克隆公猪血液生化指标测定与比较分析

薛振华，肖 炜，朱振营，王晓凤，杨宇泽，谷传慧，云 鹏*

(1.北京市畜牧兽医总站，北京100107; 2.中国检验检疫科学研究院 动物检疫研究所，北京100029)

家畜的血液生化指标不仅能反映其生理状态，体现机体健康情况，还是了解动物的饲养管理、生长发育规律的有效途径，同时也是兽医临床诊断疾病、防治疾病不可缺少的重要依据［1］。血液中相当一部分酶的活性还与品种遗传特性相关［2］。克隆公猪是在动物实验和生产中，利用无性繁殖技术(体细胞核移植技术，SCNT) 获得的、与供体猪同质的个体。国外已有针对克隆猪10 项血液生化指标的研究［3～5］，而国内少见报道［6］。本试验测定了克隆公猪不同年龄阶段的32项血液生化指标，并进行比较，以了解其种质特性，分析其与普通种公猪在此方面的异同，为克隆公猪的应用提供技术依据。

1 材料和方法

1.1 试验动物

用于采精阶段的克隆公猪5 头，其中12月龄2 头、18月龄3 头。对照组为相同饲养条件和采精阶段的普通公猪10 头，其中12月龄5 头、18月龄5 头。试验动物均为美系大白品种。

1.2 血样采集

于清晨、且空腹状态下，从每头猪的前腔静脉采血10 mL 左右，经2 000 r/min 离心10 min，收集血清。

1.3 测定指标

共32 项，包括: 总胆红素(TBIL) 、直接胆红素(DBIL) 、葡萄糖(GLU) 、尿素氮(BUN) 、肌酐(CREA) 、尿酸(UA) 、二氧化碳总量(TCO2) 、总蛋白(TP) 、白蛋白(ALB) 、蛋白比值(A/G) 、总胆固醇(CHOL) 、甘油三酯(TG) 、磷脂(PL) 、载脂蛋白A1 (APOA) 、r- 谷氨酰基转移酶(GGT) 、总胆汁酸(TBA) 、谷丙转氨酶(ALT) 、谷草转氨酶(AST) 、碱性磷酸酶(ALP) 、肌酸激酶(CK) 、肌酸激酶同工酶(CK-MB) 、乳酸脱氢酶(LDH) 、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH) 、血清淀粉酶(AMY) 、血清胆碱酯酶(CHE) 、钠(Na) 、钾(K) 、氯(Cl) 、总钙(Ca) 、镁(Mg) 、磷(P) 和铁(Fe) 。

1.4 测定方法

采用日立7600 全自动生化分析仪进行血液生化指标测定。

1.5 数据处理

应用SPSS 13.0 对测定值进行F 检验和单因素方差分析。为消除生化指标的测定易受样品采集、贮存方法、检测仪器等因素影响，使试验结果更具参考价值，在数据处理过程中对测定值进行了数据离散度分析。

2 结果

2.1 生化指标测定结果

血液生化测定指标分为四大类，包括蛋白和脂类、酶、有机物以及无机物，测定结果分别列于表1、2、3、4。同时，对各项测定值进行数据离散度分析，见图1、2。

表1 克隆公猪血液蛋白和脂类测定值

表2 克隆公猪血液酶测定值

表3 克隆公猪血液有机物测定值

表4 克隆公猪血液无机物测定值

图1 克隆公猪12月龄时各项生化指标测定值的离散度图

图2 克隆公猪18月龄时各项生化指标测定值的离散度

2.2 不同月龄生化指标比较

对克隆公猪12月龄时各项血液生化指标测定值F 检验结果表明，血液蛋白和脂类中，总蛋白(TP) 和蛋白比值(A/G) 的测定值与对照组差异显著(P ＜0.05) ; 血液酶类中，碱性磷酸酶(ALP) 的测定值与对照组差异显著(P ＜0.05) ; 血液有机物中葡萄糖(GLU) 、肌酐(CREA) 和二氧化碳总量(TCO2) 的测定值与对照组差异显著(P ＜0.05) 。其他测定值与对照组差异不显著。

对克隆公猪18月龄时各项血液生化指标测定值F 检验结果表明，血液蛋白和脂类中，白蛋白(ALB) 和蛋白比值(A/G) 的测定值与对照组差异极显著(P ＜0.01) ; 血液酶类中，碱性磷酸酶(ALP) 的测定值与对照组差异极显著(P ＜0.01) ; 血液有机物中，二氧化碳总量(TCO2) 的测定值与对照组差异显著(P ＜0.05) ; 血液无机物中，铁(Fe) 的测定值与对照组差异极显著(P ＜0.01) 。其他测定值与对照组差异不显著。

3 讨论

3.1 血清蛋白类

总蛋白(TP) 是由白蛋白(ALB) 和球蛋白(GLOB) 两部分组成的，二者具有维持血浆正常胶体渗透压、运输作用、缓冲作用、免疫作用、修补组织等主要生理功用［11］。TP含量高，有利于提高代谢水平和免疫力，促进动物健康、快速生长。试验数据显示，克隆公猪的TP 含量显著高于对照组，说明克隆公猪在代谢水平和生长速度方面优于普通对照公猪，这与克隆公猪的供体是经过选择的优秀个体有关，也可以说明克隆公猪遗传并表现了供体优良的生长性能。同时，蛋白比值(A/G) 稍低，提示白蛋白(ALB) 相对低和球蛋白(GLOB) 相对高，在一定程度上是机体的免疫功能强的表现，说明克隆公猪在免疫水平好于普通对照公猪。

3.2 血清酶类

动物血清中的碱性磷酸酶(ALP) 主要来自骨骼，由成骨细胞产生，它能促进磷酸钙贮集骨内而参与骨骼的钙化过程［12～14］。因此碱性磷酸酶是健康动物成骨细胞活动的一个指标，也是骨质形成的一个依据。试验数据显示，克隆公猪的ALP 含量显著高于对照组，说明克隆公猪的成骨细胞的活动性强于普通对照公猪，也能够说明在生长速度方面，克隆公猪具有优于普通对照公猪的潜能或者表现。这与国外的报道一致［3～5］。

3.3 血液有机物

血液中有机物含量的测定可以体现机体的代谢能力［12～14］。葡萄糖是机体的供能物质，试验数据显示，克隆公猪的葡萄糖含量处于正常的区间内，但较对照组高，说明在代谢水平方面优于普通对照公猪，这与克隆公猪的TP 含量显著高于对照组所表现出的意义相同。同时，参考二氧化碳总量(TCO2) 的测定值显示，机体处于良好的有氧氧化代谢水平。

尿素氮(BUN) 是蛋白质代谢后产生的废物，血清BUN 是动物体内反映蛋白质代谢和日粮氨基酸平衡状况的指标。当日粮中含氮物质增高，或体内氨基酸代谢旺盛、组织遭受破坏、肾功能障碍和血中尿素得不到正常排出时均会使血清BUN 浓度升高。克隆公猪与对照组尿素氮(BUN) 的测定值高于文献参考值，但是无显著差异，这可能与处于采精生产阶段的公猪日粮中蛋白含量高有关。

本研究针对克隆公猪在12月龄和18月龄两个阶段测定的32 项血液生化指标中，仅有碱性磷酸酶(ALP) 和二氧化碳总量(TCO2) 与对照组均显示出统计学差异，其余绝大多数与对照组无显著差异。因此，综合分析32 项测定指标可以表明，克隆公猪与普通种公猪在生理状态方面基本相似，而且在代谢和免疫水平上表现出更优的状态。

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