孙 健 史利国 (北京农业职业学院牧医系 北京 房山 102442)
“医者不辨药,如将不识兵”。中药标本在中兽医教学中不可缺少的是教学用具,中药植物原色标本是将新鲜植物的全株或一部分,经浸渍液和保存液的化学试剂或快速干燥等方法处理,保存在标本瓶内,使其保持植物原色。植物浸制标本色泽鲜艳,立体感强,形态逼真,能有效地保存中药材基缘植物的根、茎、叶、花、果实等多器官的原始形态。便于直观教学,其效果较腊叶标本好。但是其保色问题和保持长久不退色的问题一直是浸制标本制作的瓶颈。本文就不同颜色中药原植物的保色保存方法做一综述。
叶片呈现绿色主要取决于叶绿素化学结构中的镁离子,但是它不稳定,容易被破坏分解,易溶于福尔马林,故而采用常用的离子置换法,用稀酸中的氢离子将叶绿素中的镁离子置换出来,产生去镁叶绿素,它又跟铜盐发生作用,使铜离子迅速进入叶绿素分子,正好填补镁离子原来的位置,使叶片再次呈现绿色。这种绿色很稳定,不易被氧化,也不溶于福尔马林,所以能长久保持植物的绿色。
韩峻等将醋酸铜结晶加入50%冰醋酸溶液中,直加到溶液饱和为止,然后用4倍水稀释,再加热至80~85℃,把要做成标本的植物放进烧热的溶液中,继续加热,直到植物由绿变褐,再由褐转绿时,把植物取出用清水洗净,保存于5%福尔马林中,进行绿色标本的保存[1,2]。宋良科等对药用植物原色标本的制作进行了研究,结果发现将清洗且晾干的材料标本用7%硫酸铜溶液固定2~4d,取出洗净(根据标本的老嫩程度确定,老的时间长些,嫩的短些),再用0.2%亚硫酸溶液保存于标本瓶中,密闭瓶盖的方法,无论从效果、操作和经济适用上均较好[3]。刘淑琴将硫酸铜制成饱和溶液按比例将100份饱和溶液跟67份甲醛,333份水混合得到处理液,然后将绿色标本放入处理液中浸泡20d后取出,用清水洗净后浸入4%甲醛溶液中长期密封保存,其保色效果也很好[4]。对不适于热煮或药液不容易透入的植物,可以改用硫酸铜饱和水溶液700m1、福尔马林50m1、水250m1的混合液,将植物放入这种液体中浸渍,浸渍时间的长短,要视植物老嫩程度和种类而定,当植物褪成黄色而又重新变成绿色时,即可取出,用清水将药液洗净,然后放到5%福尔马林中保存,标本就制成了[1]。对于叶薄而嫩的植物因其在高温下易变软,可将50%乙醇90ml、福尔马林5ml、甘油2.5ml、冰醋酸2.5ml、氯化铜10g配成混合溶液,将标本浸渍数日,即可保色[5,6]。
植物体呈现红色部位主要是花和成熟的果实。植物显红色主要有类胡萝卜素和类黄酮类。类黄酮类是一大类水溶性细胞色素,其中主要是花青素。而花青素具有遇碱性溶液易变蓝、遇酸性溶液变红的特性。因此,采用合理的酸性溶液来加以处理即可达到使植物保持红色的目的。
宁小清实验发现用硼酸45g,95%酒精200ml,40%福尔马林200ml,加蒸馏水至1000ml,将植株置于其中浸制且保存,这种方法对澳洲合欢花、辣椒果、荔枝果的红色保存效果较好[7]。韩峻用硼酸粉450g、水2000~4000 m1、75~95%酒精2000m1,福尔马林原液300m1混合起来,取澄清液作为浸制液,直接用来保存标本。如果保存粉红色的标本时,须将福尔马林减至微量或不加[1]。刘 淑琴等研究发现将硼酸3g,40%的甲醛4ml与水400ml混合制成固定液,然后将洗干净的红色植物标本放在固定液中浸泡1~3d,如不发生混浊现象即可取出放入由甲醛25ml、甘油25ml、水1000ml制成的保存液或由10%亚硫酸20ml、硼酸10g、水580ml制成的保存液中长期密封保存,对较大的果实标本最好用注射器注入少量保存液再长期密封保存效果会更好[4,8]。
