异育银鲫幼鱼对饲料中维生素K需求的研究

段元慧朱晓鸣韩 冬杨云霞金俊琰解绶启

(1. 中国科学院水生生物研究所, 淡水生态与生物技术国家重点实验室, 武汉 430072; 2. 中国科学院大学, 北京 100049)

异育银鲫幼鱼对饲料中维生素K需求的研究

段元慧1,2朱晓鸣1韩 冬1杨云霞1金俊琰1解绶启1

(1. 中国科学院水生生物研究所, 淡水生态与生物技术国家重点实验室, 武汉 430072; 2. 中国科学院大学, 北京 100049)

以不同维生素K水平(0.13、2.15、3.25、6.40、12、17.20和23.20 mg/kg饲料)的7种精制饲料喂养初始体重约为(2.17±0.01) g的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)10周, 每个处理3个重复, 研究异育银鲫对维生素K的需求量。结果显示: 饲料中维生素K的添加可以明显降低摄食率, 饲料中维生素K含量为2.15 mg/kg时, 摄食率出现最大值, 之后显著下降(P<0.05), 在12 mg/kg时达到最低值。特定生长率随着维生素K的添加表现出升高的趋势, 饲料中维生素K含量为12 mg/kg时, 出现最大值, 但是差异不显著(P>0.05)。饲料中维生素K的含量从0.13 mg/kg升至3.25 mg/kg时, 饲料效率显著升高(P<0.05), 随着饲料中维生素K的进一步添加, 趋于稳定(P>0.05), 在12 mg/kg时达到最大值, 并且与特定生长率呈正相关关系(SGR = 0.01 FE + 0.95, R2= 0.95)。血液红细胞数目随着饲料维生素K含量的增加先显著升高(P<0.05), 在6.40 mg/kg时达到最大值, 之后趋于稳定(P>0.05)。血红蛋白含量、血球容积比、血清钙含量与血液中红细胞数目表现出相似的趋势, 均在不添加维生素K组出现最低值, 但是差异不显著(P>0.05)。肝体比、肥满度及鱼体生化组成均不受饲料维生素K水平的影响(P>0.05)。分别对饲料效率、红细胞数目进行折线回归得出异育银鲫幼鱼对维生素K的最适需求量为3.73—6.72 mg/kg饲料。

异育银鲫; 维生素K; 饲料利用; 血液指标; 需求量

维生素K是脊椎动物中发现最晚的脂溶性维生素, 但是它的代谢作用却是阐释最清楚的[1—3]。维生素K在体内最主要的功能是配合其他特定蛋白质形成凝血酶原、凝血因子Ⅸ、Ⅶ、Ⅹ及维生素K依赖性蛋白质C、S, 进而帮助血浆中血块的形成, 因此又被称为凝血维生素。维生素K为谷氨酸γ-羧基化酶系统中的必需因子, 参与维持钙平衡和细胞膜的完整性, 此外, 维生素K还在钙的动员和骨骼生长中发挥作用。其他有关维生素K的生理功能尚不清楚。维生素K在体内有三种活性形式, 分别是叶绿醌(phylloquinone, PK)、维生素K2和维生素K3[3]。其中, PK主要由绿色植物和藻类合成, 维生素K2主要通过微生物的合成, 动物饲料中最常应用的是人工合成的维生素K的盐, 为亚硫酸氢钠甲萘醌(Menadione sodium bisulfite, MSB)。MSB在动物体内转化成其活性形式4-甲基萘醌(Menaquinone-4, MK-4)[3—5]。

在水产动物中, 研究主要集中在维生素K在体内发挥的生理功能和对它的需求上。维生素K缺乏会导致鱼类出血、贫血、血球容积比降低和凝血时间延长等症状[6—8]。在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)的研究中发现维生素K缺乏会导致低肝体比及贫血现象[9]。鲑鱼(Salmo salar)[6]、罗非鱼(Oreochromis niloticus × O. aureus)[10]、石斑鱼(Epinephelus malabaricus)[10]、河鳟(Salvelinus fontinalis)[11]、湖鳟(Salvelinus namaycush)[7]、鳕鱼[5](Gadus morhua)、草虾[12](Penaeus monodon)及中国对虾[13](Penaeus chinensis)的维生素K需求量已经确定, 分别为10、5.20、10.60、10、0.50—1.00、0.20、30—40、185 mg/kg饲料, 而斑点叉尾?和鲤鱼饲料中则不需要额外添加维生素K[14,15]。

