高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚溶出度的研究

陈骁勇 葛玉松

1.江苏省盐城市第一人民医院，江苏盐城 224001；2.江苏省盐城市药品检验所，江苏盐城 224002

高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚溶出度的研究

陈骁勇1葛玉松2

1.江苏省盐城市第一人民医院，江苏盐城 224001；2.江苏省盐城市药品检验所，江苏盐城 224002

目的 建立腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的溶出度测定方法。 方法 采用转蓝法，以0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质，转速为 100 r/min，取样时间为 30 min。液相色谱柱为 CAPCELL PAK C18色谱柱（4.6×150 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.5%冰醋酸溶液（20∶80）；检测波长为 249 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；进样体积 10 μL。 结果 乙酰氨基酚在0.210 8～1.054 0 μg线性范围内（r=0.999 99）呈良好的线性关系，平均回收率为99.4%。 结论 本法操作简便，结果准确可靠。能够用于测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚的溶出度测定。

腰息痛胶囊；溶出度；对乙酰氨基酚；转蓝法

腰息痛胶囊收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十一册[1]，是常用的中西药复方制剂，具有舒筋活络、祛瘀止痛、活血驱风作用。主要用于风湿性关节炎、肥大性腰椎炎、肥大性胸椎炎、颈椎炎、坐骨神经痛、腰肌劳损。对乙酰氨基酚是其主要成分之一，现行标准中没有其溶出度检查项，而目前国家对固体药品溶出度要求较高[2]，为了解其溶出度情况，本文采用HPLC法测定腰息痛胶囊中对乙酰氨基酚在人工胃液中的溶出度。报道如下：

1 仪器与试剂

RCZ-8M溶出试验仪、RZQ-8D取样收集系统（天津市天大天发科技有限公司）；Aglinet 1200高效液相色谱仪，包括G1311A四元泵高效液相色谱仪、G1329A自动进样器、G1322A真空脱气机、G1316A柱温箱、G1314B紫外检测器、Aglinet 1200化学工作站（美国安捷伦科技有限公司）；XS205DU电子天平（梅特勒-托利多国际股份有限公司）。对照品为对乙酰氨基酚 （中国药品生物制品检定所，批号：100018-200408，含量测定用）。腰息痛胶囊（吉林省辉南辉发制药股份有限公司，规格：0.3 g/粒，批号 A：20100709，B：20101221，C：20110601），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶出条件的选择

采用《中华人民共和国药典》2010年版二部附录溶出度测定法中的转蓝法[3]，取样6片，每个转蓝中放入1片，以人工胃液900 mL（0.1mol/L盐酸溶液）作为溶出介质，转速为100 min/转，温度为37℃，取样时间为30 min，依法操作。腰息痛原标准采用标准曲线法测定对乙酰氨基酚含量测定[1]，此方法操作比较繁琐，重现性差；经参照有关文献[4-9]，并考虑到高效液相色谱法在测定复方制剂中单一成分的较强专属性，故采用高效液相色谱法。

2.2 色谱条件

色谱柱：CAPCELLPAK MG C18色谱柱（4.6×150 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.5%冰醋酸溶液（20︰80）；检测波长：249 nm；流速：1 mL/min；柱温：30℃；进样体积：10 μL。 理论板数按对乙酰氨基酚计算不少于1 500。

2.3 溶液的制备

2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取对乙酰氨基酚10.54 mg，置100 mL容量瓶中，加流动相适量溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。取对照品贮备液5 mL，置于10 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3.2 供试品溶液的制备 取本品10片内容物，精密称定，研细，混匀，精密称取本品15.27 mg（约相当于对乙酰氨基酚5 mg），置于100 mL量瓶中，加流动相 40 mL，超声 1 min使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。

2.4 线性关系考察

分别精密吸取对照品贮备液 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μL；照上述高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得回归方程Y=3 790.056 4X+5.624 3，r=0.999 99。结果表明对乙酰氨基酚在0.210 8～1.054 0 μg范围内呈良好的线性关系。见图1。

2.5 稳定性试验

取“2.3.2”项下的供试品溶液，分别于 0、1、2、4、8、12 h进行测定，经计算在12 h内对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.7%，表明对乙酰氨基酚在12 h内稳定。

