冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的干扰及处理方法

王佳

冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的干扰及处理方法

王佳

目的通过研究进而分析出高效价冷凝集素对血型鉴定和交叉配血试验的影响。方法将红细胞或二巯基乙醇(2-me)放入37℃～45℃的生理盐水反复洗涤，达到对红细胞的处理目的，在进行正反定型及交叉配血前需对此前的红细胞与血清做吸收放散处理。结果处理以后的标本正反定型及交叉配血未出现异常反应。结论含高效价冷凝集素标本经过不同方法的检验处理后再进行正方定型结果未出现异常反应；经过输血后，不良反应情况也未在交叉配血的患者上出现。

冷凝集素；血型鉴定；交叉配血

高效价冷凝集素大部分情况下是源于病理因素，一般有16以上的效价，高达32℃的作用温度。高效价冷凝集素在给ABO血型和Rh血型鉴定、抗体鉴定及交叉配血带来困难的同时还将具有临床意义的同种异型抗体的存在事实掩盖。其中18例存在高效价冷凝集素的标本经过多种方法检测后，血型鉴定和交叉配血的难点被解开，贫血症患者输血以后症状缓解，病情有所好转。

1 资料与方法

1.1一般资料 18例患者冷凝集素出现增高现象，其中15例为男性，3例为女性，年龄跨度为10～90岁。其中，14例为肾移植患者，3例患有感染性心内膜炎，1例患有慢性肺心病。效价跨度为521～4096。

1.2试剂 二巯基乙醇应用液(2-me)、抗人球蛋白试剂、谱红细胞试剂、抗体筛查试剂、ABO反定型细胞、ABO血型鉴定试剂和Rh血型鉴定试剂。

1.3方法 对红细胞进行处理将红细胞从抗凝管里取出，在37℃的水中将自身凝集的红细胞进行30 min的水浴处理；或放置到37℃的生理盐水中进行洗涤，3遍后，若洗涤后的红细胞经过检测未出现凝集现象，就可进行ABO正定型、Rh血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、自身吸收试验，最后确认无异常现象就可交叉配血;若出现凝集现象，则将标本重复上述操作，检测无凝集才可往下进行。

血清处理需要用到二巯基乙醇，将血清从干燥管中取出来，将与血清等量的二巯基乙醇混合后，放置在37℃中进行水浴，40 min取出标本后，进行正反定型、抗体筛查和交叉配血的后续工作。将处理后无凝集的患者红细胞与等量自身血清混合，放到4℃的冰箱内进行冷藏吸收处理30 min，可多次重吸收冷凝集较强的血清标本，再进行ABO反定型、抗体筛查和交叉配血的后续工作。

血清学试验因血型正、反定型不一致的标本未进行检测，经过处理后ABO正反定型一致、RhD鉴定呈阳性。

测定冷凝集素效价未稀释的患者血清与O型成人红细胞发生凝集后做效价滴定测验，并记录数据，以此判定冷凝集素所具有的特异性。

2 结果

在23℃环境下进行的ABO血型鉴定结果正定型都为AB型的患者出现18例，反定型为O型，自身对照出现凝集现象。处理后标本或水浴中血型正反定型结果及用二巯基乙醇处理后的血标本正反定型的结果：O型患者正反定型均为O型的患者有14例，B型患者正反定型均为B型的为3例，A型患者正反定型为A型为1例。血型物质检测为分泌型有18例，经过血型物质检测含有H物质的正定型为O型的患者有14例，正定型均含有B、H物质的为B型，正定型均含有A、H物质的为A型。通过直接抗人球蛋白试验检测的为阳性，抗C3 d也均为阳性，并且冷凝集素存在抗-I特异性。本次研究的18例患者血液内含有的冷凝集素去除后经交叉配血都未出现不合现象，输血后，溶血现象也未发生。

3 讨论

生理性冷凝集素是当效价不高于16的冷凝集素，在室温和37℃进行血型血清学试验基本不受到影响的一种冷凝集素;冷凝集素处于病理状态时，效价会出现升高现象，这是由某些病理因素所致，而出现ABO和Rh血型鉴定、抗体效价和交叉配血困难情况是因为冷凝集素效价和反应温度较高。本调查中18例患者冷凝集素效价都不低于16，效价跨度为521～4096，在进行实验时，处于室温环境下血型鉴定正反定型结果出现不一致，而经37℃水浴或经洗涤处理后正反定型结果则一致。所以对标本进行37℃水浴或37℃生理盐水洗涤3次的处理后，才可怀疑是由冷凝集素引起血型鉴定时正反定型不符。

冷凝集素具有以下特点：①大多数是IgM型抗体。少数是IgG型抗体，后者又称为双相抗体。②反应的最适温度是4℃，在20℃以下时可以凝集自己的红血球，加温至30～37℃又会和红血球分离，如再遇补体即会发生溶血。③它与补体的亲和力较大，在冷处和温处都可与补体结合。在冷处与补体结合后，当温度上升至30～32℃以上时，或环境中呈微酸性时(pH6.5-7.0)，即发生溶血，所以在患者血管内可发生溶血，出现血红蛋白尿。④大多是不完全抗体，少数是完全抗体。⑤这种抗体与红血球及补体结合后，容易从红血球上弥散而只留补体在红血球表面上。

本文18例受冷凝集素影响的ABO正反定型病例，通过二巯基乙醇灭活后使IgM抗体聚合力丧失，从而使正反定型结果一致。有资料显示，血清中的抗-A、抗-B、抗-AB抗体大多数是IgM性质的抗体，也有IgG成分，在正常献血员中，IgG1和IgG2多于IgG3和IgG4，因此IgG成分的反定型通过间接抗人球蛋白试验会得出与正定型一致的结论。本文与报道相似，故经二巯基乙醇处理后的18例患者血清因IgM未得到彻底清除而直接离心出存在A、B、O、AB血型，而IgG效价的评定未受影响，所以反定型试验与正定型试验得出的结论一致。

若血型鉴定和交叉配血因高效价冷凝集素受到影响，最好用上述几种方法配合应用，从而使输血顺利、安全进行。

[1] 林国连,詹奕荣,刘红杏,等.冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的影响相关研究分析.河北医学,2010,03:302-304.

[2] 吴松远,魏淑英,孔祥骞.冷凝集素对血型鉴定的影响与处理.实用医技杂志,2010,12:1143-1144.

[3] 王华.冷凝集素在血型鉴定和交叉配血不合中的鉴别.实用心脑肺血管病杂志,2011,10:1758.

Coldagglutinintobloodtypeidentificationandcrossmatchinginterferenceandprocessingmethod

WANGJia.

Departmentofbloodtransfusion,The264HospitalofthePLA,Taiyuan,30001,China

ObjectiveThrough the research and analysis of the high price of cold agglutinin blood typing and cross matching test influence.MethodsThe red blood cells or 2 mercaptoethanol (2-me) in 37 ℃～45 ℃ of physiological saline repeated washing,treatment was on red blood cells,In the positive and negative Settings and cross matching need previous erythroid and serum absorbed radiation therapy.ResultsThe experimental results didn’t appear abnormal reaction.ConclusionWith a high price cold agglutinin specimen after different methods of inspection of the reentry after processing square finalize the design results are not abnormal reaction,a blood transfusion after,adverse reaction was not appear on the patient.

Cold agglutinin；Blood grouping；Cross matching

030001 太原，解放军二六四医院