异育银鲫是一种改良的鲤科鱼类, 由于口味极好且生长速度快而越来越受欢迎[16], 在我国已成为鲫鱼养殖中的主要品系, 养殖面积与产量逐年增加,逐渐有取代鲤鱼成为我国第二大淡水养殖鱼类的趋势, 年产量为300万吨左右(中国渔业年鉴, 2010)。目前对异育银鲫的蛋白、脂肪、碳水化合物、钙、磷、铜、锌等的需要量已有了较为具体的数据[17], 但有关异育银鲫维生素需求方面的数据尚不完善, 仅有烟酸、维生素B2、维生素B6采用单因子梯度法得到了需求值[18,19]。维生素K作为一种重要的参与凝血作用的维生素, 异育银鲫对其需求量还未见报道,本实验的主要目的是通过饲料利用以及鱼体血液指标的变化来确定异育银鲫对维生素K的最适需求量。

1 材料与方法

1.1 实验饲料

以不含维生素的酪蛋白(Sigma; 粗蛋白含量为93.24%)为蛋白源, 玉米淀粉为碳水化合物来源, 玉米油: 大豆油(1∶1)为脂肪源配制成等氮(粗蛋白39.51%)等能(19.30 kJ/g饲料)的精制饲料。添加亚硫酸氢钠甲萘醌维生素K3(购自国药集团化学试剂有限公司, 上海, 生化试剂, 纯度>94%)到基础饲料中使维生素K3形成7个不同的水平, 为0、0.50、1、5、10、20、30 mg/kg饲料, 根据国家标准方法GB 7294-1987测定饲料中的维生素K3的含量为0.13、2.15、3.25、6.40、12、17.20、23.20 mg/kg。原料过40目筛混匀后用绞肉机制成直径为3 mm的沉性饲料, 于70℃恒温烘箱烘干后置于−4℃冰箱备用。实验基础饲料配方(表1)。

1.2 实验鱼及饲养管理

本实验采用异育银鲫, 为中国科学院水生生物研究所关桥渔场的当年幼鱼, 在进入实验养殖系统前, 用2%盐水浸泡15min进行消毒处理。在室内圆形大缸(直径: 150 cm, 高度: 120 cm, 体积1500 L)中驯养一个月, 暂养期间的饲料为本实验室配制的以红鱼粉和豆粕为蛋白源的颗粒饲料(粗蛋白为38%)。之后将实验鱼转入18个缸组成的流水养殖系统(本实验系统)中驯养10d, 每天用不含维生素K的基础饲料饱食投喂2次(09:00和15:00), 水温25—29℃, 使其适应养殖环境和饲料。

表1 基础饲料配方及化学组成(%干重)Tab. 1 Formulation and chemical composition of the basal diet (in dry matter)

实验于2007年8月24日开始至2007年10月30日结束共70d。实验系统为21个方形灰色塑料缸(水容量120 L)的流水系统, 水流速为500 mL/min。实验期间, 通过向蓄水池中滴加20%的硫代硫酸钠溶液调整曝气自来水中的余氯, 使之低于0.05 mg/L。每天上午下午均测水温, 保持在16—29.50℃(图1)。实验期间, 每天2次饱食投喂(9:00和15:00), pH 6.7左右。氨氮浓度低于0.50 mg/L,溶氧高于5 mg/L。实验室用日光灯做光源, 光照周期为12L∶12D (光亮08:00—20:00)。

实验开始前, 将暂养鱼禁食24h后集中, 随机选择体质健壮、规格均匀的鱼(尾均重2.1 g左右),带水称重, 随机分组放入养鱼缸中。实验设7个处理, 每个处理3个重复, 每个缸放30尾鱼, 各处理组之间鱼初始均重没有显著差异(P>0.05), 同时,随机选取3组鱼做初始鱼样, 每组带水称重后再抹干称重, 以折算水分换算每缸鱼的初始重量, 初始鱼样保存在−20℃冰箱中, 以备分析鱼体成分。

