非洲猪瘟的研究进展

黄福军李可启

（1山东亚太中慧集团，山东禹城 251200；2江苏扬州大学，江苏扬州 225009）

非洲猪瘟的研究进展

黄福军1李可启2

（1山东亚太中慧集团，山东禹城 251200；2江苏扬州大学，江苏扬州 225009）

非洲猪瘟虽然在我国尚没有被发现，但其从西非至东非、欧洲、亚洲的传播态势已经形成。非洲猪瘟对我国养猪业的潜在威胁越来越大，加强对该病的病原学研究和对其流行病学的认识，并研发能够快速诊断和防治该病的技术十分重要。本文主要介绍了非洲猪瘟的病原特点、流行病学特征、临床症状、病理学、快速诊断方法以及国内外对其的研究进展，旨在为该病的防治提供一定理论依据。

非洲猪瘟；病原学；流行病学；临床症状；快速诊断；防治方法

非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由 ASFV(African swine fever virus，ASFV)引起猪的一种急性、高度接触性传染病。该病最早于1921年在非洲肯尼亚被报道，非洲、欧洲以及美洲的许多国家都受到了该病的影响[1]。非洲猪瘟是发病过程最为复杂，且最具有经济意义的病毒性疾病之一，也是世界动物卫生组织（OIE）要求各成员国及时通报的疾病之一。该病临床症状以高热、病程短、高死亡率、内脏器官广泛性出血以及呼吸系统和神经系统功能改变为主要特征[2,3]。本病对养猪业危害甚大，我国将其列为一类动物疫病。目前,针对该病缺乏有效的疫苗进行免疫预防，该病的防控面临着巨大挑战。随着世界经济全球化的发展，自然生态环境随之改变，一些严重危害动物和人类健康的跨国疫病不断发生。许多源于国外的动物疫病相继传入我国，使我国现代农业和养殖产业遭受了沉重打击，严重影响了我国的经济和国际贸易发展。

1 病原学特征

ASFV属于虹彩病毒科，虹科病毒属，形状呈五角或六角形，大小为175～215 nm。病毒核衣壳蛋白呈20面体对称，直径为180 nm，基因组由单分子线状双股DNA组成，长度为170～190 kb[4]。DNA分子具有共价的闭合末端、反转重复区和发夹结构，编码200多种蛋白质。在猪体内，ASFV可在几种类型的细胞浆中，尤其是网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制。该病毒多参与消化道感染，存在于感染猪的血液、组织液、内脏及所有分泌物和排泄物内[5,6]。ASFV活力很强，冷藏6年的血液在室温下保存数星期仍具有感染力，皮肤和肌肉所含有的病毒在冷冻或室温干燥状态保存，可存活几年。此病毒对高温敏感，在55℃ 30分钟或60℃10分钟条件下即可灭活(失去传染性)，或置1%甲醛中6天，2%氢氧化钠中42小时，卢戈氏液中10分钟，病毒也可灭活。其对腐败和干燥环境都有较高的抵抗力，且可在鸡胚卵黄囊中生长繁殖。临床上患该病痊愈的猪在10个月内仍带毒。研究者认为，该病毒不只有一种类型，其通过动物传若干代后，抗原可能会发生改变，为此，在对该病的免疫上存在很多问题。由于该病毒在病猪体内存在的时间长，对自然环境抵抗力强，因此易于传播扩散，污染的猪圈舍、饲料及饮水等都可传染。临床观察认为，昆虫(如猪虱等)可能是其传播媒介[4-6]。

2 流行病学特征

ASFV是目前唯一已知核酸为DNA的虫媒病毒，是非洲大陆本土病原，猪是本病的自然宿主。该病自1921年在肯尼亚首次被发现以来，一直存在于撒哈拉以南的中、南部和西部非洲国家。非洲猪瘟的症状与猪瘟极为相似，直到1910年两者始终混淆不清[7]。直至1921年，英国学者认为这种类似猪瘟的猪病，是由一种不能和猪瘟病毒交叉免疫的病毒所引起，非洲猪瘟才被明确为猪的另外一种疫病。猪对此病毒的感染性很高，在家猪中常造成暴发式流行，给世界各地养猪业造成很大的危害。猪与野猪对本病毒都系自然易感性，各品种及各不同年龄的猪群易感性均很强[8]。Montgomery于1921年曾设法对白鼠、天竺鼠、兔、猫、犬、山羊、绵羊、牛、马、鸽等动物进行感染试验，均未成功，而Velho于1956年报告，他曾用兔子盲传26代后攻毒猪会致其死亡。现有研究认为，公野猪和家猪对本病易感性最强。本病是通过直接或间接接触而传染的[9]，所以饲料、饮水、圈舍等都是传播的媒介。非洲猪瘟由野猪传染给家猪的方式还未明确，据研究表明，这种传播很可能是通过昆虫进行的，而家猪相互之间极容易由同圈饲养管理不善而造成感染。ASFV可经过口和上呼吸道系统进入猪体，在鼻咽部或是扁桃体发生感染，病毒迅速蔓延到下颌淋巴结，通过淋巴和血液遍布全身。强毒感染时细胞变化很快，在呈现明显的刺激反应前，细胞均已死亡。弱毒感染时，刺激反应很容易观察到，细胞核变大，普遍发生有丝分裂。现在欧洲的非洲猪瘟，已经慢性化，感染此病的猪渐渐成为带毒猪，这一点值得重视[10-12]。

