2012年HIV筛查实验室室内质量控制分析的评价

黄新辉，邹小健

(丰城市人民医院检验科,江西 丰城 331100)

艾滋病 (Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)的流行给人类健康和经济社会发展带来了严重的影响，要了解和掌握AIDS的感染情况，关键是医院实验室的检测技术，而HIV抗体的检测是当前AIDS诊断中最常用的方法，因此，提高实验室检测的准确性，减少假阳性和假阴性反应的发生，对诊断AIDS十分重要。为了更严谨准确地出示检测报告，笔者对本室进行了 ELISA法检测HIV抗体的室内质量控制，现将质控过程分析报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 HIV抗体诊断试剂盒：上海科华生物有限公司生产ELISA法HIV抗体检测试剂，试剂盒均在有效期内使用；HIV抗体质控血清购自卫生部临床检验中心,规格为8NCU/ml抗-HIV质控血清。

质控标准血清：包括内部对照质控血清和外部对照质控血清。内部对照质控血清为试剂盒内提供的阴性和阳性对照，内部对照血清是质量控制的基础。外部对照质控血清是为了监控HIV抗体检测的稳定性和重复性以及试剂盒批间差异而由实验室设置的一个弱阳性对照血清，以试剂盒临界值(cut-off)的2～3倍为宜。用HIV抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体高浓度血清后得到，按每次使用量配制分装而成，-20℃冷冻保存。不可反复冻融，一旦融化后应该存放在2～8℃，一周内使用完。

1.2 操作方法 HIV抗体检测操作严格按照说明书及本室SOP标准文件的操作规程进行操作。加样时标本从冰箱取出时必须平衡到室温后才能加样，每板设阴性对照各2孔、阳性对照各3孔，外部对照1孔，放入恒温箱37℃孵育30min，孵育后洗板6次，每次洗板浸泡1min，并按我室洗板机SOP标准文件规定进行洗涤。洗板后加酶标抗体，再37℃孵育30min，按上法洗板，再加底物液，孵育10min加终止液，用酶标仪双波长(450nm、630nm)比色，计算测定结果。

在最佳条件下，对同一批质控血清检测20次，获得1组S/CO值，求其均数(x)和标准差(s)，将均值和标准差分别在Levey-Jennings质控图的框架图中标示出来，绘制质控图。然后，在常规条件下，对同一批质控品绘制质控图，以最佳条件下的S/CO值为纵坐标，日期为横坐标，分别用红笔画出x±2s警告线，用蓝笔画出x±3s失控线，作出质控图框架。以后每日将质控血清随标本一起测定，将质控血清的S/CO值在质控图上找出相应的点，将点与点用线连接，每月作一张质控图，反映日常工作质量。

1.3 检测仪器 Biocell 2010型酶标仪：根据本室标准SOP文件的要求，定期进行期间检查，并详细填写期间检查记录。普朗全自动洗板机：严格按照本室标准SOP操作规程进行自校准，有自校准报告。电热恒温培养箱(上海电工医疗器械厂)：调节并控制温度在37℃左右。微量加样器：均经江西省南昌市计量所检定合格，并在检定周期内使用。

1.4统计分析 数据分析均采用SPSS11.5软件进行统计分析。

2 结果

2.1 2012年配制的外部对照质控血清在最佳条件下连续20次检测HIV抗体结果，其中阴性对照平均值0.098，阳性对照平均值2.598，获得1组S/CO值，其均数(x)=2.011，标准差 s=0.113，CV＝5.6%。

2.2 2012年1月至2012年12月本室每月质控结果见表1。

表1 2012年1月至2012年12月本室每月质控结果

从表1可见，本实验室在本年度本批次的质控品及质控结果CV值均小于10%，表明本批次质控血清的稳定性和灵敏度较好，均符合抗-HIV诊断试剂盒变异系数的可行限要求。

3 讨论

自从美国休哈特博士首创质量控制图以来，经过几十年的发展应用，已成为广义质量管理和评价日常检测数据是否正确的有效工具，也是最简单、最有效的统计技术之一[1,2]。开展实验室质控是保证实验室分析结果准确性的必要基础，也是保证实验间有可比性的关键。在抗-HIV筛查实验室中观察临界值对照的动态变化是监控每一次检验和各批次检验之间变化的一种方法，检验过程中十分微小的变化都可以引起人们的注意。如临界值对照偏移过度，比如临界值向负值偏移，常常提示同批检验样品有可能出现假阴性[3,4]。

室内质量控制是实验室内部对所有影响检测质量的各个环节进行系统控制，目的是让检验结果更准确可靠。本室2012年所开展的HIV室内质控工作中，用ELISA法检测HIV抗体，每次实验外部对照质控血清的S/CO值均在Levey-Jennings质控规定范围内波动，表明实验条件正常，实验数据可靠[5,6]。如果外部对照质控血清的S/CO值超出Levey-Jennings质控失控规则范围，称为失控，则本次实验结果不能被接受，应及时分析找出失控的原因，及时纠正，对检验过程进行回顾性分析，查找原因后给予纠正并重复测试，并最后作好试验记录。按HIV抗体检测的要求把临界值上下10%的范围定为灰区，对灰区标本要进行复测，以减少假阴性和假阳性结果的出现，并对其三个月后进行跟踪复测。引起室内质控失控的原因很多[7,8]。如换用新批号诊断试剂、仪器设备未经校定，加样量不准确，检验人员未经培训，质控血清反复冻融等，要及时查找原因予以纠正[9]。为了提高艾滋病的检测水平，购买质量可靠的 试剂材料也是很重要的，同时实验人员要加强工作责任心，实验过程中要严格按照操作规程，加入血液标本时要避免混入纤维蛋白原，放人低温冰箱的血清不能反复冻融，灰区的标本要进行复检，能做到以上这几点，才能避免假阳性和假阴性的发生，使艾滋病的检测工作能够准确、有效地开展[10]。

室内质控是对检验结果的即时性评价，通过对室内质控结果的连续观察，监测实验室检验结果的精密性[11]。室内质控是质量保证的基础，没有完善的室内质控措施就谈不上质量保证，即使在室间质评中取得很好的成绩也不能说明实验室检验结果的可靠性。因此，实验室的质量保证工作，应首先从室内质控抓起，持之以恒，不断观察、分析和解决实验中的质量问题，才能使检验工作的质量得到稳步提高[5,12]。

总之，要解决我们在质控考核中所发现的问题，关键在于检测技术人员在检测中应具有高度责任心，认真对待每一环节，严格按照操作规程进行操作，就能避免类似问题的出现，把艾滋病检测工作做得更好。

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