图1 实验期间水温变化图Fig. 1 Water temperature variation during the experiment

1.3 取样及分析

实验进行10周后, 实验鱼禁食24h, 对每缸鱼进行计数, 带水称重, 随机取样20 g左右终样抹干,−4℃保存, 以备后期分析鱼体的生化成分。随机取3尾鱼测全长和体重, 并解剖取肝称重, 用于计算肥满度和肝体指数。另随机取6尾鱼尾静脉取血, 其中三尾鱼加抗凝剂肝素钠, 取全血测红细胞数量、血红蛋白含量、血球容积比, 另3尾鱼不加抗凝剂,以3000 r/min离心15min, 吸取上层血清, 保存于−20℃冰箱中用于分析血清钙含量。取5 μL全血迅速用生理盐水稀释200倍, 用血球计数板在显微镜下计数得每毫升血液中的红细胞数。取10 μL全血与铁氰化钾和氰化钾反应生成氰化高铁血红蛋白,在波长540 nm处比色得血红蛋白含量[20]。另取全血0.50—1 mL装于带有刻度的离心管中以4500 r/min离心15min, 红血球在离心力作用下沉淀, 沉积的红血球占全血量的百分比即为血球容积比。血清钙含量的测定原理: 血清中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝结合, 生成蓝色络合物。通过比色与同样处理的钙标准进行比较, 可计算出钙的含量。

干物质、粗蛋白、粗脂肪、灰分和能量的测定参照AOAC的方法[21]: 饲料干物质测定在105℃烘干至恒重采用失重法; 初始和终末鱼样在高压蒸汽灭菌器中(ES-315, TOMY KOGYO CO., Japan)120℃蒸30min, 捣烂混匀后放入恒温烘箱中70℃烘干至恒重, 采用失重法计算其干物质含量, 然后将烘干的鱼样粉碎后待分析。蛋白质测定采用半微量凯氏定氮法(Kjeltec Auto Analyzer 2300, FOSS Company, USA); 脂肪测定采用索氏抽提法(Soxtec system HT 1043, Tecator, Extraction Unit, Hoganas, Sweden); 灰分测定采用马福炉(中国湖北英山县建力电炉制造厂)550℃焚烧法; 能值采用Phillipson 微量能量计(Phillipson microbomb calorimeter, Gentry Instruments Inc., Aiken, South Carolina, USA)测定。每个样品至少测定两个平行样。

1.4 数据的处理

实验鱼的摄食率(Feeding rate, FR)、特定生长率(Specific growth rate, SGR)、饲料效率(Feed efficiency, FE)、肥满度(Condition factor, CF)和肝体指数(Hepatosomatic index, HSI)计算公式如下:

摄食率[FR, %/(kg·d)]=100×总摄食量/[(初始体重+终末体重)/2]/天数

特定生长率(SGR, %/d)=100×[(ln鱼体末重)−(ln鱼体初重)]/天数

饲料效率(FE, %)=100×(鱼体末重−鱼体初重)/摄食饲料干重

蛋白储积率(PRE, %)=100×鱼体蛋白质储积量/蛋白质摄入量

肥满度 (CF)=100×体重/体长3

肝体比(HSI)=100×肝脏重/体重

所有实验数据用Statistia6.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA), 用Duncan’s多重比较来确定各实验组间差异的显著性。显著水平为P<0.05,表中数据为三缸平行的平均值。

2 结果

2.1 在饲料中添加维生素K对异育银鲫幼鱼生长、饲料利用和形体参数的影响

在饲料中添加维生素K对异育银鲫幼鱼生长的影响(表2), 饲料中维生素K的添加可以明显降低其摄食率, 当饲料中维生素K含量为12 mg/kg时达到最小值(P<0.05)。特定生长率随着饲料中维生素K含量的增加呈上升的趋势, 但差异不显著(P>0.05)。饲料效率受饲料中维生素K的影响与摄食率相反,随着饲料中维生素K水平的增加, 饲料效率出现显著上升的趋势(P<0.05), 在12 mg/kg时达到最大值。维生素K的添加对蛋白储积率、肝体比和肥满度均无显著影响(P>0.05)。

表2 摄食不同维生素K水平饲料的异育银鲫的生长和饲料利用(平均值±标准误)Tab. 2 Effect of different dietary vitamin K levels on growth and feed utilization of juvenile gibel carp(Mean±SE)

如图2所示, 通过折线回归(Broken-line regression), 得到饲料效率(FE)和饲料维生素K水平的剂量效应折线关系为: 1. y = 5.89x+26.94 (0.130.05。

两条折线的交点即为异育银鲫幼鱼的维生素K需求量, 为3.73 mg/kg饲料。

如图3所示, 饲料效率与特定生长率呈正相关关系, 它们之间的关系表示为:

