乌苯美司胶囊含量测定方法学验证

王巍

摘 要：乌苯美司胶囊可增强免疫功能，用于抗癌化疗、放疗的辅助治疗，老年性免疫功能缺陷等。该实验通过乌苯美司胶囊对2010年版中国药典二部的乌苯美司胶囊的含量测定方法进行验证，结果表明该方法可以准确测定乌苯美司的含量。

关键词：乌苯美司胶囊 含量方法学验证 含量测定

中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1007-3973（2013）009-120-02

乌苯美司胶囊可增强免疫功能，可配合化疗、放疗及联合应用于白血病、骨髓增生异常综合症及造血干细胞移植后，以及其它实体瘤患者。本实验通过用浙江普洛康裕制药有限公司生产的乌苯美司胶囊（20110108批）对2010年版中国药典二部的乌苯美司胶囊的含量测定方法从系统适用性、专属性、线性及范围、精密度、准确度等方面进行验证。

1 试验方法

参照2010年版中国药典二部乌苯美司胶囊的含量测定，内容为：色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.6%磷酸二氢钠溶液（45：55）为流动相；柱温40℃；检测波长254nm。理论板数按乌苯美司峰计算不低于2500。本品含乌苯美司（C16N24N2O4）应为标示量的90.0%-110.0%。

2 试验仪器、试剂和试药

试验仪器：

高效液相色谱仪：Agilent Technologies 1200（美国）；电子天平：BT-125D 塞利多斯科学仪器（北京）有限公司。乌苯美司对照品：中国生物制品检定所，100371-200902，含量99.7%；乌苯美司胶囊：浙江普洛康裕制药有限公司，10mg，20110108批；磷酸二氢钠、冰乙酸、甲醇、纯净水。

3 方法学验证

3.1 溶液配制

3.1.1 流动相配制

称取磷酸二氢钠适量，配成每100ml含磷酸二氢钠0.6g，加甲醇使甲醇-0.6%磷酸二氢钠溶液为45：55。

3.1.2 供试品溶液配制

取装量差异下乌苯美司胶囊内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于乌苯美司10mg），置10ml容量瓶中，加17%醋酸溶液适量，充分振摇使乌苯美司溶解，17%醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过即得。

3.1.3 对照品溶液配制

精密称取已干燥的乌苯美司对照品约10mg，置10ml的容量瓶中，加17%醋酸溶液适量，充分振摇使乌苯美司溶解，17%醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过即得。

3.2 系统适用性试验

由表1可知，乌苯美司峰面积的RSD%为0.16<2.0，保留时间的RSD%为0.03<1.0，拖尾因子<2.0，理论板数>2500，符合系统适用性试验要求。

3.3专属性试验

称取装量差异下的乌苯美司胶囊内容物275.58mg照3.1.2配制供试品溶液，精密量取供试品溶液20 l注入液相色谱仪。处方中各辅料对主成分检测无干扰，该方法专属性良好。

3.4线性及范围

称取已干燥的乌苯美司对照品50.31mg置25ml容量瓶中加17%醋酸溶液适量，充分振摇使乌苯美司溶解，17%醋酸溶液稀释至刻度，摇匀作为线性试验的储备液。精密量取储备液1.5、2、2.5、3、3.5ml置5ml容量瓶中，加17%醋酸稀释至刻度过滤即得。精密量取上述溶液20 l注入液相色谱仪，每样连续进样2次，结果见表2。

由表2可知，乌苯美司在0.602mg/ml-1.404mg/ml内线性关系良好。

3.5 精密度试验

3.5.1重复性试验

由表3可知，6份供试品液含量的RSD为0.62%﹤2.0%，该试验方法的精密度良好。

3.5.2 中间精密度

由表4可知，12份供试品液含量的RSD为0.67%﹤2.0%，可知，该试验方法的中间精密度良好。

3.6 溶液稳定性

由表5可知，在8h内的乌苯美司峰面积的RSD为0.13%小于2.0%，因此，供试品溶液在8h内溶液稳定性良好。

3.7 准确度试验

精密称取已干燥乌苯美司对照品10.06mg按照3.1.3方法配制对照品溶液。精密称取已知含量的同一批号的供试品（批号：20110108，平均装量270.21mg），5份每份适量约含乌苯美司5mg，分别加17%醋酸溶液适量，充分振摇使乌苯美司溶解，精密量取上述各溶液20 l注入液相色谱仪，每样各进样2次，结果见表6。

由表6可知5个回收率数据RSD为0.55%小于2.0%，因此方法准确度良好。

4 含量测定

取乌苯美司胶囊（批号：20110108）内容物，按3.1.2方法配制供试品溶液2份，另取已干燥的乌苯美司对照品10.11mg，按照3.1.3方法配制对照品溶液。分别精密量取两种溶液各20 l注入液相色谱仪，每样各进样2次，计算供试品中乌苯美司的含量，结果见表7。

5 结论

按照药品质量标准分析方法验证指导原则及可接受标准中含量测定分析方法验证的相关要求，从系统适用性、专属性、线性及范围、精密度、溶液稳定性、准确度等方面对2010年版中国药典二部乌苯美司胶囊含量测定的方法进行验证，结果表明该方法可以准确测定乌苯美司的含量；检测20110108批乌苯美司胶囊含量，结果为100.05%，符合规定。

参考文献：

[1] 药典委员会.乌苯美司胶囊含量测定方法（2010年中国药典二部）[S].正文品种：66-67.

[2] 黄晓龙.含量测定分析方法验证的可接受标准简介[S].2007.