不同蛋白质来源和蛋白质水平对幼年藏獒适口性的影响

■ 王钰飞 丁丽敏 付京杰 王建梅

（1.中国农业大学动物科技学院，北京 100094；2.北京济海兴业科技开发有限公司，北京 100096）

藏獒（Tibetan mastiff）是西藏獒犬的简称。原产地青藏高原。它能在高寒、低氧、气候多变的环境中健康生长。智商高，判断能力强，记忆力惊人，能对地震、雪崩事先预料。不仅是高原优势的牧马放羊犬，也是护领域、护食物、护庭院型的作业犬，受到海内外人士的喜爱。

宠物犬粮中蛋白质组成是决定犬粮品质的重要因素。蛋白质原料分为两大类：植物性蛋白质和动物性蛋白质。犬喜食肉类和脂肪，可杂食，接受植物性和动物性饲料。国内外许多研究表明单一的植物性蛋白质或动物性蛋白质日粮没有两者混合使用效果好。宠物食品行业常用的蛋白质原料包括肉骨粉、鸡肉粉、鱼粉和豆粕等。对于不同蛋白质原料的选择在家畜和家禽研究上有较多的报道，但是在犬猫等宠物上的研究较少。宠物食品的适口性会影响宠物犬猫对饲料的选择。例如，犬更加喜欢甜味日粮相对未添加甜味的空白粮，与人和鼠类相似。目前，欧美等发达国家对宠物食品的适口性的研究较多，不仅从食物方面对适口性进行研究，而且也扩展到宠物生理学、行为学，甚至心理学上。国内对宠物食品适口性的研究才刚刚起步，相关报道甚少。

本试验拟通过选取我国宠物食品行业常用蛋白质原料（包含5种动物性蛋白质原料和2种植物性蛋白质原料）配制动植物蛋白质混合日粮，并配制4种不同蛋白质水平日粮。比较不同的蛋白质原料和不同蛋白质水平对藏獒适口性的影响，为合理设计藏獒日粮配方，降低饲料成本提供理论依据和科学参考。

1 试验材料和方法

1.1 试验日粮组成和营养水平

试验日粮参照美国NRC（2006）犬营养需要标准配制，膨化制粒。试验待测原料均为市场销售宠物食品生产原料，分别为玉米蛋白粉、豆粕、鸡肉粉65、鸡肉粉80、猪肉粉80、鱼粉65、鸭架粉65。饲料原料化学组成见表1。试验日粮于北京济海兴业科技有限公司加工生产，加工工艺参数参照公司正常商品犬粮加工参数，各日粮保持加工挤压膨化参数一致。试验日粮组成及营养水平见表2。

表1 饲料原料的化学组成（%，风干基础）

表2 试验日粮组成及营养水平（风干基础）

1.2 试验设计与饲养管理

试验于北京济海兴业科技开发有限公司试验犬舍进行，试验动物选取5～6月龄幼年藏獒16只，平均体重(24.13±1.42)kg；分成2个组，每组体重、雌雄尽量保持平衡，每组8个重复，每个重复1只。适口性测定采用国际通用适口性比较测定方法“双盆法”，试验设计8组对比试验（A1vs.A2；B1vs.B2；B2vs.C2；D2vs.E2；E2vs.F2；G1vs.G2；G2vs.G3；G3vs.G4）来评估幼年藏獒对不同蛋白质原料日粮和不同蛋白质水平日粮的偏好。试验过程中每只藏獒单独饲养在2.7 m×3.5 m的犬舍，舍外有2.6 m×3.3 m活动场，均单栏饲养。每天07:00和18:00定时定量饲喂，每次采食时间30 min，提供日粮总量为NRC(2006)推荐正常能量维持需要量（MJ/d=0.54×BW0.75）采食量的1.2～1.3倍，保证提供日粮满足试验犬的每日采食量。每组预试期2 d，正试期10 d。试验过程中准确称量采食前后每个盆中的日粮重量，记录每天藏獒每种日粮的采食量，并记录每只藏獒对每组试验两种日粮的首选日粮。每次饲喂前调整两个食盆的左右位置,且要保持两盆之间距离在10 cm左右，使试验动物能够随意选择两盆内的日粮。记录首选日粮后迅速离开，确保动物采食期间无人为干涉。自由饮水。