2.2 饲料中添加维生素K对异育银鲫幼鱼血液指

标的影响

从图4—7可以看出, 饲料中维生素K的添加可以显著改变血液红细胞数量, 使红细胞数量呈先显著升高, 在6.4 mg/kg时达到最大值(P<0.05), 之后趋于稳定的趋势(P>0.05)。血红蛋白含量、血球容积比、血清钙含量在饲料中维生素K含量最低时均为最低值, 随着维生素K的添加表现出升高的趋势,但差异不显著(P>0.05)。

图2 饲料中维生素K水平对异育银鲫幼鱼饲料效率的影响Fig. 2 Effect of dietary VK levels on FE of juvenile gibel carp

图3 饲料效率与特定生长率之间的关系Fig.3 The relationship between FE and SGR

图4 饲料中维生素K水平对异育银鲫红细胞数目的影响Fig. 4 Effect of dietary VK levels on RBC of juvenile gibel carp

图5 饲料中维生素K水平对异育银鲫血红蛋白含量的影响Fig. 5 Effect of dietary VK levels on Hb of juvenile gibel carp

图6 饲料中维生素K水平对异育银鲫血球容积比的影响Fig. 6 Effect of dietary VK levels on Hct of juvenile gibel carp

图7 饲料中维生素K水平对异育银鲫血清钙含量的影响Fig. 7 Effect of dietary VK levels on serum Ca of juvenile gibel carp

如图8所示, 通过折线回归(Broken-line regression), 得到红细胞数目和饲料维生素K水平的剂量效应折线关系为: 1. y = 13.79 x + 73.203 (0.13 < x < 3.25) R2= 0.8504, n = 4, P<0.05; 2. y = 165.94 (3.25 < x < 23.2) R2= 1, n = 4, P>0.05。两条折线的交点即为异育银鲫幼鱼的维生素K需求量, 为6.72 mg/kg饲料。

图8 饲料中维生素K水平对异育银鲫幼鱼红细胞数目的影响Fig. 8 Effect of dietary VK level on RBC of juvenile gibel carp

2.3 饲料中添加维生素K对异育银鲫幼鱼鱼体营养成分的影响

从表3可以看出, 随着饲料中维生素K的添加,鱼体水分、粗脂肪有降低的趋势, 鱼体粗蛋白有增加的趋势, 但差异都不显著(P>0.05)。对鱼体灰分亦无显著影响(P>0.05)。

3 讨论

在水产动物对维生素K需求量研究的生长实验中, 分别以河鳟、湖鳟、大西洋鲑、鳕鱼为实验对象, 发现随着饲料中维生素K的添加可以提高鱼类的生长表现性能[5—7,11]。李贞仪在对罗非鱼的研究中发现, 当饲料维生素K含量从0增加到5 mg/kg时,可以显著提高鱼体的生长表现与饲料效率[10]。在对草虾和中国对虾的研究中发现, 当摄食含维生素K3的饲料时, 其增重率、饲料效率、蛋白质效率均高于其他各组[12,13]。在本实验中得出了相似的结论,随着饲料中维生素K含量的增加, 摄食率有下降的趋势, 饲料效率和生长性能提高, 血液红细胞数目、血红蛋白含量也表现出增加的趋势, 但是差异均不显著。而且在本实验中饲料效率与生长呈正相关的关系, 说明饲料中添加维生素K对生长的促进作用主要得益于饲料效率的提高。以饲料效率和红细胞数目为指标分别求得异育银鲫对维生素K的需求量为3.73和6.72 mg/kg饲料。该需求量高于湖鳟(0.50—1 mg/kg)[7]、鳕鱼(0.20 mg/kg)[5], 与罗非鱼(5.20 mg/kg)[10]的需要量相似, 低于鲑鱼(10 mg/kg)[6]、河鳟(10 mg/kg)[11]、石斑鱼(10.60 mg/kg)[10]、草虾(30—40 mg/kg)[12]和中国对虾(185 mg/kg)[13]的需求量。造成水产动物对维生素K需求差异的因素有很多, 分析原因可能是因为实验饲养环境、实验周期长短、饲料配方成分中的脂肪源、实验鱼初始体重、年龄、品种上的不同等因素造成的。Suttie指出, 当缺乏维生素K时, 成鼠比幼鼠会晚出现缺乏症[22]。李爱杰、Satoh, et al.也认为不同年龄阶段的鱼对营养素的需求是不同的, 幼鱼由于代谢强度大, 一般需求量要高于成鱼[23,24]。此外, 不同品种也会影响其需求量, Will, et al.在鸡和鼠的维生素K需求量的代谢比较上发现, 由于鸡的肝脏中维生素K过氧化还原酶仅有鼠的10%, 因此鸡对维生素K的需求要高于鼠[25]。所以上述鱼类对维生素K需求的不同也可能是因为维生素K循环作用中维生素K过氧化还原酶活性的差异造成的。虾类对维生素K的需求一般比鱼类高出许多, 推测原因可能是虾类的摄食方式属于抱食, 在摄食过程中会使得饲料中营养素溶解于水中, 导致虾类摄食更多营养素满足机体需要; 另外, 在机体的凝血过程中, 活化型的凝血因子X、钙离子及其他数种因素的作用使非活性凝血因子Ⅱ转变成活性凝血因子Ⅱ[26], 而甲壳类动物在脱壳过程中需要大量钙参与, 以至于无足够的钙参与凝血过程, 因此认为虾类的维生素K需求要高于鱼类[12,13]。还有的鱼不需要在饲料中额外添加维生素K, 比如斑点叉尾?[15]、鲤鱼[14], 原因可能是因为这些鱼的肠道微生物可以合成足量的维生素K供机体需要[11,27]。在哺乳动物的研究中发现, 肠道微生物具有合成维生素K的能力, 而且饲料配方的组成和抗生素的添加会影响这一合成能力[26]。但是在本实验中并没有相关数据来证明异育银鲫肠道微生物合成维生素K的能力。