2.6 精密度试验

取“2.3.1”项下的对照品溶液，连续进样5次，计算对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.1%。表明精密度良好。

2.7 回收率试验

精密称取己测定的样品适量（约相当于对乙酰氨基酚5 mg）共9份，分别精密加入对照品适量，置于100 mL量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。照“2.2”项色谱条件测定，计算回收率。见表1。

表1 回收率结果

2.8 溶出度测定

2.8.1 溶出方法确定 以经脱气的0.1 mol/L盐酸溶液900 mL作为溶出介质；转速：120 r/min；溶出温度：（37±0.5）℃，取6片样品按照溶出度测定方法测定，在30 min时取10 mL溶出液，滤过，精密量取续滤液5 mL置10 mL量瓶中，加0.1 mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取对乙酰氨基酚对照品，精密称定，用0.1 mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1 mL中约含50 μg的溶液，作为对照品溶液；照“2.2”项色谱条件下测定。见图2。

2.8.2 阴性对照试验

取腰息痛胶囊处方中不含对乙酰氨基酚的其他原料，按制备工艺同法制成不含对乙酰氨基酚的阴性对照胶囊，照“2.1”项下溶出条件同法测定；测定结果显示空白辅料对试验无影响。见图2。

2.8.3 测定溶出度

取三批样品各6片，按照溶出度测定方法操作，在15 min时分别取样5 mL；另取此三批样品同法操作，取样时间分别为30、45、60 min；依法测定各样品的平均溶出百分率，实验结果表明，腰息痛胶囊在0.1 mol/L盐酸溶液中，其对乙酰氨基酚在45 min内能全部溶出。见表2。

表2 溶出度试验（%）

3 讨论

3.1 溶出介质的选择

常用溶出介质有蒸馏水、0.1 mol/L盐酸溶液及不同pH值的磷酸盐缓冲液。考虑到对乙酰氨基酚略溶于水，因此，水不适宜作为溶出介质，溶出介质的pH值在1.2～7.5之间对乙酰氨基酚的溶出度几乎没有影响[4，10]，而0.1 mol/L盐酸溶液较接近于人体胃液环境，且对乙酰氨基酚在0.1 mol/L盐酸溶液中较稳定、易溶，故采用0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质。

3.2 取样时间的选择

由于胶囊剂崩解时限规定时间为30 min，而且三批样品在30 min时溶出度均己超过标示量的90%，因此规定溶出度取样时间为30 min。

3.3 转速的选择

转蓝法转速一般为50～100 r/min，通过对比50 r/min与100 r/min发现，当转速为50 r/min时，胶囊剂崩解不完全，影响药物溶出，故采用100 r/min。

实验结果表明，本文提出的方法简便、快捷、准确、线性关系良好、说明本方法可行。

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Dissolution on dissolution rate of paracetamol in Yaoxitong Capsule by HPLC

CHEN Xiaoyong1GE Yusong2
1.The First People's Hospital of Yancheng City in Jiangsu Province,Yancheng 224001,China;2.Yancheng Institute for Drug Control in Jiangsu Province,Yancheng 224002,China

Objective To establish a method for determining the dissolution rate of paracetamol in Yaoxitong Capsule.Methods Rotating basket was used,the dissolution medium was 0.1 mol/L HCL solution;the rotation rate was 100 r/min with the sampling time of 30 min.CAPCELL PAK C18(4.6×150 mm，5 μm)clumn was used with mobile phase consisted of methanol-0.5%acetic acid solution (20:80).The detection wavelength was set at 249 nm and the flow rate was 1.0 mL/min.The colunm temperature was set at 30℃ and injection was 10 μL.Results The linear range of paracetamol was 0.210 8-1.054 0 μg(r=0.999 99)with an average recovery was 99.4%.Conclusion The method is simple and accurate,and can be used for the dissolution rate determination of paracetamol in Yaoxitong Capsule.

Yaoxitong capsule；Dissolution rate；Paracetamol;Rotating basket

R284.1

A

1674-4721（2012）11（c）-0058-03

2012-07-26 本文编辑：袁 成）