瘦素受体在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的关系

王艳 高旭灵 陈新 吕秀娟 吕洪博 郭阿垚

瘦素受体在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的关系

王艳 高旭灵 陈新 吕秀娟 吕洪博 郭阿垚

目的检测瘦素受体(ObR)在人乳腺癌组织中的表达情况,探讨其与HER-2以及临床病理之间的关系,并分析它们对预后的影响。方法用免疫组织化学的方法检测124例乳腺癌组织中ObR的表达,回顾分析相关的临床病理资料和随访情况。结果ObR在大多数乳腺癌组织中均有表达,阳性率为82.3%。ObR表达与患者的年龄、绝经状态、肿瘤大小、肿瘤病理学分型、淋巴结转移均无关(P>0.05);与ER、PR、P53的表达状态也无关(P>0.05); ObR的表达与HER-2相关(P=0.011); ObR阳性者与阴性者的总生存率检验(χ2=0.048，P=0.827)及无病生存率检验(χ2=2.829，P=0.093)差异均无统计学意义。结论ObR与HER-2在乳腺癌中的表达具有相关性,可能是导致乳腺癌预后不良的因素。

乳腺癌;瘦素受体;HER-2;临床病理特征; 预后

近年来，乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤之一,有明显增多趋势，肥胖被认为是绝经后妇女乳腺癌的一个危险因素并与预后不良及耐药相关,其具体的机制仍未阐明, 可能的机制包括增强脂肪细胞因子(如瘦素OB)与类固醇激素的生物有效性。瘦素蛋白(ObR)是肥胖基因(Leptin)编码的蛋白产物,主要由脂肪组织分泌,部分也可由胃、胎盘及肝等器官合成和分泌。OB与其受体(ObR)结合后,作用于下丘脑、胰腺和甲状腺等部位,通过降低食欲,增加能量消耗,从而减轻体重。OB和ObR在多种肿瘤组织中均有表达,如乳腺癌、结肠癌、胃癌、前列腺癌和肝癌等[1]近来有文献报道,可通过反式激活HER-2从而促进乳腺癌细胞的增殖[2]。本文旨在探讨ObR在人乳腺癌组织中表达的临床意义以及其与预后的关系。

1 资料与方法

1.1标本 全部病例来自沈阳市第四人民医院，2006年～2012年女性乳腺癌临床手术标本。根据乳腺癌组织学分类标准,浸润性导管癌103例(83.1%),导管内癌12例(9.7%),浸润性小叶癌9例(7.2%)。患者的平均年龄为54.0岁,其中年龄34～77岁,绝经期后占67.7%,绝经期前32.3%。所有标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋、切片,经HE染色,病理医师按标准共同确认并行病理诊断和组织学分型,并采用国际抗癌联盟(IUCC)1987年公布的标准进行肿瘤分期。

1.2主要试剂 瘦素受体羊抗人多克隆抗体和二胺基联苯氨显色试剂盒。

1.3免疫组织化学法检测组织中ObR的表达,将切片常规脱蜡水化,灭活内源性酶,热修复抗原,阻断非特异性染色,滴加一抗,滴加二抗,显色,苏木精轻度复染。脱水、透明、封片、镜检。

1.4结果判断 ObR为细胞质表达,呈黄色或棕黄色为阳性,计数计算染色阳性细胞的所占比率0:阳性细胞<10%；阳性(+):阳性细胞10%～50%；强阳性(++):阳性细胞>50%,染色强度弱；强阳性(+++):阳性细胞>50%,染色强度强。

1.5统计学方法 采用SPSS 13处理，用χ2检验Fisher’s确切概率法和Spearman等级相关分析;生存曲线采用Kaplan-meier法,生存比较用Log-Rank检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1ObR的阳性率 82.3%(102/124)的标本ObR呈阳性表达。其中强阳性为19例(15.3%);17.7% (22/124)的标本ObR呈阴性表达。

2.2临床病理特点 ObR的阳性组中HER-2阳性者共38例, HER-2阳性率 37.2%(38/102); ObR阴性组22例, HER-2阳性率9.0%(2/22)。两组间HER-2阳性率差异有统计学意义，P=0.011(P<0.05)。ObR的阳性组的HER-2阳性率更高，而两组间发病年龄、绝经状态、肿瘤大小、病理分型、淋巴结转移状态ER、PR、P53差异均无统计学意义(P>0.05)。

2.3生存率 124例乳腺癌患者的中位生存时间(OS)为50.2个月，ObR阳性组与阴性组总生存率检验(χ2=0.048，P=0.827)及无病生存率检验(χ2=2.829，P=0.093)差异均无统计学意义。

