中药单药治疗肺癌实验研究进展

王 利 曲华玲 邹 勇

（山东省烟台毓璜顶医院，烟台264000）

中药单药治疗肺癌实验研究进展

王 利 曲华玲 邹 勇*

（山东省烟台毓璜顶医院，烟台264000）

肺癌；单味中药；实验研究

中医药经过数千年的临床实践与总结，形成具有鲜明民族特色、成熟的医疗体系，历代中医人对于肿瘤疾病的发生、发展、治疗措施规律总结一直没有停止，并不断取得新的新成绩。笔者通过对近年文献复习，总结中药单药治疗肺癌实验研究的进展，报道如下。

1 丹参注射液

丹参，性苦，微寒。归心、肝经。功效：祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调，经闭痛经，癓瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大；心绞痛。丹参的成分复杂，临床常用的药用制剂有丹参注射液、丹参酮ⅡA注射液等。

徐亚东等（黑龙江省中医药管理局资助课题）通过观察丹参注射液对小鼠Lewis肺癌β-连环蛋白、肺癌细胞上皮型钙黏素、肺癌细胞周期素D1等物质表达的影响，发现丹参可抑制小鼠Lewis肺癌β-catenin、上皮型钙黏素、Cyelin D1的异常表达并抑制小鼠Lewis肺癌生长。同时对Lewis肺癌小鼠组织形态学及血液系统进行观察，发现丹参各组的瘤体光镜下观察瘤细胞坏死明显。说明丹参对小鼠Lewis肺癌有抑制作用。其机制可能是通过抑制肿瘤细胞增殖，促进其凋亡，致使瘤体坏死及调节免疫功能实现的［1-4］。

陈良良（浙江省中医药科研基金）等通过观察丹参注射液对荷lewis肺癌生长转移及基质金属蛋白酶9（matrix met-alloproteinase-9，MMP-9）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的影响，发现极低剂量的丹参注射液对荷瘤小鼠的移植瘤有明显抑制作用。不同剂量的丹参注射液对肺部转移无抑制或促进作用，对VEGF的表达无影响。中低剂量的丹参注射液能降低MMP-9的表达［5］。

温雅（国家十一五科技支撑计划的系统生物学评价）等通过观察不同浓度的丹参水提液对体外培养的人肺癌细胞系A549细胞增殖及凋亡的影响，结果表明对A549人肺腺癌细胞株有良好的抑制增殖作用；通过形态学观察丹参水提液作用A549细胞后，细胞形态发生明显改变，细胞铺展程度下降，趋于圆形，生长停止；荧光显微镜观察用药组出现凋亡细胞，表现为细胞皱缩、核染色质浓缩、核碎裂、细胞出芽以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态学改变；流式细胞术检测细胞凋亡结果说明丹参水提液可诱导A549细胞发生凋亡。

丹参水提液可对人肺癌细胞系A549细胞具有显著的体外增殖抑制作用，其主要作用可能与诱导细胞凋亡有关［6］。

李春娣等（黑龙江省中医管理局资助课题）研究发现丹参酮ⅡA（TanⅡA）通过上调Bax、下调Bcl-2的表达诱导肿瘤细胞凋亡来抑制肿瘤生长，增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，与环磷酰胺有协同作用［7］。

2 苦参碱

苦参碱是从苦豆子中提取的生物碱，是苦参的活性成分，属于四环喹嗪啶类。苦参为豆科苦参属的植物。功效清热燥湿，杀虫，利尿。用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风；外治滴虫性阴道炎等疾病。一系列的研究证实，苦参碱可抑制部分肿瘤的增殖和转移。

本研究为辽宁省科技厅第二批药物源头创新研究课题。本研究结果显示，应用苦参碱各剂量组，小鼠原发瘤抑制率、微血管密度与生理盐水组比较有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）；与生理盐水组比较，苦参碱各剂量组VEGF mRNA和蛋白表达水平显著降低（P＜0.01）。苦参碱对于小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长具有一定的抑制作用，并能显著抑制瘤组织微血管形成，可能与其抑制肿瘤VEGF mRNA和蛋白表达有关［8］。

