鼻咽癌患者EB病毒检测的临床意义

陈瑜萍，阮辉，肖志勇

（1.福建省福州市第二医院耳鼻喉科，福建 福州 350007；2.福建省福州市第二医院检验科）

鼻咽癌在我国东南地区是一种常见恶性肿瘤，其发生被证实与EB病毒感染密切相关。EB病毒（epstein－barr virus，EBV）是一种γ疱疹病毒，目前已有令人信服的证据支持EB病毒是鼻咽癌重要的致病因子，肯定参与鼻咽癌的多阶段、多因素发生过程［1］。被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，并可产生各种抗原及相应的抗体。对EB病毒各种抗原抗体及EBV－DNA检测一直是鼻咽癌筛查、辅助诊断和监测病情变化的主要生物学方法［2］。本研究旨在对确诊为鼻咽癌患者放疗前后血浆中EBVVCA－IgA、EBV－EA－IgA、EBV－DNA的检测结果进行对比，从而对鼻咽癌放疗后的疗效及预后判断进行探讨。

1 资料和方法

1.1 临床资料

我科自1998年至2010年收集鼻咽癌患者76例，均经病理诊断为低分化鳞癌，其中男性47例，女性29例，年龄18－73岁。

1.2 试剂和仪器

VCA－IgA酶联免疫吸附法（ELISA）检测试剂盒（北京贝尔生物工程有限公司）；EA－IgA酶联免疫吸附法检测试剂盒（德国IBL International GMBH公司）；EB病毒核酸扩增聚合酶链反应（PCR）荧光检测试剂盒（中山大学达安基因股份有限公司）；EL－808半自动酶标测试仪；德国Roche LightCybler实时荧光定量基因扩增系统。

1.3 方法

放疗前均通过酶联免疫吸附法检测患者血清VCA－IgA和 EA－IgA，PCR法（FQ－PCR）定量检测患者血浆中EBV－DNA，实验操作均按试剂盒要求。并进行电子鼻咽镜检查，鼻咽部CT扫描（包括颅底骨质和全颈部），胸部X光片，腹部B超检查。放疗总剂量一般为7 000cGy，每周5次，每次200cGy，分7周完成。如诊断为N2期及以上淋巴结转移，则同步行化疗。放化疗后3个月复查上述实验室指标及一系列影像学检查，比较放疗前后EBV－VCAIgA、EBV－EA－IgA 和 EBV－DNA 的变化及与临床情况对比。

2 结果

根治性治疗后3个月复查 EBV－VCA－IgA、EBV－EA－IgA和EBV－DNA结果如表1。76例中，放疗前VCA－IgA阳性71例，阴性5例；治疗后阳性69例，阴性7例。EB－EA－IgA放疗前阳性68例，阴性8例；治疗后阳性者64例，阴性12例。以上两种指标治疗前后阳性率变化经统计学检验无明显显著差异（P＞0.05），但两种指标阳性抗体滴度都较治疗前有明显下降。放疗前EBV－DNA检测阳性者60例，阴性者16例；治疗后阳性者11例，阴性者65例。治疗后阳性率明显下降，经统计学检验差异有显著意义（P＜0.01）。11例检出阳性者中2例证实为远处转移，8例为临床复发，故其肿瘤进展阳性预测值为90.9%，其中10例肿瘤进展者EBV－DNA水平在放疗前就高于其他患者。在65例阴性患者中，共有3例远处转移，8例复发，故阴性预测值为83.1%。64例患者血浆EBV DNA水平与临床结果相符，故准确率为84.2%。

表1 鼻咽癌患者放化疗前后EB－VCA－IgA，EB－EA－IgA及EBV－DNA检测结果（例）

3 讨论

EB病毒与鼻咽癌的发生、发展密切相关，EB病毒感染人体，在裂解期病毒基因完全表达，细胞主要合成早期细胞内抗原（early intracellular antigen，EA）、衣壳抗原（EB virus capsid antigen，VCA）等。大量文献报道，联合检测EBV－VCA－IgA、EBV－EAIgA抗体水平对鼻咽癌具有诊断意义［3］。EB病毒仅能在B淋巴细胞中增殖，以环状DNA形式游离在胞浆中，并整合于染色体内。随着PCR技术的推广，血浆中EBV－DNA水平检测也广泛运用于鼻咽癌早期诊断、预后判断、疗效监测和临床分期等。本研究通过检测上述3项指标，检测结果进行对比，从而对鼻咽癌放疗后的疗效及预后判断进行探讨。

