VEGF在SCLC患者血清和病变组织中的表达及意义

吕立丽，肖建波

（河北省唐山市人民医院肿瘤科，河北唐山 063000）

·论 著·

VEGF在SCLC患者血清和病变组织中的表达及意义

吕立丽，肖建波

（河北省唐山市人民医院肿瘤科，河北唐山 063000）

目的研究小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）患者癌组织及血清中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及其与SCLC生物学特性之间的关系。方法采用放射免疫法及免疫组织化学SP法检测SCLC患者血清及癌组织中VEGF的表达。结果SCLC患者血清VEGF的表达与癌组织VEGF的表达呈正相关；局限期有淋巴结转移患者癌组织VEGF表达高于无淋巴结转移患者（P＜0.05），而二者血清VEGF表达差异无统计学意义（P＞0.05）；局限期患者血清及癌组织VEGF的表达均低于广泛期患者（P＜0.05）。结论在SCLC患者中，血清VEGF水平与癌组织VEGF表达相关，并与分期有关，VEGF表达变化可能成为SCLC新的肿瘤标志物。

癌，小细胞；血管内皮生长因子类；血清

血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是目前已知的作用最强的促血管生成因子之一，对肿瘤血管生成及血管通透性增加有重要的调节作用，能特异性地促进细胞分裂、增殖及迁移，在肿瘤的发生、发展、侵袭过程中起着至关重要的作用。以往研究［1］表明，VEGF在组织和血清的高表达与肿瘤转移和复发密切相关，且血清VEGF水平及阳性率与肿瘤分期、肿瘤组织微血管密度（mircovessel density，MVD）、肿瘤组织VEGF表达水平相关［2-4］。但关于VEGF表达与小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）的研究报道较少。我们通过放射免疫法及免疫组织化学法分别检测SCLC患者血清及病变组织中VEGF的表达，探讨SCLC患者血清及病变组织VEGF的表达与淋巴结转移情况、分期的关系，旨在揭示其与SCLC发展的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2009年3月—2011年3月唐山市肿瘤医院未经任何治疗的SCLC患者40例，其中男31例，女9例，年龄40～72岁，平均58岁。以上患者均由纤维支气管镜直视下采取病理组织样本进行病理确诊，SCLC分期依据美国联合癌症分类委员会建议的分期标准，即局限期和广泛期。局限期指SCLC局限于同侧胸腔、纵隔和锁骨上，但不能有明显上腔静脉压迫、声带麻痹和胸腔积液；广泛期是指病变超越了上述范围。为了明确疾病的分期，40例SCLC患者都进行了如下的检查，体格检查、头胸腹部肾上腺CT、脑MRI、纤维支气管镜检查和骨扫描、PET-CT扫描、胸腔心包积液细胞学检查、纵隔镜、骨髓活组织检查和（或）骨髓穿刺。所有患者术前均未接受过化疗或放疗治疗。VEGF试剂盒由北京华英生物技术研究所提供，VEGF免疫组织化学抗体为兔抗人抗体，由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 标本采集：所有患者均于清晨空腹抽取静脉血3mL置于普通促凝管中，室温静置30min，3 500r/min离心10min，取上层血清用于VEGF的检测。

1.2.2 免疫组织化学染色：将待检测标本统一切成4μm厚石蜡切片，提取组织细胞，按试剂盒说明进行免疫组织化学（SP法）染色。石蜡切片脱蜡至水，蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min，抗原热修复。3％ H2O2室温孵育5～10min，以消除内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗，2min×3次。滴加一抗工作液VEGF，4℃过夜。PBS冲洗，2min×3次。滴加试剂1（polymer helper），室温孵育20min，PBS冲洗，2min×3次。滴加试剂2（poly peroxidase-anti-mouse/ rabbit IgG），室温孵育20～30min，PBS冲洗，2min× 3次。显色剂DAB显色。自来水充分冲洗，HE复染，脱水透明，封片。结果判定，VEGF表达于癌细胞胞浆，呈棕黄色颗粒；计数5个不同高倍视野下200个癌细胞，阳性细胞数＞10％为该抗原表达阳性（图1），≤10％为阴性（图2）。

图1 癌组织VEGF的阳性表达（免疫组织化学×100）Figure 1 The positive expression of VEGF in tumor tissue（immunohistochemistry×100）

图2 癌组织VEGF的阴性表达（免疫组织化学×100）Figure 2 The negative expression of VEGF in tumor tissue（immunohistochemistry×100）

1.2.3 放射免疫法检测：分别取缓冲液200μL，零标准液100μL，标准液100μL，标本100μL，将125IVEGF 100μL除留取对照外，分别加入上述4种标本中，再将VEGF抗体100μL分别加入零标准液、标准液及标本中，混匀，4℃放置24h。分别将分离剂500μL加入125I-VEGF空白组、缓冲液、零标准液、标准液及标本中，混匀，室温放置15min，3 500r/min离心15min。弃上清，测沉淀计数。由全自动放射免疫γ计数仪直接读出结果。

1.3 统计学方法：应用SPSS13.0版本统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，组间比较采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 癌组织VEGF表达与血清VEGF浓度的相关性：SCLC患者癌组织VEGF表达水平与血清VEGF浓度呈正相关（r=0.63，P＜0.05），癌组织VEGF表达水平越高，血清VEGF浓度也越高。

2.2 局限期淋巴结转移与血清VEGF浓度的关系：血清VEGF浓度在局限期SCLC患者有、无淋巴结转移之间差异无统计学意义（P＞0.05），提示淋巴结是否有转移可能对血清VEGF浓度无影响。见表1。

