脂餐负荷前后ET-1、IL-6变化及其与动脉硬化关系的研究

杨淑玲，靳春荣，王 健，白 淘，吕吉元，梁建芳

动脉粥样硬化（AS）是始终贯穿内皮功能损伤的慢性炎症反应。其发病机制复杂，有多种细胞因子及炎性因子参与。内皮源性血管活性因子内皮素-1（endothelin-1，ET-1）和促炎因子白介素-6（interleukin-6，IL-6）是调节C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）促 AS进展的强效物质［1］。众所周知高脂血症是AS的重要危险因素，餐后阶段是致AS的关键时期，目前国内外有关脂餐负荷对动脉粥样硬化过程中内皮功能及炎性因子影响的研究鲜有报道。本研究在AS进展的不同阶段，给予脂餐负荷，分析负荷前后ET-1、IL-6变化，探讨脂餐负荷对动脉硬化的影响。

1 材料与方法

1.1 动脉粥样硬化模型建立 健康雄性新西兰大白兔10只（3月龄，体重2.5 kg～3 kg，购于山西省畜牧研究所），高脂喂养（含1%胆固醇，16%蛋黄，83%基础饲料）12周，且于初始及第4周、8周、12周给予脂餐负荷（含2%胆固醇，16%蛋黄，82%基础饲料）。

1.2 ET-1、IL-6检测 初始及第4周、8周、12周，分别于禁食后12 h及脂餐负荷后第2 h、4 h、6 h、8 h，经耳缘静脉取血2 m L（EDTA抗凝管），离心15 min，取上清冻存（置于-80℃冰箱）。全部实验结束时，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆ET-1及IL-6水平。

1.3 超声检查 初始及第4周、8周、12周，采用高频血管探头（7 MHz～10 MHz）检测实验动物腹主动脉，观察管腔有无狭窄、管壁内膜有无增厚及斑块形成。

1.4 病理检查 实验结束（第12周）时，处死实验动物，分离腹主动脉，常规HE染色，光镜观察血管横切面硬化情况。

1.5 统计学处理 应用SPSS13.0软件，计量资料以均数±标准差±s）表示，采用双时间因素重复测量法分析。P＜0.05为有统计学意义。

2 结 果

实验结束时，10只动物腹主动脉出现粥样硬化。动脉硬化过程中，脂餐负荷前后ET-1、IL-6情况详见表1、表2。

表1 动脉硬化过程中脂餐负荷前后ET-1变化±s） ng／L

表1 动脉硬化过程中脂餐负荷前后ET-1变化±s） ng／L

时间 n 空腹 餐后2 h 餐后4 h 餐后6 h 餐后8 h初始 10 102.86±5.91 114.29±18.151） 128.89±12.551） 122.82±18.791） 121.67±16.791）第4周 10 134.89±11.742） 142.82±6.271） 136.65±5.381） 137.59±3.621） 130.05±15.071）第8周 10 129.19±2.062） 135.54±15.271） 134.95±9.561） 128.83±9.231） 119.84±6.911）第12周 10 128.21±1.612） 146.20±7.921） 128.41±11.56 120.55±7.53 126.42±8.21同一周不同时间餐后与空腹相比，1）P＜0.05；不同周同一时点与初始相比，2）P＜0.05

表2 动脉硬化过程中脂餐负荷前后IL-6变化±s） ng／L

表2 动脉硬化过程中脂餐负荷前后IL-6变化±s） ng／L

时间 n 空腹 餐后2 h 餐后4 h 餐后6 h 餐后8 h初始 10 96.84±18.97 85.05±12.58 98.95±9.42 87.67±25.19 94.61±28.05第4周 10 97.14±20.85 93.96±7.64 104.35±8.17 107.73±26.41 103.80±27.41第8周 10 89.22±23.17 85.24±23.61 71.59±24.081） 87.91±23.43 90.20±10.25第12周 10 85.89±23.91 67.43±14.03 58.29±11.731） 71.01±23.97 76.20±27.23同一周不同时间餐后与空腹相比，1）P＜0.05

3 讨 论

餐后血脂与动脉硬化的关系已引起了人们普遍关注，已有学者从流行病病学、临床及动物实验等多方面证实：餐后代谢紊乱与动脉硬化密切相关。众所周知，内皮损伤是动脉粥样硬化的始动因素，同时动脉硬化又是一种炎症反应。

