颈复康颗粒中羌活、秦艽的鉴别研究

张 灿，段树卿，李云霞△

(1.承德医学院，河北承德 067000;2.承德颈复康药业集团有限公司)

颈复康颗粒中羌活、秦艽的鉴别研究

张 灿1，段树卿2，李云霞2△

(1.承德医学院，河北承德 067000;2.承德颈复康药业集团有限公司)

目的:建立颈复康颗粒中羌活、秦艽的鉴别方法。方法:采用薄层色谱法对颈复康颗粒方中羌活、秦艽所含紫花前胡苷、龙胆苦苷进行定性鉴别。结果:斑点清晰，分离度理想，各斑点Rf值适中。结论:本研究中用于鉴别颈复康颗粒中羌活和秦艽的方法操作简便、准确，具有较好的实用性。

颈复康颗粒;羌活;秦艽;薄层鉴别

颈复康颗粒是颈复康药业集团有限公司的独家产品，由羌活、川芎、葛根、秦艽、威灵仙等21味中药组成，具有活血通络、散风止痛的功效，对颈椎病引起的脑供血不足、头晕、颈项僵硬、肩背酸痛、手臂麻木等症具有明显疗效。2010版药典中[1]，颈复康颗粒的质量标准有关于黄柏、黄芪、白芍、丹参的鉴别，葛根中葛根素的含量测定。为更有效的控制产品质量，拟增加定性鉴别的药味。羌活具有解表散寒、祛风胜湿、止痛之功效，秦艽具有祛风湿、通络止痛、退虚热、清湿热之功效[2]。羌活和秦艽在颈复康颗粒方中具有不容忽视的重要作用，因此，本研究拟通过薄层色谱法建立秦艽、羌活的定性鉴别方法，以期为制定质量标准提供依据。

1 仪器与试药

梅特勒万分之一分析天平，瑞士梅特勒-托利集团;KQ-500DE型数控超声波清洗仪，昆山市超声仪器有限公司;ZF-20D暗箱式紫外分析仪，上海顾村电光仪器厂。硅胶H板，青岛谱科分离材料有限公司(批号:20110509)，硅胶GF254板，烟台市化学工业研究所(批号:20120720)。

紫花前胡苷对照品(批号:111821-201001)、龙胆苦苷对照品(批号:110770-201013)、芍药苷对照品(批号:110736-201136)，中国药品生物制品鉴定所;羌活药材(批号:111101)、秦艽药材(批号:120801)、颈复康颗粒(批号:290490、290491、290492)，承德颈复康药业集团有限公司。

2 方法与结果

2.1 羌活的鉴别实验

2.1.1 样品制备:①取颈复康颗粒5g，加甲醇50ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干;残渣加水30ml溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇部分，蒸干;残渣加5ml甲醇溶解，作为供试品溶液。②照颈复康颗粒原处方配比，除去羌活，按工艺制备羌活阴性样品。取羌活阴性样品，照供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。③取羌活对照药材1g，加甲醇10ml溶解，超声20min，过滤，滤液作为对照药材溶液;另取紫花前胡苷对照品，加甲醇制成每ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

2.1.2 鉴别方法:照薄层色谱法(中国药典2010版附录Ⅵ B)试验，吸取对照药材溶液5μl，阴性样品溶液、供试品溶液各2μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨水(7:2:0.5)为展开剂展开，取出晾干，紫外光灯(365nm)下检视。

2.1.3 结果:供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，有相同的蓝紫色荧光斑点，Rf值为0.45，阴性对照无干扰(图1)。

图1 羌活薄层鉴别

2.2 秦艽的鉴别实验

2.2.1 样品制备:①取颈复康颗粒2g，加甲醇20ml，超声30min，滤过，滤液作为供试品溶液。②照颈复康颗粒原处方配比，除去秦艽，按工艺制备秦艽阴性样品。取秦艽阴性样品，照供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。②取秦艽对照药材粉末1g，加甲醇20ml溶解，超声15min，过滤，滤液作为对照药材溶液;另取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 鉴别方法:薄层色谱法(中国药典2010版附录ⅥB)试验，吸取阴性样品溶液、供试品溶液各5μl，对照品溶液、对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.1)为展开剂展开，取出晾干，紫外光灯(254nm)下检视。

2.2.3 结果:供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，有相同颜色的斑点，Rf值为0.50，阴性对照无干扰(图2)。

