CHROM－agar产色平板在MDRAB快速检测的应用研究

高世华，池细俤 ，陈家龙，李国玉，吕春燕

（福建医科大学附属南平第一医院 检验科，福建 南平353000）

鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii AB）是医院内感染的重要病原菌，尤其是多重耐药鲍曼不 动 杆 菌 （Multi－drug resistance Acinetobacter baumannii MDRAB），已成为医院内感染暴发流行的重要病原菌 ，多见于ICU病区、神经外科、呼吸科、骨科等，给临床治疗带来很大困难。早期快速的病原学诊断，对及时有效地治疗该菌引起的感染、抗菌药物的合理使用等方面有重要意义。

目前，临床上主要应用传统培养法进行MDRAB诊断，但其耗时较长不利于早期诊断。CHROM－agar筛选平板法主要根据待筛查的目标病原体的生化、生理特点在培养基中添加相应的物质，通过目标病原体对相应物质的代谢发生颜色变化，实现快速检测的目的，检测时间约18小时，目前国内医学界主要用于真菌、沙门菌、ESBL等病原体的快速检测。用于MDRAB的临床检测的，目前暂无报道，国外的研究也较少［1］。

1 材料与方法

1．1 菌株来源 2011年至2012年本院住院及门诊患者的各类临床标本，其中非MDRAB 69株（包括痰62株、尿液1株、血液1株、伤口分泌物等4株、胆汁1株）；MDRAB 75株（包括痰63株、尿液5株、伤口分泌物等6株、脑脊液1株）。MDRAB是指对常用的7类抗假单胞菌的抗生素（包括：抗假单孢的青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、碳青霉烯类、四环素类、磺胺类）中的至少5类耐药的菌株。

1．2 细菌培养、鉴定 按《全国临床检验操作规程》培养分离菌种；用Bact／Alert120进行血培养；菌种鉴定用VITEK 2COMPACT全自动微生物分析系统进行菌株鉴定。

1．3 药物敏感试验及结果判定 用K－B（纸片扩散）法进行及VITEK 2COMPACT全自动微生物分析系统进行。药敏纸片和M－H培养基购自英国OXOID 公司，质控菌株为 ATCC 25923、ATCC 27853、ATCC 25922，采用 NCCLS（2000年）标准判断结果。

1．4 CHROM－agar筛选平板制备方法 按说明书称取CHROM－agar干粉加入无菌水及液体增补剂、加热灭菌，降温到45℃左右，加入MDR增补剂搅拌后倒入平皿，放冷备用，两周内用完。

1．5 CHROM－agar筛选平板法的应用 在接种标本时增加接种1个CHROM－agar筛选平板，37℃培养18小时观察结果。

2 结果

2．1 CHROM－agar筛选平板性能试验 取已知非MDRAB及MDRAB菌株接种于CHROM－agar筛选平板37℃培养18小时观察结果，MDRAB在CHROM－agar筛选平板显棕红色菌落，非MDRAB的AB菌株则不生长。

2．2 CHROM－agar筛选平板特异性试验 取大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌菌株接种于CHROM－agar筛选平板；取普通痰标本及含MDRAB痰标本接种于CHROM－agar筛选平板，37℃培养18小时观察结果，MDRAB在平板显棕红色菌落，非MDRAB菌株则基本不生长，特异性较好。

2．3 69株非MDRAB显色结果 69株非MDRAB的药敏试验的抗菌药物为：TZP、SAM、CRO、FEP、CAZ、TOB、GN、CIP、LEV、IMI、SXT、MH。不同耐药性的MDRAB菌株均不生长不产色，即阴性预测值为100%。

2．4 75株MDRAB的耐药性 SS抗假单胞青霉＋ 酶抑制剂 （PRL、SAM、AMC、TIM、TZP）92%；头孢菌素类（KZ、CXM、CRO、CTX、CAZ、CFP、FEP）100%；头孢＋酶（SCF）86．7%；碳青烯（IMI、MEM、ETP）94．7%；头 霉 素 类 （FOX）100%；ATM 100%；氨基糖（GN、AK）97．3%；喹诺酮类（CIP、LEV）100%；SXT 100%；MH 6．7%，75株MDRAB生长显色反应均阳性，即阳性预测值为100%，显示敏感性较好。

3 讨论

3．1 CHROM－agar筛选平板法对MDRAB检测的速度较快，阴性预测值及阳性预测值较好均达100%，是临床实验室检测MDRAB较理想的快速筛查方法［2］。

3．2 目前MDRAB的实验室诊断，多采用传统常规培养法：采集标本 －＞ 培养 －＞ 鉴定药敏 －＞ 报告，至少耗时约3天；一些实验室为提高检测速度常通过PCR法检测OXA51或OXA23基因确定MDRAB：采集标本 －＞ 培养 －＞PCR试验及报告，耗时约2天（48小时），但该法假阳性、假阴性性较高［3］，操作复杂，不适合实验室常规开展。应用CHROM－agar筛选平板法进行MDRAB的筛查较上述两种方法有一定的优势，研究国内尚属空白，国外的研究也较少。

3．3 CHROM－agar筛选平板法的应用可大幅缩短MDRAB的病原学诊断时间，对该菌感染病人的早期病原诊断、及时地治疗该菌引起的感染、快速制定院感防控策略等方面有重要意义。

［1］陈佰义，何礼贤，胡必杰，等．中国鲍曼不动杆菌感染诊治与防控专家共识［J］．中华医学杂志，2012，92（2）：76．

［2］Gordon NG，Wareham DW，et al．Evaluation of CHROM－agar Acinetobacter for Detection of Enteric Carriage of Multidrug－Resistant Acinetobacter baumannii in Samples from Critically Ill Patients［J］．J Clin Microbiol，2009，47：2249．

［3］胡 源，何利华，张建中．bla＿OXA＿51＿like碳青霉烯酶基因 PCR扩增用于鲍曼不动杆菌检测的可行性评价［J］．中国病原生物学杂志，2009，4（10）：730．