表3 摄食不同VK水平的饲料对异育银鲫鱼体营养成分的影响(%湿重)(平均值±标准误)Tab. 3 Effect of dietary VK level on body composition of juvenile gibel carp (% wet weight) (Mean ± SE)

在河鳟[11]、鲑鱼[6]、斑点叉尾?[15]的实验中, 当饲料中维生素K缺乏时, 分别会有鳃、眼睛、血管组织出血及体表出血等症状产生。在本实验中由鱼体的外观上虽然并未观察到明显的维生素K缺乏症状, 但是摄食最低维生素K含量饲料的鱼血液中红细胞数目显著低于其他各组, 血红蛋白含量、血球容积比、血清钙含量的值也是各处理组中最低的,说明饲料中适量的维生素K对于维持血液中红细胞生成能力、增加血红素浓度与血球容积比是必需的。在河鳟[11]、湖鳟[7]及鲑鱼[6]的研究中也有相同情形。本实验在外观上没有观察到明显的维生素K缺乏症状可能是因为实验周期还不够长[22], 因为鱼体内多余的维生素K会在肝脏等组织中蓄积, 待机体需要时释放出来利用, 因此其缺乏症的出现需要的实验周期会很长。在鳕鱼、中国对虾对维生素K的需求研究中, 实验周期分别为23周[5]、12周[13], 为研究鲑鱼的维生素K缺乏症, 实验周期为16周[6]。而在本实验中实验周期为10周, 因此要观察到其缺乏症,可能还需要更长的时间。在本实验中也没有发现较高剂量维生素K对鱼造成危害。在陆生动物的实验中发现, 当给予过高剂量维生素K时会产生溶血性贫血、高胆红质血症及严重的黄疸症等毒性现象[26]。在水产动物方面, Poston在对河鳟进行维生素K耐受性实验中发现给予过量的维生素K (100—2400 mg MSB/kg饲料)并不会产生与陆生动物相似的毒性症状[27]。在对罗非鱼[20]和鳕鱼[5]的研究中却发现,饲料中过高含量的MSB对增重率有明显的降低趋势, 可见, 不同的鱼对高含量的MSB表现出了明显不一样的应对策略, 这说明需要进一步研究高含量的维生素K对鱼类代谢的影响。