3 白毛藤

白毛藤，系茄科植物白英的全草，味苦寒，具有清热利湿、消肿解毒之功效，有较强的肿瘤细胞抑制活性。

本研究为黑龙江省卫生厅科研课题，通过荧光显微镜观察不同浓度白毛藤诱导A549细胞凋亡的作用，RTPCR检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化，结果表明白毛藤具有诱导A549细胞凋亡的作用，并且上调p53基因、降低Bcl-xl基因的表达。白毛藤促进A549细胞凋亡，其机制可能与激活p53基因、抑制Bcl-xl基因表达有关［9］。

4 虎杖

虎杖是多年生灌木状草本，微苦，微寒。归肝、胆、肺经。功效：清热解毒，利胆退黄，祛风利湿，散瘀定痛，止咳化痰。用于关节痹痛，湿热黄疸，经闭，癓瘕，咳嗽痰多，水火烫伤，跌扑损伤，痈肿疮毒。研究表明，虎杖在抗肿瘤方面可能扮演着重要角色。

本研究应用末端脱氧核苷酸转移酶（Td T）介导的脱氧核苷酸缺口末端标记（TdT-mediated dUTP nick endlabeling，TUNEL）法检测虎杖提取物对细胞诱导凋亡的情况；采用流式细胞仪检测A549细胞株的细胞周期分布相和细胞凋亡率；通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡关键酶Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9与凋亡相关基因产物bcl-2，以及与细胞周期有关的p21ras、Ki-67蛋白的表达情况。试验结果表明：虎杖提取物在体外对人肺癌A549细胞株有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用；虎杖提取物抑制增殖作用机制可能与下调Ki-67、p21ras蛋白表达，细胞周期发生G0／G1期阻滞有关；虎杖提取物诱导凋亡作用机制可能与下调bcl-2蛋白表达，上调Caspase-3、spase-8和Caspase-9蛋白表达，经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行［10］。

5 灵芝孢子粉

灵芝孢子是灵芝成熟期从子实体的菌盖释放出的孢子，含有灵芝的活性物质。药性为甘，平。归心、肝、脾、肺、肾五经。灵芝入心生血，助心充脉，补肝气、益肺气、益精气、益脾气。主治虚劳、咳嗽、气喘、失眠、消化不良、恶性肿瘤。主要有效成分有多糖、三萜类、蛋白质、肽类、氨基酸、脂肪、腺嘌呤核苷及微量元素等，有比较广泛的生物活性。

刘氏对灵芝孢子粉研究结果表明，灵芝孢子粉可使肺癌小鼠腹腔MΦ吞噬功能及血清IL-2水平明显增强（P＜0.01），并明显提高抑瘤率。根据研究结果可说明灵芝孢子粉能明显提高肺癌小鼠的抗肿瘤免疫水平，对肺癌具有一定的抑制作用［11］。

赵氏通过研究发现灵芝孢子粉对荷Lewis肺癌瘤株小鼠突变型P53基因表达有显著的抑制作用，并有较强的抑瘤作用［12］。

6 猫人参

猫人参又称猫气藤、沙梨藤，为江浙民间常用中草药，是猕猴桃科猕猴桃属植物镊合猕猴桃的根。猫人参昧苫，性寒，归肺、胃经。具有解毒消肿、祛风除湿的功效。临床用于治疗深部脓肿、骨髓炎、风湿痹痛、疮疡肿毒、肝硬化黄疸腹水等，现常用于治疗肺癌和消化道肿瘤其有效部位。

本研究为江西省卫生厅中医药科研基金资助项目。通过研究猫人参对肺癌耐药菌株的生长影响发现猫人参大、中、小剂量组和DDP合用后，显著提高了对A549的杀伤作用；大、中、小剂量组和DDP合用后，显著提高了DDP对A549／DDP的杀伤作用。研究结果表明，猫人参具有增敏和逆转耐药的作用，能够抑制小鼠移植性肿瘤的生长，其机制可能与影响细胞周期及诱导凋亡有关［13］。

7 鞘柄乌头

鞘柄乌头是湖北常用的一种药用草乌，乌头类中药为毛茛科乌头属植物，辛，苦，热；大毒归心，肝，脾，肾经。主要用于寒湿痹痛、心腹冷痛、阴疽肿毒。现代研究证实乌头类生物碱主要具有强心、抗肿瘤、镇痛和免疫调节作用.

