陈骁勇 葛玉松
1.江苏省盐城市第一人民医院,江苏盐城 224001;2.江苏省盐城市药品检验所,江苏盐城 224002
高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚溶出度的研究
陈骁勇1葛玉松2
1.江苏省盐城市第一人民医院,江苏盐城 224001;2.江苏省盐城市药品检验所,江苏盐城 224002
目的 建立腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的溶出度测定方法。 方法 采用转蓝法,以0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质,转速为 100 r/min,取样时间为 30 min。液相色谱柱为 CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6×150 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.5%冰醋酸溶液(20∶80);检测波长为 249 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样体积 10 μL。 结果 乙酰氨基酚在0.210 8~1.054 0 μg线性范围内(r=0.999 99)呈良好的线性关系,平均回收率为99.4%。 结论 本法操作简便,结果准确可靠。能够用于测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的溶出度测定。
腰息痛胶囊;溶出度;对乙酰氨基酚;转蓝法
腰息痛胶囊收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十一册[1],是常用的中西药复方制剂,具有舒筋活络、祛瘀止痛、活血驱风作用。主要用于风湿性关节炎、肥大性腰椎炎、肥大性胸椎炎、颈椎炎、坐骨神经痛、腰肌劳损。对乙酰氨基酚是其主要成分之一,现行标准中没有其溶出度检查项,而目前国家对固体药品溶出度要求较高[2],为了解其溶出度情况,本文采用HPLC法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚在人工胃液中的溶出度。报道如下:
RCZ-8M溶出试验仪、RZQ-8D取样收集系统(天津市天大天发科技有限公司);Aglinet 1200高效液相色谱仪,包括G1311A四元泵高效液相色谱仪、G1329A自动进样器、G1322A真空脱气机、G1316A柱温箱、G1314B紫外检测器、Aglinet 1200化学工作站(美国安捷伦科技有限公司);XS205DU电子天平(梅特勒-托利多国际股份有限公司)。对照品为对乙酰氨基酚 (中国药品生物制品检定所,批号:100018-200408,含量测定用)。腰息痛胶囊(吉林省辉南辉发制药股份有限公司,规格:0.3 g/粒,批号 A:20100709,B:20101221,C:20110601),甲醇为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。
采用《中华人民共和国药典》2010年版二部附录溶出度测定法中的转蓝法[3],取样6片,每个转蓝中放入1片,以人工胃液900 mL(0.1mol/L盐酸溶液)作为溶出介质,转速为100 min/转,温度为37℃,取样时间为30 min,依法操作。腰息痛原标准采用标准曲线法测定对乙酰氨基酚含量测定[1],此方法操作比较繁琐,重现性差;经参照有关文献[4-9],并考虑到高效液相色谱法在测定复方制剂中单一成分的较强专属性,故采用高效液相色谱法。
色谱柱:CAPCELLPAK MG C18色谱柱(4.6×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.5%冰醋酸溶液(20︰80);检测波长:249 nm;流速:1 mL/min;柱温:30℃;进样体积:10 μL。 理论板数按对乙酰氨基酚计算不少于1 500。
2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取对乙酰氨基酚10.54 mg,置100 mL容量瓶中,加流动相适量溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液。取对照品贮备液5 mL,置于10 mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2.3.2 供试品溶液的制备 取本品10片内容物,精密称定,研细,混匀,精密称取本品15.27 mg(约相当于对乙酰氨基酚5 mg),置于100 mL量瓶中,加流动相 40 mL,超声 1 min使溶解,放冷,用流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45 μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。
分别精密吸取对照品贮备液 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μL;照上述高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚峰面积,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,得回归方程Y=3 790.056 4X+5.624 3,r=0.999 99。结果表明对乙酰氨基酚在0.210 8~1.054 0 μg范围内呈良好的线性关系。见图1。
取“2.3.2”项下的供试品溶液,分别于 0、1、2、4、8、12 h进行测定,经计算在12 h内对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.7%,表明对乙酰氨基酚在12 h内稳定。
取“2.3.1”项下的对照品溶液,连续进样5次,计算对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.1%。表明精密度良好。
精密称取己测定的样品适量(约相当于对乙酰氨基酚5 mg)共9份,分别精密加入对照品适量,置于100 mL量瓶中,用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过。照“2.2”项色谱条件测定,计算回收率。见表1。
表1 回收率结果