3 临床症状

自然感染潜伏期5～9天，或更短，临床实验感染为2～5天。发病时体温升高至41℃，约持续4天，直到死前48小时体温下降，临床症状直到体温下降时才显现出来，这与猪瘟症状出现在体温升高时不同[3]。最初发热3～4天时，病猪食欲下降，极度脆弱，常躺在舍角。脉搏快，咳嗽，呼吸困难，比正常快约三分之一，呈浆液或粘液脓性结膜炎，有些毒株会引起带血下痢，呕吐，血液变化的症状，似猪瘟[5]。白血球数目减少约50%，淋巴细胞也同样明显减少。体温升高时发生白血球性贫血，至第4天白血球数下降至40%，同时可观察到未成熟中性白血球数目的增加。病猪往往发热后第7天死亡，或出现症状后两天很快死亡[6]。

4 临床病理学变化

在耳、鼻、腋下、会阴、尾、脚等无毛部分呈界限明显的紫色斑，耳朵紫斑部分常肿胀，中心有暗红色出血现象，边缘褪色，尤其在腿及腹壁皮肤处肉眼可见。通过显微镜观察，真皮内小血管严重充血，肉眼可见紫色斑，血管内发生纤维性血栓。耳朵紫斑部分的上皮基层组织内，可见血管血栓性坏死现象，切开胸腹腔，心包有许多血色液体。内脏浆膜处可见浅红色瘀斑，尤其小肠处多见。直肠壁深处、心包和肾脏处有弥漫性出血现象，胸膜下水肿特别明显。病猪淋巴节肿大，伴有出血现象。腺脏肿大，髓质肿胀区呈深紫黑色，切面突起，淋巴滤胞小而少，脾脏处有暗红色栓塞。循环系统的表现为心包液特别多，少数病例有混浊且含有纤维蛋白，多数病猪心包下及心内膜充血。呼吸系统的表现为喉、会厌有瘀斑充血及扩散性出血现象，并且比猪瘟更加严重，气管前三分之一处有瘀斑。显微镜观察发现，肠道充血但没有出血病灶，肺泡则呈现出血现象，淋巴球呈破裂状。经肉眼观察，肝表现正常，但近胆部分组织有充血及水肿现象，小叶间结缔组织有淋巴细胞、浆细胞及间质细胞浸润现象。

5 快速诊断方法

5.1 临床诊断

非洲猪瘟与猪瘟等其他出血性疾病的症状和病变相似，它们的亚急性型和慢性型病变在生产现场实际上很难区别，因而必须借助实验室方法才能鉴别。经尸体解剖，如发现猪出现脾和淋巴结严重充血，形如血肿，则可怀疑为猪瘟，可进行实验室诊断[13]。

5.2 实验室诊断

由于缺乏有效疫苗进行防控，所以实验室检测技术是目前用以监测和控制非洲猪瘟暴发的有效方法。世界动物卫生组织规定，由试验得到活病毒抗原，包括对传染源的操作、处理病原体等需要在动物生物安全三级（ABL-3）实验室进行[14]。目前实验室快速检测方法主要包括免疫酶技术、动物接种试验、细胞吸附试验、免疫组化法、免疫酶技术、荧光抗体试验、血清学试验（间接ELISA、夹心ELISA、间接免疫荧光试验）、病毒核酸检测（荧光定量PCR技术、巢式PCR、多重PCR）等方法。

⑴红细胞吸附试验：将健康猪的白细胞加上非洲猪瘟猪的血液或组织提取物，37℃培养，如见许多红细胞吸附在白细胞上，形成玫瑰花状或桑椹体状，则为阳性；

⑵直接免疫荧光试验：荧光显微镜下观察，如见细胞浆内有明亮荧光团，则为阳性；

⑶间接免疫荧光试验：将猪瘟病毒接种在长满Vero细胞的盖玻片上，未接种病毒的Vero细胞作为对照。试验后，对照正常，待检样品在细胞浆内出现明亮的荧光团核荧光细点可被判定为阳性；

⑷酶联免疫吸附试验：对照成立时（阳性血清对照吸收值大于0.3，阴性血清吸收值小于0.1），待检样品的吸收值大于0.3时，判定为阳性；

⑸免疫电泳试验：抗原于待检血清间出现白色沉淀线者可判定为阳性；

⑹间接酶联免疫蚀斑试验：肉眼观察或显微镜下观察，蚀斑呈棕色则为阳性，无色则为阴性[15,16]。

随着分子生物学技术的不断发展，两种或多种技术的联合应用，将为ASFV的分子流行病学调查提供更加准确的试验数据。

6 防治方法

在无本病的国家和地区应防止ASFV的传入，在国际机场和港口，从飞机和船舶来的食物废料均应焚毁。无本病地区应建立快速诊断方法和制定一旦发生本病时的扑灭计划。一旦有ASF疫情进入，采取实验室诊断方法尽早作出诊断非常重要。

现在已有多种用于检测病毒、病毒抗原或者病毒DNA的检测方法，检测抗体的方法也有报道。同时进行抗体以及抗原检测对于此病的正确诊断以及对疫情准确的评估具有重要意义。由于该病疫苗尚缺乏，所以ASF的清除显得相当困难，需要较长的一段时间努力。成功的清除计划需要农民、兽医人员以及政府部门的共同参与[3]。生猪以及猪肉产品的运输应予以严格监控，且禁止使用泔水喂猪，及时检测发现并淘汰感染病毒的猪，加强猪场的生物安全，给予养猪者一定补偿。非洲猪瘟虽然在我国尚没有被发现，但从西非至东非、欧洲、亚洲传播的态势已经形成，对我国的潜在威胁越来越大。所以加强对该病的防控以及诊断防治技术研发工作十分重要。

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S852.65+1

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1673-4645(2013)06-0058-03

2013-02-25

黄福军（1985-），男，山东聊城人，农学学士，目前主要从事猪病研究工作，E-mail：likeqi401622@163.com