图2 秦艽薄层鉴别

3 讨论

羌活薄层鉴别曾尝试过甲醇超声、乙醚冷浸提取，石油醚(60-90℃)回流提取，只有用甲醇超声才能将紫花前胡苷有效提出，文献中报道的乙醚、石油醚等不能将颈复康颗粒中的紫花前胡苷提出[3-5]。展开剂曾试过三氯甲烷-甲醇系统、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇系统、正己烷-乙酸乙酯系统、石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯展开系统，结果发现三氯甲烷-甲醇系统展开效果相对较好，紫花前胡苷斑点与其它斑点分离度相对较好，但斑点不集中、有些拖尾。加入氨水后紫花前胡苷斑点有明显改善，斑点集中。最终确立展开剂为三氯甲烷-甲醇-氨水(8:2:0.5)。薄层板比较过硅胶G板、硅胶GF254板、3%醋酸钠板、硅胶H板，发现硅胶H板展开效果最佳。

龙胆苦苷易溶于甲醇，在颈复康颗粒中含量较多，文献报道多用超声法提取，本研究结果也表明用甲醇超声提取颈复康颗粒中的龙胆苦苷，方法可行，并且省时高效。关于秦艽鉴别展开剂，文献报道多采用乙酸乙酯-甲醇和乙酸乙酯-甲醇-水的不同配比，但应用于颈复康颗粒中秦艽的鉴别结果都不理想[6-9]。经多次尝试，最终确立三氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.1)为展开剂，不但能得到满意的结果，且阴性无干扰。

颈复康颗粒疗效好，市场广阔，深受患者的好评。对颈复康颗粒的质量标准进行完善与提高，既能提高颈复康颗粒的质量控制水平，也可为其它大品种制剂的质量标准研究提供借鉴。本研究采用薄层色谱法对颈复康颗粒中羌活、秦艽进行鉴别，方法简便、准确、快速，可应用于颈复康颗粒的质量控制。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部[S].北京:化学工业出版社，2010.1138-1139.

[2]高学敏.中药学[M].北京:中国中医药出版社，2007.59，186.

[3]朱美晓，陈燕，易进海，等.羌活药材薄层色谱鉴别与含量测定[J].时珍国医国药，2011，22(1):116-117.

[4]施佳平，陈土荣，袁伟彬，等.安泰巴布剂中当归、独活、羌活等药味的鉴别研究[J].今日药学，2010，20(10):16-18.

[5]周晔，阴元魁，林斯鸿.浓缩天麻丸质量标准研究[J].中国现代药物应用，2009，3(15):7-9.

[6]冯沛森.痹痛通胶囊质量标准的研究[J].制剂技术，2004，13(1):64-66.

[7]吴美香，高洪琳，张震，等.骨筋丸胶囊中秦艽的龙胆苦苷的检测研究[J].中国药品标准，2011，12(3):202-205.

[8]孙彩艳，张天栋，孙炳才.痛风灵注射液的制备及质量控制[J].中医研究，2005，18(11):19-20.

[9]郭丽红，郭琪，刘海英，等.风湿宁颗粒的薄层色谱鉴别研究[J].时珍国医国药，2005，16(11):1125-1126.

STUDY ON THE IDENTIFICATION OF RHIZOMA SEU RADIX NOTOPTERYGII AND RADIX GENTIANAE MACROPHYLLAE IN JINGFUKANG GRANULE

ZHANG Can, DUAN Shu-qing, LI Yun-xia
(Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective:To identify Rhizoma seu Radix Notopterygii and Radix Gentianae Macrophyllae in Jingfukang granule.Methods:Thin layer chromatography was used to identify nodakenin of Rhizoma seu Radix Notopterygii and gentiopicroside of Radix Gentianae Macrophyllae in Jingfukang granule.Results:Thin layer chromatography results showed that the spots were fairly clear, the separation and Rf value were satisfactory.Conclusions:The method in this study that identify Rhizoma seu Radix Notopterygii and Radix Gentianae Macrophyllae in Jingfukang granule is simple and accurate, and has better practicality.

Jingfukang granule;Rhizoma seu Radix Notopterygii;Radix Gentianae Macrophyllae;Thin layer chromatography identif i cation

R917

A

1004-6879(2013)06-0460-02

2013-05-28)

△ 通讯作者