2.8.1 溶出方法确定 以经脱气的0.1 mol/L盐酸溶液900 mL作为溶出介质;转速:120 r/min;溶出温度:(37±0.5)℃,取6片样品按照溶出度测定方法测定,在30 min时取10 mL溶出液,滤过,精密量取续滤液5 mL置10 mL量瓶中,加0.1 mol/L盐酸溶液至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取对乙酰氨基酚对照品,精密称定,用0.1 mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1 mL中约含50 μg的溶液,作为对照品溶液;照“2.2”项色谱条件下测定。见图2。
2.8.2 阴性对照试验
取腰息痛胶囊处方中不含对乙酰氨基酚的其他原料,按制备工艺同法制成不含对乙酰氨基酚的阴性对照胶囊,照“2.1”项下溶出条件同法测定;测定结果显示空白辅料对试验无影响。见图2。
2.8.3 测定溶出度
取三批样品各6片,按照溶出度测定方法操作,在15 min时分别取样5 mL;另取此三批样品同法操作,取样时间分别为30、45、60 min;依法测定各样品的平均溶出百分率,实验结果表明,腰息痛胶囊在0.1 mol/L盐酸溶液中,其对乙酰氨基酚在45 min内能全部溶出。见表2。
表2 溶出度试验(%)
常用溶出介质有蒸馏水、0.1 mol/L盐酸溶液及不同pH值的磷酸盐缓冲液。考虑到对乙酰氨基酚略溶于水,因此,水不适宜作为溶出介质,溶出介质的pH值在1.2~7.5之间对乙酰氨基酚的溶出度几乎没有影响[4,10],而0.1 mol/L盐酸溶液较接近于人体胃液环境,且对乙酰氨基酚在0.1 mol/L盐酸溶液中较稳定、易溶,故采用0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质。
由于胶囊剂崩解时限规定时间为30 min,而且三批样品在30 min时溶出度均己超过标示量的90%,因此规定溶出度取样时间为30 min。
转蓝法转速一般为50~100 r/min,通过对比50 r/min与100 r/min发现,当转速为50 r/min时,胶囊剂崩解不完全,影响药物溶出,故采用100 r/min。
实验结果表明,本文提出的方法简便、快捷、准确、线性关系良好、说明本方法可行。
[1]国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(第十一册)[S].北京:人民卫生出版社,1996:201.
[2]吕长淮.我国药物溶出度检查方法的现状与展望[J].安徽医药,2006,10(7):537-538.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2010:820.
[4]吕情花,罗晨曲.HPLC法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的含量[J].中国药师,2007,10(12):1252-1253.
[5]熊玲娜,孙萍,刘英明.复方酚咖伪麻胶囊中对乙酰氨基酚溶出度研究[J].中国药业,2007,16(1):34-35.
[6]钱忠义,葛薇薇.高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量和溶出度[J].药物分析杂志,2012,32(1):161-164.
[7]孙勤.不同厂家复方氨酚烷胺胶囊的溶出度考察[J].西北药学杂志,2012,27(2):70-71.
[8]郭怀忠,庞晓敏,王进文,等.高效液相色谱法测定维C银翘片溶出度的研究[J].中成药,2011,33(7):91-95.
[9]邵超.高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的溶出度[J].海峡药学,2011,23(7):80-81.
[10]吴卫涛.高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚片的含量[J].中国医药导报,2009,6(15):52-53.
Dissolution on dissolution rate of paracetamol in Yaoxitong Capsule by HPLC
CHEN Xiaoyong1GE Yusong2
1.The First People's Hospital of Yancheng City in Jiangsu Province,Yancheng 224001,China;2.Yancheng Institute for Drug Control in Jiangsu Province,Yancheng 224002,China
Objective To establish a method for determining the dissolution rate of paracetamol in Yaoxitong Capsule.Methods Rotating basket was used,the dissolution medium was 0.1 mol/L HCL solution;the rotation rate was 100 r/min with the sampling time of 30 min.CAPCELL PAK C18(4.6×150 mm,5 μm)clumn was used with mobile phase consisted of methanol-0.5%acetic acid solution (20:80).The detection wavelength was set at 249 nm and the flow rate was 1.0 mL/min.The colunm temperature was set at 30℃ and injection was 10 μL.Results The linear range of paracetamol was 0.210 8-1.054 0 μg(r=0.999 99)with an average recovery was 99.4%.Conclusion The method is simple and accurate,and can be used for the dissolution rate determination of paracetamol in Yaoxitong Capsule.
Yaoxitong capsule;Dissolution rate;Paracetamol;Rotating basket
R284.1
A
1674-4721(2012)11(c)-0058-03
2012-07-26 本文编辑:袁 成)