪松烯(4.58%)、异丁基邻苯二甲酸酯(1.80%)、10-十八碳烯酸甲酯(1.43%)、4-甲氧基水杨醛(1.42%)、樟脑(1.31%)、16-十八烯酸甲酯(1.29%)的含量也比较高。从成分分析的结果来看，五加皮的挥发油成分主要为醛类、酚类、倍半萜醇类和烷烃类等成分。倍半萜类如柏木脑等是挥发油中高沸点部分的主要组成部分，多具有较强的香气和生物活性，也是医药、食品、化妆品工业的重要原料。本实验研究了五加皮的挥发油，发现五加皮中含有很多不常见的倍半萜类成分如柏木脑、α-雪松烯、β-雪松烯等，为其进一步开发五加皮的药用价值提供了实验依据。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社,2010：61.

[2] 高月来,沈烈行.五加皮成分和药理作用研究进展[J].山东中医药大学学报,2000,24(5)：392-393.

[3] 许荣年,鲍忠定,秦志荣,等.GC/MS法测定五加皮保健酒的挥发性特征成分[J].酿酒科技,2004(2)：95-96.

[4] 单保恩,付小梅,华正祥,等.中药五加皮提取成分抗肿瘤活性作用机理研究[J].中国中西医结合杂志,2005,25(9)：825-828.

[5] 吴立军,郑建,姜宝虹,等.刺五加茎叶化学成分[J].药学学报, 1999,34(4)：294-296.

[6] 陈青俊,秦志荣,许荣年,等.高效液相色谱法同时测定五加皮保健酒中的3种特征成分[J].食品与发酵工业,2004(01)：104-106.

[7] 刘向前,陆昌洙,张承烨.细柱五加皮化学成分的研究[J].中草药,2004,35(3)：202-205.

[8] 向仁德,徐任生.南五加皮化学成分的研究[J].植物学报,1983, 1(4)：356.

[9] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社,2010,1.

Analysis of the Essential Oils from Cortex Acanthopanacis by gas Chromatography-mass Spectrometry

Zhao Changsheng Guo Shuke Zhang Xiaodong Yang Jialing Zhong Ming

ObjectiveTo analyze the chemical components of the essential oils from Cortex Acanthopanacis.MethodsThe essential oils from Cortex Acanthopanacis were extracted by steam distillation. The components of the essential oils were identified by gas chromatography-mass spectrometry and their relative contents were determined by area normalization method.Results29 compounds were separated and analyzed, 25 of them accounted for 99.56% of the total essential oils were identified. The major components were cedrol (41.53%), hexadecanoic acid, methyl ester (20.31%), β-cedrene (10.93%), linoleic acid, methyl ester (9.17%).ConclusionThe method provided the evidence for the exploitation and utilization of Cortex Acanthopanacis.

Cortex Acanthopanacis; Essential oils; Gas chromatography-mass spectrometry

R284

A

1673-5846（2013）01-0028-03

1南方医科大学南方医院药学部，广东广州 510515

2中药提取分离过程现代化国家工程研究中心，广东广州 510970

国家发展和改革委员会2011年国家工程研究中心创新能力建设项目，发改办高技[2011]1896号

赵长胜（1974.04-），男，大学本科，药剂师，主要从事工作静脉药物配置、临床药学及药物制剂。

钟鸣（1973.02-），男，硕士，制药高级工程师，主要从事中药/天然药物的研究与开发工作。