3 讨论

Garofalo等[3]用免疫组化染色法对90例乳腺良性病变进行研究发现ObR在乳腺癌良恶性肿瘤中的表达有显著性差异.本研究在中国人群中证实了ObR在乳腺癌组织中广泛表达,阳性率为82.3%, ObR的表达与患者的年龄、绝经状态、肿瘤大小、肿瘤病理学分型、淋巴结转移均无关(P>0.05),与ER、PR及P53的表达状态亦无相关性(P>0.05)，提示其参与了各种病理类型乳腺癌组织的增殖过程；显示其在乳腺癌早期病变时已有高表达,并且贯穿于乳腺癌的发生发展过程之中,提示ObR有可能作为乳腺癌诊断的实验检测的指标之一,而拮抗ObR亦可能作为将来临床治疗乳腺癌的一种手段。

对于ObR与HER2的关系,相关研究比较少。Suimacz等[4]对人乳腺癌多个细胞系及59例人乳腺癌组织研究后发现, HER2与OB和ObR共同表达可能增强了HER2的活性,并降低了对抗HER2治疗的敏感性。本研究结果提示ObR与HER2表达具有相关性(P=0.011)。 HER2是乳腺癌的一个重要的治疗靶点。HER2的单克隆抗体曲妥珠单抗的应用提高了HER2高表达的晚期转移性乳腺癌及早期乳腺癌患者的总生存率。但常出现原发或继发性的耐药,耐药机制可能是其他信号转导通路的激活。比如IGF2I受体的高表达, EGF或TGF合成增加,PTEN磷酸酯酶突变最终导致PINK通路的激活。Suimacz等[4]推测酪氨酸激酶是中介物质,如JAK2(通常与激活的ObR1结合)或src(可能与ObR1 和ObRs都有关系)。

对于ObR与预后的关系,Kim等[5]发现OB和ObR的表达与DFS无关；我们的研究结果显示，两组的总生存率和无病生存率差异无统计学意义，在无病生存率比较中，P=0.093，接近于0.05，不排除随着样本量增加和随访时间延长，两组差异出现统计学意义的可能性。提示ObR在预测预后方面有一定价值。进一步推测ObR可能与HER2有相互作用,从而加速肿瘤进展以及诱发耐药,导致预后不良。

综上所述,乳腺癌组织ObR与HER2表达具有相关性;并且, ObR可能是导致乳腺癌预后不良的因素。这提示我们在ObR高表达的病例中,针对ObR的靶向治疗可能是乳腺癌治疗的一种新方法,特别是在对抗HER2治疗耐药的病例中。

[1] Cecilia G, Eva S Leptin and Cancer. Joumal of Cellular Physiology,2006,207:12-22.

[2] Soma D, Kitayama J, Yamashita H, et al. Leptin augments pro liferation of breast cancer cells via transactivation of HER2. J Surg Res,2008,149:9-14.

[3] Garofalo C, Koda M, Cascio S, et al Increased expression of leptin and the leptin receptor as a marker of breast cancer progression:possible role of obesityrelated stimuli. Clin Cancer Res,2006,12(5):1447-1453.

[4] Surmacz E, Fiorio E, Mercanti A. Leptin/HER2 crosstalk in breast cancer.in vitro study and preliminary in vivo analysis. BMC Cancer,2008,8:305.

[5] Kim Y， KimSY， Lee JJ. Effects of the expression of leptin and leptin receptor(OBR) on the prognosis of earlystage breast cancers. Cancer Res Treat,2006,38(3):126-132.

Theexpressionofleptinreceptorinbreastcancerandtherelationshipwithclinicalprognosis

WANGYan，CHENGXin，LVXiu-juan，etal.

DepartmentofcadrecliniqueTheFourthPeople’sHospitalofShenyang，Shenyang110031,China

ObjectiveTo detect clinicopathologic factors and prognosis of leptin receptor (ObR) expression in breast cancer tissue, and to investigate the relationship between HER-2 as well as the clinical and pathological, and analyze their impact on prognosis.MethodsBy using immunohistochemistry method to detect the ObR in 124 cases of breast cancer expression related to clinical and pathological data and follow-up were analyzed retrospectively.ResultsObR were expressed in most breast cancer tissues, the positive rate was 82.3%. ObR expression had no relationship with the age of patients, the transfer of menopausal status, tumor size, histological type, lymph node (P>0.05), it had nothing to do with the expression of ER, PR, P53 (P>0.05),the expression of ObR was correlated with HER-2 (P=0.011); between the survival rate test of patients with positive ObR and negative ObR (χ2=0.048,P=0.827) and disease free survival rate test (χ2=2.829,P=0.093),there were no significant differences.ConclusionThe expression of ObR and HER-2 were associated in breast cancer, may be the factors that lead to poor prognosis of breast cancer.

Breast cancer; Leptin receptor; HER-2; Clinical Pathology; Prognosis

辽宁省沈阳市科技计划项目(项目编号：F11-262-9-44)

110031 沈阳市第四人民医院干诊科(王艳 高旭灵 陈新 吕秀娟 吕洪博);中国医科大学第一临床医院乳腺外科(郭阿垚)