食管静脉曲张动物模型研究进展

刘翔宇，魏 志，孙自勤，杨 鹏

(济南军区总医院消化科，山东 济南 250031)

食管静脉曲张是由于多种原因造成的门静脉压力增高系列反应中的最后一步，随着门静脉压力的不断增高，曲张的静脉从轻度向重度进展，最后导致破裂出血。食管静脉曲张出血是上消化道出血的常见原因，是内科的危重症，患者死亡率极高。建立食管静脉曲张动物模型，对进一步治疗研究至关重要。

目前，食管静脉曲张动物模型的建立还不够成熟，国外从1960年开始就报道成功制备了恒河猴的食管静脉曲张模型［1］，国内近些年来对大型动物，特别是犬类的静脉曲张模型的研究也逐渐增多。因为需要在短时间内使门静脉压力迅速升高，目前的造模多采用手术造模。现就目前食管静脉曲张模型的建立方法做一综述。

1 门静脉部分结扎法

门静脉部分结扎法(PVL)是一种广泛用于研究门静脉高压病理生理的造模方法，也是制备食管静脉曲张模型的常用方法。这种方法可以用于大鼠、小鼠与兔的造模。切开腹部皮肤后游离出一部分门静脉血管主干，用一钝性针头和血管平行放置并紧贴血管表面，用3-0丝线将血管连同钝性针头一起结扎，最后抽出针头，使门静脉血管达到一定程度的缩窄。可以通过控制钝性针头的直径使血管得到不同程度的缩窄。目前大鼠常用直径0.889mm针头，而兔则使用直径1.270mm针头。1980年Van Thiel［2］采用这种办法来建立门脉高压症动物模型。Nishida［3］采用部分门静脉结扎法，14天后发现大鼠的食管静脉曲张突入腔内。1991年，Tanoue等［4］加以改进，采用门静脉两步结扎加左肾静脉周围血管离断的方法，成功制备了大鼠食管静脉曲张模型。2003年，尹朝晖等［5］在 Tanoue的基础上加以改进，使用门静脉两步结扎加左肾上腺静脉结扎，3周左右即可制备出大鼠的静脉曲张模型。任崇仁等［6］重复了尹朝晖的方法，成功制备了 SD大鼠的食管静脉曲张模型。

2 门－腔静脉吻合法

门-腔静脉吻合法其基本原理是行下腔静脉-门静脉吻合，并在吻合口上方进行腔静脉结扎，使结扎处下方的血流完全注入门脉系统，从而造成门静脉高压。早在1976年，Saku等［7］提出用此方法来制作犬门静脉高压症模型，但效果不理想。Dennis［8］在此基础上又同时缩窄门静脉主干:于吻合口上方的门静脉内置入1个含有琼脂环的钢圈。琼脂吸水后发生膨胀，从而使门静脉逐步阻塞;并在吻合口的上方双重扎闭腔静脉，使其下方的血液可以完全注入门静脉系统。此法3～6周后，食管胃底静脉呈不同程度的曲张。秦云峰等［9］对上述方法做了改进，在下腔静脉-门静脉行侧侧吻合、下腔静脉结扎及门静脉部分缩窄的基础上，采用介入学的方法，经导管用自制不锈钢丝卷阻塞门脉肝端，造成了成活动物的食管下段黏膜下的曲张静脉。而徐辉等［10］对实验犬门静脉结扎，使门静脉管径缩窄40% ～60%，同时在肾上水平截断下腔静脉，近端关闭，远端与门静脉行端侧吻合，从而建立了相对稳定的门静脉高压食管静脉曲张动物模型。方和平等［11］在门-腔吻合的同时将一可充式水囊缩窄环套于肝门部门静脉，人为地控制门静脉缩窄程度，最终阻断门静脉，使造模的成功率进一步提高。孙斌等［12］采用类似于 Dennis的方法，使用ameroid收缩器使门静脉主干逐步闭塞从而制备犬的食管静脉曲张。

3 胆总管结扎法

胆总管结扎法(CBDL)的具体操作方法是:通过复扎法截断胆总管，第一道丝线结扎在肝管汇合处下方，第二道丝线则结扎在胆总管进入到胰管前方，两道结扎线之间的胆总管予以切断，以避免胆管再通，从而使胆汁排出受阻，肝内胆汁淤积。此方法4～6周左右即可形成胆汁性肝硬化，从而导致门静脉高压。王艳梅等［13］在胆总管结扎的基础上用40%CCl40.2 mL/kg加入等量花生油，予腹腔内注射，每周1次，共16周，术后6～8周左右形成了稳定犬的食管静脉曲张。

4 药物诱导法

目前用于诱导动物形成肝硬化门脉高压的药物很多，CCl4法制备肝硬化门脉高压动物模型是最经典最常用的方法，早在1936年Cameron等首次报道了应用CCl4制作肝硬化动物模型。硫代乙酰胺(TAA)、二甲基亚硝胺(DMNA)、乙醇等都可以用于肝硬化门脉高压模型的制备。Nishida等［14］采用CCl4法制备鼠模型，在18周时成功制备了食管静脉曲张模型。

在理论上，所有肝硬化、门静脉高压症动物模型建立的方法均可以用于食管静脉曲张模型。上述方法虽说可以成功制备出食管静脉曲张的动物模型，但是均有一定的不足之处。门静脉部分结扎法是目前建立动物食管静脉曲张相对比较完善的方法，其成模率较高，可重复性强，操作相对简单，对基础研究有重要意义。但是其主要用于大鼠及小鼠这类小动物的模型建立，小动物术后死亡率也较高，且小动物食管细，不利于进行内镜下治疗的研究。门-腔静脉吻合法是目前建立大型动脉食管静脉曲张模型的常用方法，但单纯行门-腔静脉吻合效果差，常在手术中联合其他方法将门静脉缩窄甚至将门静脉完全闭塞。这种办法在大动物的造模中效果好，成模率高，造模周期短，可重复性强。但是相对门静脉部分结扎法手术过程复杂，手术操作精细，要求高，常需要专业的外科医生在无菌手术间来完成，使其开展具有一定的局限性。胆总管结扎法多用于制备胆汁淤积型肝硬化门脉高压模型，但是不宜单纯用于食管静脉曲张的造模。可和其他的方法联合使用来进行造模。药物诱导法在理论上是制备食管静脉曲张理想的方法，通过药物先诱导动物行程肝硬化门脉高压，在此基础上逐渐形成食管静脉曲张。在疾病的演变过程、病理基础等和人类的肝硬化门脉高压所致食管静脉曲张基本类似。但由于肝硬化后并发食管静脉曲张所需时间长，从而造模成功所需时间较手术方法长，且模型的成模率较低，故在研究食管静脉曲张时较少使用，多是在建立肝硬化动物模型时发现其合并存在食管静脉曲张。

理想的建立食管静脉曲张动物模型的方法应该具备:与人类肝硬化门脉高压所形成食管静脉曲张具有相似的病理生理基础;重复性好;造模动物的死亡率低，成模率高，周期短，造模方法可靠;方法简单易行等特点。单纯使用某一种造模方法都难以达到要求，复合多因素的造模方法，将手术造模与药物诱导相结合应该是下一步研究的重点。

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