本研究采用MTT法检测鞘柄乌头对A549细胞增殖的抑制作用；Transwell迁移实验观察鞘柄乌头对A549细胞迁移的影响；Transwell结合基质胶实验检测鞘柄乌头对A549细胞侵袭的影响；酶谱法检测鞘柄乌头处理后对A549细胞基质金属蛋白酶（MMP-2和MMP-9）活力的影响。结果：0.01～1 mg／m L鞘柄乌头能浓度依赖性的显著抑制A549增殖；Transwell迁移实验和基质胶实验分别显示鞘柄乌头能抑制A549细胞迁移和侵袭能力。鞘柄乌头处理之后，MMP-2和MMP-9活力均下降。根据结果考虑鞘柄乌头可能是通过下调MMP-2和MMP-9活力，从而抑制A549细胞增殖和侵袭转移［14］。

8 白花蛇舌草

白花蛇舌草为莆草科植物白花蛇舌草的干燥伞草，微苦、微甘，微寒。归心、肝、脾经。具有清热、利湿、解毒、消痈之功效，主治肺热喘咳、痈肿疔疮、毒蛇咬伤等证，现代药理研究表明白花蛇舌草具有抗肿瘤、抗菌、消炎等活性，被临床上广泛应用于各种癌症的治疗，尤多用于治疗肺癌、食道癌、胃癌、肝癌、直肠癌以及子宫癌、淋巴癌、鼻咽痛等。

李氏通过研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞P53基因表达、bcl-2基因表达、端粒酶活性的研究发现，白花蛇舌草具有可抑制肿瘤细胞内凋亡抑制基因bcl-2的表达、促使P53基因表达增多、增强DDP的下调肿瘤细胞端粒酶活性的作用，可能是其抗肿瘤作用的主要机制［15-17］。

韦氏等（江西省卫生厅中医药科研基金课题资助项目；江西省教育厅课题资助项目）通过研究发现，白花蛇舌草注射液能抑制SPC-A-1细胞增殖，肿瘤细胞凋亡显著升高，P53蛋白表达显著上升，Bcl-2和NF-κB蛋白表达显著下降，从而产生抗肿瘤作用［18］。

9 冬虫夏草

冬虫夏草是我国传统的滋补强壮药，性甘平，功效保肺益肾，止血化痰，止劳咳，有治“诸虚百损”之说，现代药理学研究表明，冬虫夏草及其制剂有镇静、抗惊厥、降温、祛痰平喘、抗心肌缺血、抗心律失常、抗应激，抗衰老、抗炎、抗微生物及提高机体免疫力等多种作用。

本研究为江苏省应用毒理重点实验室开放基金项目。研究通过观察冬虫夏草（cs）能否促进顺铂诱导Balb-c裸鼠非小细胞肺癌凋亡来证明冬虫夏草的抗肿瘤作用。结果表明，冬虫夏草与化疗药物有协同作用，合用顺铂可能有效的调节机体的免疫功能，诱导细胞凋亡，从而有效的抑制肿瘤生长，可能是非小细胞肺癌化疗的有效辅助用药［19］。

10 马齿苋

马齿苋为马齿苋科植物马齿苋的全草。味酸，性寒。入大肠、肝、脾经。功能：清热解毒、散血消肿、凉血止痢。主治：热痢脓血、热淋、血淋、带下、痈肿恶疮、丹毒、瘰疬。

本研究为吉林省教育厅科技发展计划重点项目。实验结果显示马齿觅提取物对肺癌A549细胞的增殖具有明显的抑制作用。其细胞生长抑制随着药物浓度的升高和时间的延长而增加，具有量-效、时-效关系。倒置显微镜、HE染色、透射电镜及流式细胞术结果，说明马齿觅提取物可以诱导肺癌A549细胞凋亡。同时，马齿览提取物能明显抑制肺癌A549细胞的周期变化，使其阻滞细胞停滞于GZ／M期，使细胞周期改变而诱导细胞凋亡［20］。

