张家国,孙静,潘洪民
(1.国家农产品现代物流工程技术研究中心,山东 济南 250103;2.山东省农产品贮运保鲜技术重点实验室,山东 济南 250103)
疲劳是指人们从事体力或脑力活动,经过一定的时间和达到一定的程度后出现的活动能力下降,表现为疲倦、肌肉酸痛或全身无力的现象。疲劳可以分为急性疲劳和慢性疲劳。急性疲劳主要是由于频繁而强烈的肌肉活动所引起的;慢性疲劳主要是长时间而反复的活动所引起的。而现代生活中大多数人出现的以及对人的身心危害最大的就是慢性疲劳[1]。
为消除体力疲劳,除了充分注意营养和休息外,发现疾病还应须及早治疗,在药物治疗方面可适当运用维生素、氨基酸、激素等。但通过西药解除疲劳毕竟不是好办法,而且长期服用可能有副作用。中药对于消除疲劳虽见效慢,但一般没有副作用,效果较好[2]。
泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),又名鳅(《尔雅》)、鳅鱼(《本草拾遗》),属于鲤形目、鲤亚目、鳅科的小型鱼类。该鱼食性杂,抗病力强,生长快,是我国重要的名优经济鱼类,分布在我国除青藏高原外的各地沟渠、稻田、池塘、河流、湖泊及水库等水域中。近年来,随着我国养殖业的迅猛发展和人工饲养技术的不断提高,泥鳅的产量逐年增长,但关于泥鳅的深加工和综合利用探讨甚少[3]。泥鳅的肉或全体均可入药,也是人们常食的鱼类,其体表的皮肤能够分泌出丰富的黏液,具有重要的生理功能。目前,人们从泥鳅黏液中已经分离到多种生物活性物质,如糖蛋白[4]、凝集素[5]、抗菌肽[6]、不饱和多烯脂肪酸、牛磺酸和赖氨酸等必需氨基酸以及锌硒等微量营养元素[7]等。泥鳅的食用常见方法主要是高温烹调,造成其活性成分的丧失,如何在保持其活性成分的前提下,开发出食用方便、携带便捷的功能性食品是泥鳅加工领域的关键[8-10]。针对以上问题,本实验研制了一种复方泥鳅超微粉胶囊,并对其抗疲劳功效进行了动物性实验研究。
1.1.1 泥鳅
大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus(Sauvage))(临沂水产养殖场)规格海尾10 g~15 g,无病无伤。泥鳅购入后水中暂养3 d,以使其吐净消化系统的内容物,并去除泥鳅的腥味。活泥鳅先在-30℃以下预冻,完全冻结后,在一定的真空条件下(真空度26.66 Pa~0 Pa,温度-45℃以下)冻干,从而达到低温脱水的目的。
1.1.2 中草药材
实验用中草药材均购自济南建联中药店。
1.1.3 胶囊的组方
胶囊由冻干泥鳅、枸杞子、太子参、黄精、百合和桑椹子共6种原料组成。
1.1.4 胶囊的制备
超微粉碎:按一定的重量比称取冻干泥鳅,把称取的冻干泥鳅与经过干燥的其它药材按配方混合,然后在BFM-6超微粉碎机内进行超微粉碎,粉碎粒度为200目以上。
高效混合:采用SYH-5型三维运动高效混合机(常州产)进行搅拌混合,搅拌的时间为3 min。
胶囊灌装:加入制备胶囊剂型所需的各种常规辅料,采用NJP-200型自动胶囊灌装机(浙江产)进行灌装,制成胶囊剂。
灭菌:装瓶封口后放置在微波炉中用微波灭菌5min于阴凉干燥处保存备用。
1.1.5 实验动物
雄性昆明种小白鼠48只,体重18 g~22 g,由山东大学实验动物研究所提供。
1.2.1 溶液配制
分别称取胶囊粉末0.75、1.50、3.00 g溶于100 mL蒸馏水中,依次配成浓度为 7.5×10-3、1.50×10-2、3.00×10-2g/mL的供试液备用。
1.2.2 分组与给药方法
将小白鼠随机分成4组各10只,分别为本品0.15、0.30、0.60 g/kg组和溶剂对照组(蒸馏水灌胃),各组经口灌胃1次/d,小鼠灌胃体积为0.2 mL/10 g体重。受试物给予时间30 d,然后分别进行抗疲劳能力测定。
1.2.3 小白鼠负重游泳实验
末次给药30 min后,将小鼠置游泳箱中,水深30 cm、水温(25±0.5)℃,鼠尾根部负荷 5%体重的铅皮。小鼠自游泳开始至死亡的时间为小鼠游泳时间。