1.3 指标测定

采用凯氏定氮法测定饲料原料和试验日粮中的粗蛋白质含量，采用索式提取法测定粗脂肪的含量，采用（105±2）℃烘箱干燥法测定水分含量，干物质通过计算w(DM)=1-w(moisture)，采用（550±20）℃烘箱干燥法测定灰分含量，采用高锰酸钾(KMnO4)仲裁法测定钙含量，采用钼黄比色法测定磷含量。

适口性喜好程度依据日粮的采食率进行评价，采食率为0.5表示两者没有偏爱差异，采食率计算公式为：

采食率矫正系数可以观察采食率相对无差异0.5的程度，以反映适口性偏爱差异的显著性。

采食率矫正系数计算公式为：采食率矫正系数=采食率-0.5。

1.4 数据处理

使用SAS 9.0统计软件PROC MEANS过程进行t检验，数据结果以“平均值±标准误”的形式表示，以P＜0.05作为差异显著性的判断标准。

2 结果与分析

2.1 不同蛋白质原料日粮对幼年藏獒适口性的影响（见表3）

表3 幼年藏獒对不同蛋白质原料日粮适口性的比较

由表3可知，在动物性蛋白质源相同情况下，添加不同的植物性蛋白质原料玉米蛋白粉和豆粕，玉米蛋白粉组的采食率（57%）高于豆粕日粮组的采食率（43%），差异不显著（P＞0.05）。玉米蛋白粉日粮组的采食量、首选日粮也都略高于豆粕组日粮，差异也不显著（P＞0.05）。在植物性蛋白质相同情况下，配制日粮时添加不同动物性蛋白质原料，在表3中试验2结果发现，鸡肉粉65组日粮的采食率与鱼粉65组差异不显著（P＞0.05）。从试验3中可以看出，猪肉粉80的采食量和采食率都明显高于鸡肉粉65组，差异极显著（P＜0.01），且猪肉粉80组日粮的首选日粮次数（88%）也明显高于鸡肉粉65组的首选次数（12%）。试验4比较了鸡肉粉80组日粮和鸡肉粉65组日粮适口性差异，结果发现蛋白质含量较高的鸡肉粉80要比鸡肉粉65的采食量和采食率极显著提高（P＜0.01），首选日粮的次数，鸡肉粉80组日粮（74%）也明显高于鸡肉粉65组日粮的首选日粮次数（26%）。试验5中比较两种蛋白质含量接近的动物性蛋白质原料鸡肉粉65和鸭架粉65，结果显示两者采食量和采食率很接近，差异不显著（P＞0.05），且首选日粮次数也非常接近。

2.2 不同蛋白质水平对幼年藏獒适口性的影响（见表4）

由表4可知，选取不同蛋白质水平（19.92%、23.24%、27.90%、34.28%）的日粮进行适口性比较，发现三组对比试验均有明显的差异（P＜0.05）,4个蛋白质水平处于中间蛋白质水平（27.90%）的日粮G3更容易被幼年藏獒接受。从试验6可以看出，日粮G1的采食量和采食率都比日粮G2的高（P＜0.01），且首选日粮次数（66%）也明显高于对低蛋白质水平组（34%）。试验7中比较蛋白质水平为23.24%的日粮G2和蛋白质水平含量为27.90%的日粮G3，发现蛋白质水平较高的日粮G3要比蛋白质水平较低的日粮G2采食量和采食率明显高，差异极显著（P＜0.01），且日粮G3首选日粮次数也高于日粮G2。试验8日粮G3的采食率比蛋白水平更高的日粮G4(40%)的好，差异显著（P＜0.05）,日粮G3首选日粮次数（61%）也明显高于日粮G4的首选日粮次数（39%）。