11 狼毒

瑞香狼毒，味苦；辛；性平，有大毒。归肺经。有逐水、祛痰、破积、杀虫之功效。近年来，国内外学者对瑞香狼毒在其抗肿瘤方面的功效，取得了突破性的进展。

本研究为河北省张家口市科技局资助项目，研究结果表明，瑞香狼毒在逆转肺癌细胞耐药作用方面具有一定作用。结果还显示两种肺癌细胞株对瑞香狼毒提取物的反应表现出轻微的差异，提示尽管在不同病理类型的肺癌细胞中瑞香狼毒提取物均表现出逆转肺癌细胞耐药的作用，但其作用机制可能存在着差异，为深入揭示瑞香狼毒逆转肺癌细胞的耐药作用机制，尚需从基因和蛋白水平进一步研究证实［21］。

12 康莱特注射液

康莱特注射液系运用现代科学技术从中国传统中药薏苡仁中提取分离到的一种抗癌活性化合物。薏苡仁性甘、淡，凉。归脾、胃、肺经。功效：健脾渗湿，除痹止泻，清热排脓。用于水肿，脚气，小便不利，湿痹拘挛，脾虚泄泻，肺痈，肠痈，扁平疣。

该项目为浙江省中医药管理局基金资助项目（2004c065）。VEGF-C蛋白的基因表达和血管形成正相关，血管形成和肿瘤复发转移具有一致性。本研究探讨本品对Lewis肺癌小鼠血管内皮细胞生长因子（VEGF-C）蛋白及mRNA表达的影响，对Lewis肺痛小鼠免疫功能的影响。实验结果表明，该药高、中、低剂量组的VEGF-C蛋白阳性细胞数降低，以高剂量组最为明显，提示本品可降低VEGF-C蛋白的阳性表达，减少肿瘤血管形成及肿瘤营养供应，对防止肿瘤复发、转移有积极的意义，是防止肿瘤复发转移的可能机制靶点。免疫功能结果表明，本品可明显提高LewiS肺癌小鼠的脾、胸腺指数，高剂量组能明显降低TNF—Q、IL-1、IL-6在外周血中的含量，在杀灭肿瘤细胞的同时，对机体免疫器官及免疫功能有保护作用［22］。

13 半枝莲

中药半枝莲为唇形科植物半枝莲干燥全草。半枝莲性味辛、苦、寒，归肺、肝、肾经，是中医处方和成药中的常用中药，具有清热解毒、化瘀利尿的功效。近代药理学研究表明半枝莲有抗肿瘤、抗病原、抑菌、解热、保肝等活性。

李洁通过研究发现：经半枝莲含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低；PG细胞nm23基因表达水平明显上调。PG细胞端粒酶活性明显下降。半枝莲抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少、nm23基因表达水平上调、下调肿瘤细胞的端粒酶活性有关［23-25］。

结合上述研究分析，中药单药抗肿瘤常用的药物应用较多的有13种，分别为丹参、苦参、白毛藤、虎杖、灵芝、猫人参、乌头、白花蛇舌草、冬虫夏草、马齿苋、狼毒、康莱特、半枝莲等。功效为多为清热、利湿、解毒、活血、祛瘀、益气扶正培本。中药抗肿瘤分子机理主要为：①直接杀伤肿瘤细胞②调节机体免疫功能；③抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞分化、凋亡；④抑制肿瘤血管形成。

中药与化疗药物合用，具有确切的减毒增效作用，可提高疗效，并降低化疗药的毒性。

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［2］徐亚东，张薇，尤立光，等.丹参注射液对小鼠lewis肺癌上皮型钙黏素表达的影响［J］.齐齐哈尔医学院学报，2008，29（5）：513-514.

［3］徐亚东，张薇，尤立光.丹参注射液对小鼠Lewis肺癌细胞周期素D1表达的影响［J］.牡丹江医学院学报，2008，29（3）：25-27.

［4］徐亚东，张薇，屠溪琳.丹参注射液对Lewis肺癌小鼠组织形态学及血液系统影响的实验研究［J］.中国中医药科技，2008，15（5）：400.

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［22］张爱琴，马胜林，孙在典，等.康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠免疫功能的影响［J］.浙江中西医结合杂志，2007，（4）：199--200.

［23］李洁，石俊英.半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响［J］.中药药理与临床，2006，22（03）：113-114.

［24］李洁.半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响［J］.中药药理与临床，2007，23（01）：46-47.

［25］李洁.半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响［J］.中药药理与临床，2008，23（09）：1262-1263.

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.02.105

：1672-2779（2013）-02-0160-03

张文娟

2012-12-27）

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