HPLC 法测定对乙酰氨基酚缓释片中对乙酰氨基酚的含量

顾海霞

江苏省启东市中医院药剂科，江苏 启东 226200

对乙酰氨基酚缓释片为上海强生制药有限公司生产的治疗感冒常用药物，原标准中对乙酰氨基酚的含量测定为滴定法，操作费时费力，我们用高效液相法 (HPLC)测定本品内的对乙酰氨基酚的含量，取得良好效果。

1 仪器、试剂和样品

高效液相色谱仪系统：所含仪器包括Waters 515高效液相色谱仪 (美国Waters公司制造);高压泵 (型号为：P200);紫外检测器 (型号为：Waters 2487);色谱柱 (型号为：Hanbang C18;规格为：200mm×4.6mm×5μm;B3500S-MT型超声波清洗器 (上海必能信仪器有限公司);BP211D电子分析天平 (德国赛多利斯公司)，对乙酰氨基酚 (100018-200107)对照品由中国药品生物制品检定所提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件［1］色谱柱型号 Hanbang C18(规格为：200mm×4.6mm×5μm);流动相：甲醇-水 (体积比为40∶60);使用前以0.45μM微孔滤膜减压过滤，检测波长为UV210nm;流速为0.5ml/min，理论塔板数以对乙酰氨基酚峰值计算大于3000。

2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取对乙酰氨基酚对照品适量，加乙醇溶解并用水定量稀释成每1ml中约含0.5 mg对乙酰氨基酚溶液，作为对照品溶液。

2.3 线性关系考察 精密称取对乙酰氨基酚对照品适量，用乙醇配制成含对乙酰氨基酚1.25 mg/ml的对照品混合溶液。精密量取对照品溶液 2.0ml、5.0ml、10.0ml、20.0ml、25.0ml置25ml量瓶中，分别加水至刻度，摇匀。分别精密量取20 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，进样质量为横坐标，绘制标准曲线。对乙酰氨基酚回归方程：Y=2E+05X-1E+08，相关系数γ=0.9995，对乙酰氨基酚在2.50～31.25 μg具有良好的线性关系。

2.4 精密度试验 取对照品溶液，重复进样6次，每次20 μl，对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.24%。表明仪器精密度良好。

2.5 稳定性试验 取同一供试品溶液，间隔一定时间测定1次，共测24h，对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.35%(n=6)。实验结果表明：供试品溶液在24 h内稳定。

2.6 重现性试验 取同批号样品5份，按供试品溶液的制备方法制备，测定，计算。结果对乙酰氨基酚的平均质量分数分别为99.5%，RSD分别为0.39%(n=5)。

2.7 加样回收率试验 取已知含量的对乙酰氨基酚缓释片，研细，精密称取适量 (约相当于对乙酰氨基酚0.06 g)，称取 6份，分别加入对乙酰氨基酚 0.0472mg、0.0698mg、0.0935 mg，按供试品溶液制备方法制备，测定，计算回收率。结果对乙酰氨基酚的平均回收率分别为99.6%，RSD 分别为0.59%(n=6)。

2.8 供试品溶液的制备 取对乙酰氨基酚缓释片，研细，精密称取适量，约相当于对乙酰氨基酚0.125 g，置具塞三角瓶中，精密加入乙醇50ml，振摇使溶解，滤过，精密量取续滤液10ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.9 样品测定 取对乙酰氨基酚缓释片，按上述条件测定，结果对乙酰氨基酚质量分数在95.9% ～101.1%(n=6)。

3 讨论

3.1 对乙酰氨基酚缓释片原检测标准中，对乙酰氨基酚的检测方法是用亚硝酸钠滴定液进行重氮化滴定，操作过程较为繁琐，现改为高效液相法，具有快速、稳定、重现性好的特点。

3.2 取同一批号的样品，用滴定法和HPLC法分别对对乙酰氨基酚含量进行测定，结果分别为 99.5%、99.1%，RSD分别为1.16%、0.37%(n=6)，测定结果显示，两种方法结果几乎一致。

［1］靳建中，王占林.高效液相法测定氨酚啡啉片中对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱和咖啡因的含量［J］.药物分析杂志，1997，17(6)：26.