表4 幼年藏獒对不同蛋白质水平日粮适口性的比较

3 讨论

3.1 不同蛋白质原料和蛋白质水平对幼年藏獒适口性的影响。

本研究结果表明在动物性蛋白质完全相同的情况下，添加不同植物性蛋白质原料玉米蛋白粉和豆粕两种日粮适口性没有明显的差异，从表3试验1中数据对比趋势可以看出，玉米蛋白粉组日粮的采食量和采食率都要比豆粕日粮组的高（P＞0.05）。但通过两种日粮比较可知，对幼年藏獒来说玉米蛋白粉的适口性略好于豆粕。Félix等报道添加豆粕的日粮的采食率要比没有添加豆粕的对照组采食率要高（P＜0.05）,而且添加豆粕组的首选采食次数也要更多。但是豆粕中含有水苏糖、棉籽糖和非淀粉性多糖,这些可能限制豆粕在宠物食品中的使用量。玉米蛋白粉作为玉米加工过程中的副产品，与饲料工业常用的豆粕、鱼粉相比，不仅具有资源优势，而且抗营养因子少，安全性能好。但关于玉米蛋白粉在宠物食品上的应用研究几乎很少有报道。本试验研究表明，在宠物食品中玉米蛋白粉与豆粕的适口性没有差异，玉米蛋白粉的适口性略好于豆粕。

动物性蛋白质原料在宠物行业应用更加广泛，尤其是鸡肉类产品应用较为广泛，是一种很好的蛋白质原料，且对犬的适口性很高。如表3试验2可知，在植物蛋白质原料相同情况下，添加动物性蛋白质鱼粉65和鸡肉粉65，结果发现两者采食量和采食率没有明显差异，这也与Foladar等研究结果一致，一些鱼类蛋白质与鸡肉粉适口性差异不显著。而在试验3和试验4中选取蛋白质含量比鸡肉粉65更高的动物性蛋白质猪肉粉80和鸡肉粉80与鸡肉粉65进行适口性比较，结果发现蛋白质较高的猪肉粉80和鸡肉粉80采食量和采食率都要比鸡肉粉65要高，且差异极显著（P＜0.01），且首选日粮比例也更高，因此可以看出蛋白含量更高的蛋白质原料鸡肉粉80比鸡肉粉65适口性更好。而且从日粮营养水平上看，猪肉粉80组日粮蛋白水平略高于鸡肉粉65组，鸡肉粉80组日粮和鸡肉粉65组蛋白水平很接近。这可能是由于犬继承了其野生祖先对高蛋白饮食的喜好，它们通常会选择高蛋白食物，其中蛋白质能提供25%～30%的能量需求。姬真真等研究不同蛋白水平（16.82%、18.32%、19.89%、21.06%）对4～8月龄藏獒生长状况的影响，发现高蛋白组日粮采食量和日增重都较高，且生长发育状况最好。但是日粮蛋白质水平应在正常合适的范围内，蛋白质含量很高的犬粮常常被认为对犬有害。而且从表4中可以看出，当日粮蛋白质水平达到34.28%的日粮G4适口性却没有蛋白含量较低的日粮G3（27.90%）适口性好（P＜0.05）。因此可以得出，不同的蛋白质水平日粮对幼年藏獒的日粮适口性有较大的影响，蛋白质水平在23%～35%之间日粮适口性可能最好，根据本试验数据可以发现27.90%蛋白质含量更容易被幼年藏獒接受。

动物性蛋白质原料不仅为宠物食品提供充足蛋白质，还是提供Ca和其他矿物质元素的重要原料。从本研究的8组适口性对比试验可以发现，两种日粮进行适口性比较发现灰分含量较低的一组适口性会更好，即日粮粗灰分含量越低，对幼年藏獒的适口性越好。Aldrich曾报道低灰分的日粮猫更加喜欢，而关于灰分含量对犬适口性的影响没看到相应的报道。通过本试验可以总结出低灰分的日粮对犬的适口性也更好。

3.2 宠物食品适口性的影响因素及评定方法

本研究主要探究不同蛋白质原料和蛋白质水平对幼年藏獒日粮适口性的影响。宠物食品适口性是决定其品质的一个非常重要的指标，如果适口性不好，犬不爱吃，营养的全价性就不能体现。影响宠物食品适口性的因素很多，从目前报道和研究的结果看，除了宠物的自身因素，如宠物的种类、品种、生理特点、行为特征等以外，还与食品本身的特点，如食物的味道、气味、质地、颗粒大小、组成成分、成分来源、物理性质等有关。而且不同的动物种类、同一种动物的不同生长阶段及生理状况，对饲料适口性的要求不同。