表1 有、无淋巴结转移SCLC患者血清VEGF浓度比较Table 1 Com parison of serum VEGF levels in patients of SCLC w ith lym ph nodemetastasis and those w ithout lym ph nodemetastasis

2.3 临床分期与血清VEGF浓度的关系：SCLC局限期与广泛期血清VEGF水平差异有统计学意义（P＜0.05），提示血清VEGF水平可能与SCLC的分期有关。见表2。

表2 局限期与广泛期SCLC患者血清VEGF浓度比较Table 2 Com parison of serum VEGF levels in patientsw ith ED-SCLC and those w ith LD-SCLC

2.4 局限期淋巴结转移与癌组织VEGF表达的关系：有淋巴结转移局限期SCLC患者癌组织VEGF表达高于无淋巴结转移患者（P＜0.05），提示癌组织VEGF表达与局限期SCLC患者是否有淋巴结转移有关。见表3。

表3 有、无淋巴结转移SCLC患者癌组织VEGF表达比较Table 3 The tissue expression of VEGF in patients of SCLC w ith lymph nodemetastasis and those w ithout lymph nodemetastasis

2.5 临床分期与癌组织VEGF表达的关系：临床分期与癌组织VEGF表达有关，广泛期VEGF表达高于局限期（P＜0.05）。见表4。

表4 局限期与广泛期SCLC患者癌组织VEGF表达比较Table 4 The expression of VEGF in carcinoma tissue of patientsw ith ED-SCLC and those w ith LD-SCLC

3 讨 论

本研究证实肺癌组织中有VEGF的表达，这与文献报道［1，5］VEGF促肿瘤生长，对肿瘤血管内皮细胞的增殖和迁移等发挥着重要作用相一致，肺癌组织和血液中均有VEGF水平的升高［6］。本研究检测的40例SCLC患者病理组织VEGF的表达水平与血清VEGF浓度呈正相关，提示血清VEGF可反映癌组织VEGF的表达情况，与以往的研究报道相符［7-9］。

本研究结果证明癌组织VEGF表达与SCLC分期、淋巴结转移有关，局限期VEGF表达低于广泛期，局限期无淋巴结转移的表达低于有淋巴结转移患者，差异有统计学意义，同时血清VEGF浓度局限期也低于广泛期，差异有统计学意义，提示VEGF可作为肺癌发生发展的临床监测指标；但SCLC患者有淋巴结转移与无淋巴结转移血清VEGF浓度差异无统计学意义，可能与影响血清VEGF的因素较多［10-11］和患者例数较少有关。

因此，本研究结果为明确血清中VEGF在SCLC发展中的作用和作为一种肿瘤检测标志物的可行性提供了实验依据，而VEGF反映淋巴结转移情况及分期的具体浓度有待进一步探讨。

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（本文编辑：刘斯静）

表1 2组对药物知识了解程度和治疗依从性比较

3 讨 论

慢性心力衰竭的治疗是针对病因和症状用药调整，正确的药物治疗方法是治疗疾病的前提，若患者不服从治疗，不按规定用药，则不能达到预期的目的和效果。所以，合理科学用药和长期服药依从性的建立至关重要，因此要求护士不但要了解此类疾病的治疗方法、过程，更要参与到治疗当中，保证患者严格遵医嘱用药。降低住院率和病死率。

【参考文献】

［1］ 陆再英，钟南山.内科学［M］.7版.北京：人民卫生出版社，2008：170-173.

［2］ 吴学思.慢性心力衰竭的药物治疗进展［J］.中国全科医学，2011，14（6）：30-31.

［3］ 姚景鹏.内科护理学［M］.北京：北京大学医学出版社，2008：71-76.

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（本文编辑：赵丽洁）

EXPRESSION OF VEGF IN SERUM AND LESION TISSUE AND ITS VALUE IN PATIENTSW ITH SCLC

LV Lili，XIAO Jianbo
（Department of Oncology，the People's Hospital of Tangshan City，Hebei Province，Tangshan 063000，China）

Objective To study the expression of vascular endothelial growth factor（VEGF）in serum and tumor tissue of patientswith small cell lung cancer（SCLC）and to explore its correlation with biological characters of the disease.MethodsExpression of VEGF in serum of patientswith SCLC was detected by radioimmunoassay.Immunohistochemistry method（SP）was used to examine VEGF expression in tumor tissues.ResultsSerum VEGF level in patients with SCLC was correlated with the tumor tissue expression of VEGF（P＜0.05）；The expression of VEGF in tumor tissue of limited diseasesmall cell lung cancer（LD-SCLC）patients with lymph node metastasis was higher than those without lymph nodemetastasis（P＜0.05）.But there was no significant difference in serum VEGF between the two groups（P＞0.05）；The expression of VEGF in serum and tissue of patientswith LD-SCLC was lower than those with extensive disease-small cell lung cancer（ED-SCLC）（P＜0.05）.ConclusionThe serum level of VEGF in patients with SCLC is correlated with the tissue expression of VEGF；There are remarkable correlations between the expression of VEGF and clinical stage.VEGFmay be identified as a new diagnostic marker in SCLC.

carcinoma，small cell；vascular endothelial growth factors；serum

R734.2

A

1007-3205（2013）02-0140-04

2012-03-22；

2012-04-16

吕立丽（1978-），女，河北玉田人，河北省唐山市人民医院主治医师，医学学士，从事肿瘤放化疗研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.02.006