在动物骨骼的象牙质及矿物化组织中发现富含有维生素K依赖性蛋白质—骨钙素, 骨钙素中有3个部位可提供与钙离子结合的特殊钙键结构, 参与骨骼组织中羟磷灰石的结合, 沉积于骨骼中[28]。Udagawa以底鳉(Fundulus heteroclitus)为研究对象进行实验, 发现未添加维生素K组的骨骼发生畸形的几率会显著高于摄食维生素K各组[29]。李贞仪在对罗非鱼和石斑鱼的研究中也发现, 鱼体钙含量会随着饲料中维生素K含量的增加而增加, 且维生素K与体内钙含量存在正相关的关系[10]。这与本实验的结果是相似的, 在饲料中维生素K含量从0.13 mg/kg上升至6.40 mg/kg时, 可以增加血清中游离钙的含量, 说明维生素K的添加有助于钙在体内的生理功能的发挥, 也可以推测异育银鲫体内可能也存在骨钙素, 进而促进骨骼中钙离子的蓄积。

本实验结果显示, 摄食未添加维生素K组的异育银鲫幼鱼血液中红细胞数目显著低于维生素K添加组, 血红蛋白含量、血球容积比和红细胞数目的结果相似, 随着饲料中维生素K的添加有增加的趋势, 在对河鳟[11]、湖鳟[7]、石川氏鲑[8](Oncorhynchus rhodurus)、罗非鱼[10]的研究中也有相同情形。说明饲料中添加适量的维生素K可以维持血液中红细胞的生成能力, 使之维持在较佳的状态。

综上所述, 维生素K是维持异育银鲫幼鱼生长、饲料利用、血液学指标必需的维生素, 饲料中较高含量的维生素K (23.20 mg/kg)对异育银鲫的生长没有负面影响, 分别以饲料效率和血液红细胞数目为评价指标, 异育银鲫对维生素K的需要量为3.73—6.72 mg/kg饲料。

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DIETARY VITAMIN K REQUIREMENT OF JUVENILE GIBEL CARP (CARASSIUS AURATUS GIBELIO)

DUAN Yuan-Hui1,2, ZHU Xiao-Ming1, HAN Dong1, YANG Yun-Xia1, JIN Jun-Yan1and XIE Shou-Qi1
(1. State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology, Institute of Hydrobiology, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430072, China; 2. University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China)

A 10-week feeding experiment was conducted to determine vitamin K requirement of juvenile gibel carp (Carassius auratus gibelio). Purified diets with seven levels (0.13, 2.15, 3.25, 6.40, 12, 17.20 and 23.20 mg/kg diet) of supplemental vitamin K3(menadione sodium bisulfite, MSB) were fed to C. gibelio (mean weight 2.17±0.01 g). Each diet was fed to triplicate groups of fish. The results showed that fish fed with the diet supplemented with 2.15 mg vitamin K/kg had significantly higher feeding rate (FR) than fish fed with diets supplemented with 12 mg vitamin K/kg (P<0.05). Specific growth rate (SGR) increased with increasing dietary vitamin K levels and reached the highest value when dietary vitamin K content was 12 mg/kg (P>0.05). Feed efficiency (FE) was the highest in fish fed with diet supplemented with ≥3.25 mg vitamin K/kg, intermediate with 2.15 mg vitamin K/kg supplemented diet and the lowest in the control group (P<0.05). FE reached the highest value when the dietary vitamin K content was 12 mg/kg (P<0.05) and showed a linear correlation with SGR (SGR = 0.01 FE + 0.95, R2= 0.95). The number of red corpuscles (RBC) in blood increased significantly with increasing dietary vitamin K level (P<0.05) and reached the plateau at 6.40 mg vitamin K/kg. The Hb content, Hct and serum Ca content followed the same trend as RBC and were the lowest in gibel carp fed with diet without vitamin K supplementation (P>0.05). HSI, CF and whole body composition were not affected by dietary vitamin K level (P>0.05). Based on the broken-line regression between FE or RBC and dietary vitamin K level, we concluded that the adequate supplemental dietary vitamin K content for gibel carp was 3.73—6.72 mg/kg.

Gibel carp; Vitamin K; Feed utilization; Haemotological index; Requirement

S965

A

1000-3207(2013)01-0008-08

10.7541/2013.8

2011-11-21;

2012-10-29

现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-46-19); 国家973项目(2009CB118702); 公益性行业(农业)专项(201003020, 201203015, 201203083); 国家自然科学基金委员会基金(31123001)和FEBL(2009FBZ03)资助

段元慧(1983—), 女, 山东莱芜人; 博士研究生; 研究方向为鱼类生理生态学。E-mail: joydyh1983@163.com

解绶启, E-mail: sqxie@ihb.ac.cn