内皮损伤时，舒血管物质减少，缩血管物质增加（ET-1等）。早期内皮功能缺损的机制是炎症反应、血栓形成及细胞增殖，而ET-1可干扰此过程。现已证实，内皮功能可能与动脉硬化的损伤有关。Ceriello等［2］证实，糖尿病患者脂餐可影响内皮功能损伤和炎症。Giannattasio等［3］证实一次高脂饮食引起急性高三酰甘油血症，明显损害内皮功能，此损害对在有血脂紊乱者比基础血脂正常者更明显。但关于脂餐负荷对于无AS者、AS者内皮功能的影响以及AS不同阶段脂餐负荷后对内皮功能影响鲜有研究。本研究发现，随着持续高脂喂养及AS进展，ET-1水平逐渐升高，脂餐负荷后血浆中ET-1水平明显增加，这与上述既往研究结果相符。此外，本研究发现，初始时（无动脉硬化阶段）脂餐负荷后4 h ET-1增加最明显，且随着AS进展脂餐负荷后2 h ET-1增加最明显，随着AS进展，餐后内皮功能损伤出现时间提前，提示AS者的内皮功能更易于受脂餐负荷损伤，此类临床患者应避免高脂负荷饮食。

炎症是AS的驱动力，餐后低水平炎症即可促进内皮功能损伤，促炎因子（如IL-6）在此过程中起着主要作用［4，5］。IL-6为一种多效性促炎因子，AS早期可促进脂质条纹形成，加速有AS倾向的脂质损害进展［6］。Christian等［7］证实，血脂紊乱者其血管炎症水平与冠状动脉的严重程度有关，而与内皮功能无关。Manning等［8］发现，腹型肥胖女性脂餐后4 h～6 h IL-6水平明显增加，而体型瘦者餐后4 h增加明显。此外，Blackburn等［9］发现，腹腹型肥胖者脂餐负荷后IL-6升高。Magné等［10］证实，给予健康鼠一次饱和脂肪酸饮食，餐后2 h IL-6显著增加。Poppitt等［11］发现，健康男性脂餐负荷后6 h IL-6增加。目前关于脂餐负荷对AS过程中炎症反应的影响还未见报道。本研究发现，实验初始（无动脉硬化时）脂餐负荷后2 h，IL-6略降低，4 h、8 h略增加（4 h最明显）；4周时脂餐负荷后4 h、6 h、8 h IL-6略增加（6 h明显）；12周时脂餐负荷后4 h IL-6明显减少，这提示脂餐负荷对AS早期的炎症反应影响较大。

此外，由于本研究受样本量和时间所限，关于脂餐负荷对血管内皮功能和AS早期炎症反应的影响，尚需进一步深入研究。

［1］ Verma S，Li SH，Badiwala MV，et al.Endothelin antagonism and interleukin-6 inhibition attenuate the proathergenic effects of C-reactive protein［J］.Circulation，2002，105（16）：1890-1896.

［2］ Ceriello A，Assaloni R，Da Ros R，et al.Effect of atorvastatin and irbesartan，alone and in combination，on postprandial endothelial dysfunction，oxidative stress，and inflammation in type 2 diabetic patients［J］.Circulation，2005，111（19）：2518-2524.

［3］ Giannattasio C，Zoppo A，Gentile G，et al.Acute effect of high-fat meal on endothelial function in moderately dyslipidemic subjects［J］.Epub Arterioscler Thromb Vasc Biol，2005，25（2）：406-410.

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［6］ Han SN，Leka LS，Lichtenstein AH，et al.Effect of hydrogenated and saturated，relative to polyunsaturated，fat on immuneand inflammatory responses of adults with moderate hypercholesterolemia［J］.J Lipid Res，2002，43（3）：445-452.

［7］ Christian F.Inflammation but not endothelial dysfunction is associated with the severity of coronary artery disease in dyslipidemic subjects［M］.Hindawi Publishing Corporation Mediators of Inflammation Volume，2009：469.

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［11］ Poppitt SD，Keogh GF，Lithander FE，et al.Postprandial response of adiponectin，interleukin-6，tumor necrosis factor-alpha，and C-reactive protein to a high-fat dietary load［J］.Nutrition，2008，24（4）：322-329.