王荣祥等人取冰醋酸300ml加蒸馏水300ml成600ml,50%的醋酸溶液,醋酸铜48g加蒸馏水4000ml成另一溶液,二液混合,加热溶解,至煮沸,投入洗涤消毒过的原植物标本(山丹)煮10~20min,观察叶颜色由绿变黄,再由黄变成浅绿色时取出,蒸馏水洗净。封存于由亚硫酸5ml,甘油5ml加蒸馏水1000ml。配成的保存液中,颜色能长久保存[9]。
植物呈现黄色,主要是由于的花和果实含有类胡萝卜素,而类胡萝卜素又是由胡萝卜素和叶黄素组成,胡萝卜素为橙红色而叶黄素为黄色。他们不溶于水,性质稳定,所以黄色标本较容易制作。取6%亚硫酸500ml和80~90%酒精500ml加入400ml蒸馏水混合得保存液,将采集来的标本直接浸入保存液密封保存效果较好[4]。倪芝瑜等人用0.15~0.5%的亚硫酸直接保存桔红果实、山豆根花序、苏木花序。砂仁花序植物标本[10]。用5%的饱和硫酸铜固定后,再用0.2~0.4%的亚硫酸保存金花茶花枝、蓟罂粟花枝等植物标本。宁小清用亚硫酸50ml,95%酒精50ml,加蒸馏水至1000ml,将植株置于其中浸制且保存,效果较理想[7]。韩峻用亚硫酸饱和溶液568ml、95%酒精568ml、水4500ml混合起来取澄清液对标本进行了保存[1]。
包箐箐等人保存紫色果实(紫色葡萄)、紫色花(麦冬花、紫藤花)类植物时,先在250ml福尔马林、500ml氯化钠饱和溶液,再加4350ml蒸馏水配制成的处理液中浸2~3个月,取出后洗净,放入1%~2%的福尔马林液中长期保存[11]。徐秋阳等人用纯净水900ml,加入甲醛30ml,再加入甘油6ml,再和配置好的饱和硫酸铜溶液350ml,混匀,放入准备好的标本瓶作为固定液。浸泡至标本的颜色和原有的颜色基本一致即可。另取纯净水1200ml,加亚硫酸30ml,再放入硫酸铜5g和氯化钠10g,混合配制保存液。植物经固定后放入保存液盖好瓶盖并及时用石蜡封口,原植物标本果实颜色与新鲜原植物标本基本相同[12]。
(1)蓝色植物标本的保存:10%氯化亚锡、5%福尔马林、加少量蓝黑色墨水媒染后,用饱和硫酸铜固定,最后用2%福尔马林、0.2%亚硫酸保存。用于牵牛花、马鞭草花枝、桔梗花枝等,效果较好。(2)白色植物标本的保存:5~10%硫酸铜固定后,用2%~5%亚硫酸漂白1d,再用0.1~0.2%亚硫酸保存。用于栀子花枝、水栀花枝、九里香花枝等白色标本。
植物原色浸渍标本的制作是一项较复杂的生物技术,涉及到植物生理、生物化学等科学知识,随着科学技术的不断发展,其制作方法也在不断改进、更新。虽然绝大多数植物按物理和化学方法都能解决好保色问题,但也有一些植物保色效果不理想,有待进一步研究[6]。另外,电子标本不能完全代替传统的蜡叶标本和液浸标本,因为在许多方面,实体标本仍具有其独特的作用,比如植物新的形态变异或新种类、新类型的比较鉴定,从标本中提取样品,不同产地标本形态的变化,生物多样性研究等方面,传统标本的优势是电子标本所不能替代的[13]。总之,植物原色标本的制作,还有待于今后不断创新,以求得一个制作简便,效果较好的方法。
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[6]黄肇宇, 蒋波, 覃雪梅.植物标本原色泽的保色技术研究[J].玉林师范学院学报(自然科学), 2006, 3(27): 126-128.
[7]宁小清, 郭建华.植物绿色固定保色AB液的实验研究[J].广西中医学院学报, 2005, 8, 1: 3-5.
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