胶囊由山东省疾病预防控制中心监测,测定结果见表1~表3。
表1 胶囊主要功效成分的含量Table 1 The main efficacious composition indicators of the compound loach superfine powder capsules
从表1可以看出,实验胶囊中含有皂苷、多糖和蛋白质3种活性成分,其含量分别达到3.18、5.68 mg/g和27.3%。
表2 胶囊有毒、有害物质的含量Table 2 The poisonous and harmful substances indicators of the compound loach superfine powder capsules mg/kg
从表2看出,实验胶囊中有毒有害物质铅、总砷及总汞的含量远低于GB16740-1997《保健(功能)食品通用标准》的规定。
表3 实验胶囊微生物学指标监测情况Table 3 The microbiological indicators of the compound loach superfine powder capsules
从表3看出,实验胶囊微生物学指标符合GB 16740-1997《保健(功能)食品通用标准》要求,对人体是安全的。
实验胶囊对小白鼠负重游泳的实验结果见表4。
表4 实验胶囊对小鼠游泳时间的影响()Table 4 The capsule on the influence of the time of swimming in small mice
表4 实验胶囊对小鼠游泳时间的影响()Table 4 The capsule on the influence of the time of swimming in small mice
注:*为与溶剂对照组和0.15 g/kg组比较具有显著性差异(P<0.05)。
从表4可以看出,小白鼠负重游泳时间随着剂量的增加而延长,并且给药量达到0.6 g/kg时,游泳时间达最大值113.79 min。方差检验表明,0.3 g/kg和0.6 g/kg两组与低剂量组(0.15 g/kg)及溶剂对照组有显著性差异。该实验结果证实,复方泥鳅超微粉胶囊具有显著的抗体力疲劳功能。
复方泥鳅超微粉胶囊采用冻干泥鳅、枸杞子、太子参等6味药食两用的原料精制而成,复方泥鳅超微粉胶囊中活性成分有皂苷、蛋白质和多糖等,其多糖的来源主要是泥鳅、枸杞和太子参[12]。据研究,从泥鳅黏液中分离提取的中性粗多糖,用凝胶过滤色谱柱在高效液相色谱仪上分离和测定,结果表明该多糖由1个高聚糖(MAP,19.1%)和 1个寡糖(MAO,80.9%)组成。通过化学模拟体系研究MAP对活性氧自由基的清除作用,结果表明,MAP对活性氧自由基O2-、-OH和H2O2有清除作用;对DNA链起到保护作用[13]。周军等[14]连续给小鼠灌胃不同剂量的MAP 14 d后进行密闭缺氧试验、亚硝酸钠中毒试验和急性脑缺血性缺氧试验,表明可明显延长小鼠在不同缺氧条件下的存活时间。MAP可增高小鼠血红蛋白含量,抑制组织脂质过氧化反应以及增加血浆中超氧化物歧化酶活性。增强血液的载氧能力可能是其耐氧的原因之一,其抗氧化机制可能与其清除活性氧的作用有关。李金华等[13]研究表明泥鳅粉有提高小鼠耐缺氧能力的作用。吴亚君[15]对小鼠的抗疲劳实验结果表明,MAP可显著延长小鼠的游泳时间和爬杆时间,说明MAP有抗疲劳作用。枸杞为茄科植物枸杞(Lycium barbarum L.)的成熟果实,具有滋补肝肾,益精明目之功效,含有枸杞多糖、多种氨基酸、微量元素、维生素、牛磺酸、生物碱、挥发油等化学成分。一般认为,其主要有效成分为枸杞多糖[16-17]。龚涛等[18]证实,枸杞粗多糖能较显著提高小鼠血清、肝脏及脑组织中SOD活性,降低MDA含量;极显著提高正常小鼠常压耐缺氧能力和游泳抗疲劳能力。太子参所含有的水提物还具有抗氧化活性的作用,实验证实,太子参提取液具有稳定的非酶类除超氧自由基的“SOD样作用”物质,提示太子参具有一定的体外SOD样的药理活性[19]。由于实验胶囊中含有枸杞子和太子参两种原料,因此,该胶囊同样具有一定的抗缺氧之功效。