测定食物的适口性最大的问题是：食物适口性的组成部分不明确，测定适口性的方法很多，并且测定技术也在不断改进。我们不能像在人类食物测试中那样向动物询问一些相关问题，因此我们必须选择动物行为中的一些可以观察的行为，并记录下来。国外研究学者设计了很多测试日粮适口性的方法，并且这些方法还在不断的完善和更新。主要方法有：单日粮法、自由选择法（偏食性测定法）、操作性条件反射、瘤胃瘘管与食道瘘管假饲法，但被大家广泛接受的“自由选择法”，即“双盆法”，是宠物食物适口性研究的专业经典方法。目前很多关于适口性的试验使用这种方法，而且很多人通过这种方法得到了可靠的数据。

在双盆法试验中，有5个可作为数据分析的评估量：平均日采食量、消耗量之差：A-B；采食率（IR）：A/（A+B）或B/（A+B）；采食比（CR)：A/B；首选日粮（FC）:A或B优先采食次数/总次数。消耗量之差A-B和采食率（IR）两者在统计分析上都没有什么问题。每天每个动物都可以计算得到一个度量值，这个度量值先在不同的天数之间取平均值，再在不同的动物之间取平均值。使用A/B形式来表达试验结果,可是当食物B没有被消耗时，这个值就不能定下来，所获得的数据就得在进行统计分析之前放弃或者更改。另一个问题是单就A/B比值看来，如果动物更喜欢食物A，这一比值的范围可以从1.0到无穷大，如果动物更喜欢食物B，那么这个比值只局限于0～1.0之间，因此A/B不能明显地表现出饲料的适口性程度。相比之下，A/(A+B)或B/(A+B)则更直观、客观、可靠。所得的值分别在0～0.5或0.5～1.0之间，直接显示出适口性的好坏程度。其他的评估量虽然是学界公认要测量的量，但没有文献确实的应用这些数据说明一些问题，只说可以提供额外的信息。在Griffin博士倡导适口性试验应该统一使用一个标准进行分析，同时他也同意IR是5个标准中最适合的，Trivedi等也认为采食率是评价适口性喜好程度的最佳参数。

本试验选用双盆法，并记录试验过程中藏獒对每两种日粮的首选日粮和采食量，计算出采食率。结果通过分析采食量、采食率和首选日粮进行评定日粮的适口性差异，但在三者数据有不一致时，以采食率为准。从表4试验8结果可以看出，不同蛋白质水平含量的日粮G3和日粮G4，两者平均日采食量分别是(332.5±30.9)、(277.5±43.5)g/d，可以看出G3日粮的日采食量略高于G4日粮的日采食量，但是差异不显著（P=0.278）。G3日粮和G4日粮的平均日采食率分别是60%和40%，差异显著（P＜0.05）。因此可以得出采食量的差异显著性不一定和采食率保持一致。同时，通过8对适口性试验结果可以发现，每组日粮中首选日粮比例较高的日粮，该日粮的采食率也较高。这可能与犬具有较强的嗅觉能力有关，犬的嗅觉系统比人类发达的多，犬的嗅脑占大脑比例的大小为人的106～108倍，与嗅觉先关的受体细胞数达 7.0×108～2.0×109个，所以嗅觉决定犬是否采食某种食物的主要因素。首选日粮（FC）是试验动物在采食前通过嗅觉感知食物气味，并做出选择。因此可以得出首选日粮（FC）和采食率（IR）具有一致性，即首选日粮次数较多的往往适口性较好。

4 结论

①不同蛋白质原料对幼年藏獒适口性存在差异，植物性蛋白质玉米蛋白粉和豆粕差异不显著(P＞0.05)。动物性蛋白质蛋白质含量接近的鱼粉65、鸭架粉65和鸡肉粉65适口性差异不显著(P＞0.05)；而蛋白质含量较高的鸡肉粉80、猪肉粉80都要比鸡肉粉65的适口性好，差异极显著(P＜0.01)。

②不同的蛋白质水平日粮对幼年藏獒适口性有影响，蛋白质水平在23%～35%日粮适口性对幼年藏獒更好（P＜0.05），蛋白质含量为27.90%的日粮比23.24%和34.28%的日粮适口性更好(P＜0.05)。

③日粮的粗灰分含量对幼年藏獒适口也有一定的影响，低灰分的日粮对幼年藏獒适口性更好（P＜0.05）。

（参考文献21篇，刊略，需者可函索）