裸花紫珠解酒作用的实验研究

袁 莉 ，黄 胜 ，2， 颜冬兰 ，谷陟欣 *

（1.九芝堂股份有限公司，湖南 长沙 410021；2.海南九芝堂药业有限公司，海南 海口 570311）

裸花紫珠解酒作用的实验研究

袁 莉1，黄 胜1，2， 颜冬兰1，谷陟欣1*

（1.九芝堂股份有限公司，湖南 长沙 410021；2.海南九芝堂药业有限公司，海南 海口 570311）

目的 研究裸花紫珠的解酒作用。方法 将健康昆明种小鼠随机分为实验组（高、中、低剂量组）、模型组、空白对照组、阳性对照组，通过小鼠平衡失调实验，记录3 min内从转棒上掉落小鼠数；通过乙醇致小鼠睡眠时间的影响实验，计算小鼠耐受时间和维持时间；通过乙醇致小鼠急性中毒作用试验，计算小鼠死亡率；通过制备小鼠急性酒精性肝损伤模型，测定血清ALT、AST指标含量。结果 裸花紫珠可明显对抗酒精造成的平衡失调现象，能缩短醉酒引起的睡眠时间；能明显降低乙醇急性中毒小鼠死亡率；能显著降低血清中ALT、AST的含量，表明其对酒精性肝损伤具有一定的保护作用。结论 裸花紫珠具有明显的解酒作用。

裸花紫珠；解酒；肝损伤

裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)为马鞭草科(Verbenaceae)紫珠属植物，主产于我国海南、广东、广西，是海南的道地药材，具有收敛、止血、镇痛、消炎等功效。民间有应用其解酒醒酒的习俗，目前国内外尚未见其醒酒领域的实验研究。本实验研究了裸花紫珠对实验动物的解酒保肝作用。现将实验结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

裸花紫珠片（由海南九芝堂药业有限公司提供，批号120101，规格0.5 g/片），刮去表层薄膜衣，研碎，用蒸馏水溶解成含生药0.05 g/mL的药液备用。昆明种小鼠，长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，动物许可证编号：SCXK（湘）2009-0012。56度红星二锅头，北京红星股份有限公司生产，用蒸馏水配成含乙醇50%。ALT、AST试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号111201。海王牌金樽片（深圳市海王健康科技发展有限公司，批号111202，1 g/片），用蒸馏水溶解为0.05 g/mL药液备用。

1.2 仪器

YLS-4C转棒式疲劳仪，淮北正华生物仪器设备有限公司生产；DZKW-S-6恒温水浴锅，北京市永光明医疗仪器有限公司生产；TU1901分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司生产；Gilson微量移液器，法国吉尔森公司生产；WH-3微型漩涡混合仪，上海沪西分析仪器厂。

1.3 方法[1]

1.3.1 动物分组 健康昆明种小鼠，体质量（20±2）g 290只，雌雄各半，随机分为实验组（高、中、低剂量）、模型组、空白对照组、阳性对照组（海王金樽片）6个组，小鼠平衡失调实验中，每组20只，其他实验中每组10只。

1.3.2 给药方法 实验组的低、中、高3个剂量组按含生药2、3、4 g/kg体质量灌胃给药，相当于人临床用药量的8.3、12.5、16.7倍，模型组和空白对照组给20 mL/kg生理盐水，阳性对照组按1 g/kg灌胃给药，相当于人临床用药量的20倍。

1.3.3 造模方法 在对小鼠急性酒精性肝损伤的影响实验中，除空白对照组外，各组小鼠均灌胃50%乙醇，5 mL/kg，连续给予15 d造模。其他实验中除空白对照组外，各组用50%乙醇以10 mL/kg灌胃造模。

1.3.4 小鼠平衡失调实验 各组给药30 min后实验组、模型组、阳性对照组用50%乙醇以10 mL/kg灌胃，空白对照组给等体积蒸馏水，分别在给乙醇后15、45、75、120 min 时将动物放入 15 r/min 转棒式疲劳仪内，记录3 min内没有从转棒上掉落小鼠数。