通过以上实验和分析,充分证明复方泥鳅超微粉胶囊具有显著的抗疲劳之功效,是有效消除体力疲劳的功能食品。
[1]李晨东.慢性疲劳专袭都是白领[J].食品与健康,2010(1):12-13
[2]吕斌.慢性疲劳怎样消除[J].开卷有益.求医问药,2005(1):63
[3]张锐昌,蒋秋燕,张应龙,等.泥鳅的综合开发利用[J].食品与药品,2010,12(5):197-201
[4]Kimura M,Hama Y,Sumi T,et al.Characterization of a deaminated neur aminic acid-containing glycol protein from the skin mucus of the loach,misgurnus anguillicaudatus[J].J Biol Chem,1994,269(51):32138-32143
[5]Goto-Nance R,Wat anabe Y.Characterization of lectins from the skin mucus of the loach,misgurnus anguillicaudatus[J].Fisheries science,1995,61(1):137-140
[6]Park C B,Lee J H,Park I Y,et al.A novel antimicrobial peptide from the loach,misgurnu anguillicaudatus[J].FEBS Lett,1997,411(2):173-178
[7]钦传光,陈泽宪,周军,等.泥鳅与其提取物中微量元素的分析[J].微量元素与健康研究,2001,18(1):49-50
[8]罗艳萍,张家国,冷向军.泥鳅幼鱼对饲料中蛋白质的适宜需要量研究[J].安徽农业科学,2009,37(18):8541-8543
[9]张家国,冷向军,罗艳萍.泥鳅幼鱼对饲料中脂肪的适宜需要量研究[J].中国水产,2010(7):66-68
[10]张家国,孙静.复方泥鳅超微粉胶囊的成分分析[J].食品研究与开发,2011,32(7):165-168
[11]范青生,肖小年,胡伟.保健食品研制与开发技术[M].北京:化学工业出版社,2006:37-38
[12]钦传光,黄开勋,徐辉碧.凝胶过滤色谱法测定泥鳅多糖的组成及分子量[J].分析化学,2002,30(4):411-413
[13]钦传光,黄开勋,徐辉碧.泥鳅及其黏液抗炎作用的实验研究[J].中国药学杂志,2000,35(12):846-847
[14]周军,张晨晓,黄开勋.泥鳅多糖对小鼠耐缺氧作用的研究[J].中国药理学通报,2003,19(10):1182-1184
[15]李金华,张玉英,张惠琴,等.泥鳅粉对小鼠耐缺氧作用的研究[J].中国血液流变学杂志,2006,16(2):197-198
[16]王金章,王秀娟.枸杞子的化学成分和药理研究概况[J].天津药学,1999,11(3):14-15
[17]Geng C S,Wang S T,Zhou J H.Enhancing effect of lycium barbarum polysaccharides on the interleulcin 22 activity in mice[J].Clin J Pharmacol Toxicol(in Chinese),1989,3(3):175-179
[18]龚涛,王晓辉,赵靓,等.枸杞多糖抗氧化作用的研究[J].生物技术,2010,20(1):84-86
[19]余国奠,刘峻,陈喻,等.6个不同产地的太子参对超氧自由基清除作用的研究[J].中国野生植物资源,2000,19(4):7-8,19