从结果观察到，放疗前后 EBV－VCA－IgA、EBV－EA－IgA阳性率变化无明显差异，提示此两项阳性率指标对疗效观察不敏感，可能是由于两种抗体在人体内的半衰期较长，即使体内EBV清除后，仍有较长时间维持在较高浓度，因此发生质变即转阴仍不明显。但其阳性抗体滴度较治疗前有较明显下降，此与曾希等［4］的研究结果相似。可间接提示，随着治疗进行与病灶的缩小，EB病毒EBV－VCAIgA、EBV－EA－IgA抗体滴度逐渐下降，有着量变的过程，也间接提示 EB病毒 EBV－VCA－IgA、EBVEA－IgA与治疗过程呈一定相关性。

从结果观察到，EBV－DNA治疗前后阳性率有明显变化，提示该指标对疗效观察敏感。本实验中，经过治疗，EBV－DNA阳性率由78.9%转为14.5%，迅速转阴，提示随着治疗肿瘤缩小及清除，EB病毒也随之清除，体现在EBV－DNA水平迅速下降转阴，故EBV－DNA对监测鼻咽癌放疗后疗效存在价值。64例患者血浆EBV－DNA水平与临床结果相符，准确率为84.2%，提示其不失为一个判断疗效及肿瘤进展情况较可靠的指标。11例放疗后阳性患者中被证实为复发及转移者10例，肿瘤进展阳性预测值为90.9%，故放疗后仍为阳性者提示肿瘤进展可能性极大，预后不良。应该进行更全面的临床和影像学检查，可缩短随访的间隔时间，进行更加密切的随访。65例阴性患者中有11例肿瘤进展，阴性预测值为83.1%，提示放疗后转阴患者仍有肿瘤复发及进展的可能，仍需定期随访，以防止漏诊。

鼻咽癌临床分期是影响其预后的主要因素，鼻咽癌患者血清中EB病毒分子水平与肿瘤的分期和临床进展有明显相关性［5］。通过检测治疗前后EBV－DNA水平发现，预后越差者其EBV－DNA水平越高。本研究也进一步证实了鼻咽癌患者血浆EBV－DNA可以准确反应肿瘤负荷［6］，并随着肿瘤的清除而迅速下降至检测极限值以下［7］。因此，从理论上讲鼻咽癌治疗后血浆中检测出EBV－DNA提示肿瘤复发或远处转移，本次研究结果与此相符。

总之，鼻咽癌放疗后患者血浆EBV－DNA是监测肿瘤进展的有效方法，有利于早期诊断复发和转移，并采取临床干预措施。

［1］潘孝彰.新发传染病［M］.北京：人民卫生出版社，2004：59－61.

［2］季明芳，郭媛卿，梁锦胜，等.鼻咽癌患者发病前后EB病毒VCA／IgA和EA／IgA滴度动态分析［J］.中华肿瘤杂志，2003，25（3）：243－245.

［3］陈云，刘根焰，姚堃，等.定量检测EB病毒 VCA－IgA和 EAIgA抗体对EB病毒相关鼻咽癌的诊断意义［J］.南京医科大学学报（自然科学版），2009，29（12）：1638－1642.

［4］曾希，曾颖，王承龙.33例鼻咽癌患者治疗前后血清EB病毒VCA－IgA跟踪分析［J］.南华大学学报：医学版，2010，38（1）：62－64.

［5］胡春卉，李山.EB病毒诊断方法研究进展［J］.肿瘤学杂志，2010，16（1）：78－80.

［6］Lin JC，Wang WY，Chen KY，et al.Quantification of plasma Epstein－Barr virus DNA in patients with advanced nasopharyngeal Carcimoma［J］.N Engl 1Jmed，2004，350（24）：2461－2470.

［7］Lo YM，Leung SF，Chan LYS，et al.Kinetics of plasma Epstein－Barrvirus DNA during radiation therapy for nasopharyngeal carcinoma ［J］.Cancer Res，2000，60（9）：2351－2355.