1.3.5 乙醇致小鼠睡眠时间实验[2]各组给药30 min后实验组、模型组、阳性对照组用50%乙醇以10 mL/kg灌胃，以小鼠翻正反射消失作为睡眠指标，记录各组小鼠翻正反射消失的时间及恢复时间，计算出耐受时间（从灌胃乙醇至翻正反射消失的时间）和维持时间（从翻正反射消失到恢复时间）。

1.3.6 乙醇致小鼠急性中毒作用实验 各组给药30 min后，实验组和模型组、阳性对照组用50%乙醇灌胃20 mL/kg，空白对照组给等体积蒸馏水，观察5 d内各组动物存活率。

1.3.7 对小鼠急性酒精性肝损伤的实验 除空白对照组外，各组小鼠均灌胃50%乙醇，5 mL/kg，连续给予15 d，造模期间各组小鼠以标准饲料喂养，自由饮水，空白对照组给予等量生理盐水。从造模第5天起，各组连续给药10 d，实验结束后，眼眶取血，按试剂盒说明书所示方法，用速率法测定血清ALT、AST。

1.4 统计学分析

采用SPSS 17.0统计软件分析，计数数据采用卡方检验，计量资料采用“”表示，组间比较采用方差齐性检验及单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 小鼠平衡失调实验

由表1可知，乙醇灌胃后不同时间段，模型组小鼠明显平衡失调，与对照组相比，转棒上未掉落动物数明显减少，高剂量组在饮酒后45、75、120 min转棒上未掉落小鼠数与模型组相比均有极显著差异（P<0.01），中剂量组在饮酒后120 min转棒上未掉落小鼠数与模型组相比均有显著性差异（P<0.05）。表1表明高、中剂量组可明显对抗酒精造成的平衡失调现象。

表1 乙醇致小鼠平衡失调试验结果比较 （只，n＝20）

2.2 裸花紫珠对小鼠睡眠时间的影响

由表2可知，实验组和阳性对照组均能使小鼠睡眠耐受时间增长，与模型组相比，高剂量组具有极显著差异（P<0.01），中剂量组与模型组具有显著性差异（P<0.05）；实验组和阳性对照组均能使小鼠睡眠维持时间缩短，与模型组相比均有极显著差异（P<0.01）。表2表明高、中、低剂量组均能缩短醉酒引起的睡眠时间，具有醒酒作用。

表2 裸花紫珠对小鼠睡眠时间影响的比较（，n＝10）

表2 裸花紫珠对小鼠睡眠时间影响的比较（，n＝10）

注：与模型组比较＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

组 别模型组高剂量组中剂量组低剂量组阳性对照组醉酒数10 8999睡眠耐受时间（min）24.94±8.73 36.27±7.05＊＊32.16±7.06＊29.83±5.07 31.18±5.16＊睡眠维持时间（min）281.2±29.38 133.9±23.31＊＊171.5±20.96＊＊184.5±19.37＊＊175.3±18.72＊＊

2.3 裸花紫珠对小鼠急性中毒作用的影响

由表3可知，实验组的小鼠死亡率均低于模型组，各实验组和阳性对照组与模型组比较均有极显著差异（P<0.01）。表3表明高、中、低剂量组能显著降低乙醇急性中毒小鼠死亡率，对乙醇致急性中毒具有预防作用。

表3 裸花紫珠对小鼠急性中毒作用的比较（只，n＝20）

2.4 裸花紫珠对小鼠急性酒精性肝损伤的影响

由表4可知，各实验组和阳性对照组均能降低血清中ALT、AST的含量，与模型组比较具有极显著差异（P<0.01）。表4表明高、中、低剂量组均能显著降低血清中ALT、AST的含量，对肝脏具有一定的保护作用。

3 讨论

通过上述实验，裸花紫珠各剂量组和阳性对照组可降低从转棒上掉落的小鼠数，可增长鼠睡眠耐受时间，可缩短小鼠睡眠维持时间，可提高小鼠乙醇急性中毒存活率，可降低血清中ALT、AST的含量，且高、中剂量组效果优于低剂量组，高剂量组效果优于阳性对照组。实验证实了中、高剂量组可以明显对抗酒精造成的平衡失调现象，能缩短醉酒引起的睡眠时间，具有醒酒作用，能明显降低乙醇急性中毒小鼠死亡率，对乙醇致急性中毒具有预防作用，能显著降低血清中ALT、AST的含量，对肝脏具有一定的保护作用。

表4 裸花紫珠对小鼠急性酒精性肝损伤血清中ALT、AST 含量影响的比较 （，n＝10）

表4 裸花紫珠对小鼠急性酒精性肝损伤血清中ALT、AST 含量影响的比较 （，n＝10）

注：与空白对照组比较＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；与模型组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

组 别空白对照组模型组高剂量组中剂量组低剂量组阳性对照组ALT（U／L）60.62±8.21 87.68±7.16＊＊72.43±7.94▲▲＊＊76.18±8.07▲▲＊＊79.88±6.43▲▲＊＊76.87±6.61▲▲＊＊AST（U／L）92.62±7.72 142.71±11.48＊＊115.36±8.13▲▲＊＊127.75±10.45▲▲＊＊131.36±11.12▲＊＊124.41±9.03▲▲＊＊

肝脏是酒精代谢的主要脏器，酒精在肝脏中代谢过量时，肝细胞就会产生过量的自由基，导致肝损伤，使AST与ALT释放入血[3]。乙醇及其在肝细胞内代谢产生的毒性代谢产物所引起的代谢紊乱是导致酒精性肝损伤的主要原因。本实验中各剂量组的血清AST和ALT活性较模型组明显降低，表明其对肝损伤有一定的保护作用。

现有研究表明裸花紫珠成分复杂，主要含有黄酮类、萜类、鞣质类等成分，其药理作用广泛，主要表现在收敛止血、消肿镇痛、抗菌消炎等方面。其中主要活性物质黄酮类活性成分如芹菜素、木犀草素、大波斯菊苷、岳桦素、木犀草苷等，可能通过增强肝脏的解毒功能和酶活力，从而具有解酒、醒酒、保肝护肝的作用，具有较好的应用前景，裸花紫珠的解酒机制及酒精急慢性中毒引起的脏器损伤的修复作用还有待进一步研究。

［1］陈 奇.中药药理研究方法学（第2版）[M].北京：人民卫生出版社，2006：660.

［2］徐叔云.药理实验方法学（第2版）[M].北京：人民卫生出版社，1994：201，642.

［3］储金秀.荞麦花叶芦丁对小鼠酒精性肝损伤的保护作用［J］.江苏医药，2011，37（5）：503－505.

（本文编辑 杨 瑛）

Experimental study on effects of Callicarpa nudiflora on alleviating the alcohol intoxication

YUAN Li1， HUANG Sheng1,2， YAN Dong-lan1， GU Zhi-xin1*
(1.Jiuzhitang Co.,Ltd,Changsha,Hunan 410021,China；2.Hainan Jiuzhitang Pharmaceutical Co.,Ltd,Haikou,Hainan 570311,China)

Objective To study the effects of Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.on alleviating the alcohol intoxication.Methods The mice were randomly divided into Callicarpa nudiflora groups(including high dose group, medium dose group and low dose group), model group,blank control group and positive group.The number of mice dropped from rolling stick was observed within 3 minutes by imbalance test of intoxicated mice;the tolerance time and maintenance time of intoxicated mice were observed by testing the sleepy time;the death rate was observed by testing the acute intoxication induced by alcohol;the indexes of the liver injury,such as serum AST and ALT were evaluated in the mouse model of acute alcoholic liver injury.Results Callicarpa nudiflora could act against imbalance phenomena,reduce sleepy time,decrease the death rate and serum AST and ALT content and showed protective effects on alcohol-induced liver injury in mice.Conclusion Callicarpa nudiflora has effects on anti-inebriation.

Callicarpa nudiflora； anti-inebriation； hepatic injury

R965.2

B

10.3969/j.issn.1674－070X.2013.03.005.017.03

2012－12－10

国家科技支撑计划（SQ2010BAJY1411-07-05）；国家中医药管理局重点学科中医药工程学（国中医药人教发【2012】32号）。

袁 莉(1982-)，女，湖南长沙人，工程师，主要研究方向：中药新药研究与开发。

* 谷陟欣，男，硕士，高级工程师。 E－mail：gzx@hnjzt.com。