饲料蛋白水平及鱼粉蛋白含量对齐口裂腹鱼生长、体组成及消化酶活性的影响

向 枭 周兴华 陈 建 李代金 王文娟 周小秋

饲料蛋白水平及鱼粉蛋白含量对齐口裂腹鱼生长、体组成及消化酶活性的影响

向 枭1，2周兴华1陈 建1李代金1王文娟1周小秋2

(西南大学荣昌校区水产系淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室水产科学重庆市市级重点实验室1，重庆 402460)
(四川农业大学动物营养研究所2，雅安 625014)

试验探讨了不同蛋白水平(CP)及鱼粉蛋白含量(FP)对齐口裂腹鱼生长及体组成的影响。分别设5个蛋白水平(30%、32．05%、37%、41．95%、44%)和 5个鱼粉蛋白水平(0%、5．86%、20%、34．14%、40%)。以CP、FP作为试验因素。按照二因子二元二次正交旋转组合设计，分为16个试验组，每组设3个重复。每个重复30尾鱼［(11．45±0．39)g］。经过50 d养殖试验。结果表明，不同蛋白水平及鱼粉蛋白含量对齐口裂腹鱼幼鱼生长有显著影响(P＜0．05)。CP 37%，FP40%时，试验鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饲料蛋白质效率(PER)最大(分别为 103．31%、1．42%/d 和 145．74%)，CP 44%，FP 20% 时，试验鱼的饵料系数(FCR)最低(为1．97)。以WGR、SGR、PER、FCR为指标，利用二元回归分析表明，齐口裂腹鱼生长性能最优时饲料CP、FP分别为39．94%～42．54%，30．67%～45．47%;对齐口裂腹鱼体组成分析表明，不同的饲料CP、FP对鱼体粗灰分和水分影响不显著(P＞0．05)，但对鱼体粗蛋白和粗脂肪有显著的影响(P＜0．05);适宜的饲料CP、FP能有效改善齐口裂腹鱼消化酶的活性，提高对营养物质的吸收利用率。综合考虑各生长指标、肌肉营养成分、消化酶活性及各指标间的相关性和成本因素，建议在实际生产配方中齐口裂腹鱼幼鱼饲料中蛋白水平及鱼粉蛋白质量分数分别以39．94%～42．54%，30．67%～45．47%为宜。

齐口裂腹鱼 蛋白水平 生长 体组成 消化酶活性

蛋白质是动物生命的物质基础，具有维持动物新陈代谢等多种生理功能，其主要来源于动植物蛋白源。作为水产动物饲料的重要饲料蛋白源的鱼粉，资源量逐年下降，价格居高不下，且大多数鱼类对鱼粉中磷的利用率不高［1］。因此，开发质优价廉的动植物蛋白源替代鱼粉已成为水产动物营养研究领域的必然趋趋。而植物蛋白来源广，资源丰富，价格低廉。则植物蛋白源替代鱼粉的研究在不断地深入。朱庆国［2］认为点带石斑鱼(Epinephelus coioides)生长过程中适宜的动植物蛋白比为3．0∶1～2．2∶1，陈建等［3］报道了淡水白鲳(Colossomabrachypomum)饲料中适宜的动植物蛋白比为1∶1．67;向枭等［4］研究表明饲料中动植物蛋白比为 0．37∶1～0．18∶1 时鲤(Cyprinus carpio)的消化酶活性最高。齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)是长江上游的一种底层冷水性鱼类，肉质细嫩，营养价值丰富［5－6］，味道鲜美，是我国重要的经济鱼类。近年来由于捕捞过度等因素的影响，野生种群数量急剧下降。为了保护、开发和持续利用这一水生动物资源，对于其人工繁殖技术［7］，各种营养素的需求已有一定的研究［8－10］。但对于植物蛋白在其养殖中的应用则少有报道。本试验拟通过采用豆粕替代部分鱼粉，设计出不同蛋白水平和鱼粉蛋白比含量的饲料，对齐口裂腹鱼幼鱼的生长性能、体组成及消化酶活性指标进行初步研究，通过综合评价，探索齐口裂腹鱼幼鱼生长过程中饲料蛋白水平和鱼粉蛋白含量的最佳组合。为开发高效、优质的齐口裂腹鱼配合饲料提供科学的依据。

1 材料与方法

1．1 试验设计和试验饲料

试验设 5个蛋白水平(30%、32．05%、37%、41．95%、44%)，5 个鱼粉蛋白水平(0、5．86%、20%、34．14%、40%)。

以饲料中蛋白水平(CP)和鱼粉蛋白水平(FP)作为试验因素。按照二因子二元二次正交旋转组合设计［11］，设计出等能饲料(总能为14．0 kJ/g)。可分为A1～A16共16个试验组，每组设3个重复。试验饲料以鱼粉为动物蛋白源，豆粕为植物蛋白源，混合油脂(鱼油∶豆油=1∶1)为脂肪源。设计出9个饲料配方及其营养水平组合(表1)。1～8号料喂A1～A8组试验鱼，9号料喂A9～A16组试验鱼。饲料原料全过60目筛，各组饲料逐级混合均匀，再加水拌匀，用QRLS－150型电动绞肉机制成粒径2 mm颗粒饲料，25℃风干后置于4℃冰箱内储存备用。饲料配方见表2。

表1 饲料2因子5水平二元二次回归正交旋转组合设计表

1．2 试验鱼与试验管理

试验用齐口裂腹鱼幼鱼购自四川峨眉冷水鱼场。购回后用4%的食盐水消毒后暂养在水泥池中(暂养期间按3%投喂商品鱼饲料)。暂养7 d后，选取体格健康、无畸形、体重(11．45±0．39)g的齐口裂腹鱼1 440尾随机投入48个水族箱(规格为1．0 m×1．0 m×1．0m)，每箱30尾。每天按3%～5%的投饵率投饵3 次(8∶00、12∶30、17∶00)，投饵 1 h 后将残饵捞出烘干扣除。饲养期为50 d，每天记录水温，溶解氧，24 h不间断充气，保证水体溶解氧稳定。试验期间保持微流水，平均水温在15～20℃，水体pH7．0～7．5，透明度50 cm 以上，溶氧5．5 mg/L 以上。

1．3 指标测定与方法

生产性能:试验开始时，测定试验鱼的初始体重，试验结束后，停食1 d，测定各组试验鱼体重，计算其增重率和特定生长率，依据养殖期间饲料的投喂量、饲料蛋白含量及试验鱼的增重计算饵料系数和饲料蛋白转化率。

增重率(WGR，%)=(Wt－Wo)×100/Wo

特定生长率(SGR，%/d)=(ln Wt－ln Wo)×100/t

蛋白质效率(PER，%)=(Wt－Wo)×100/F×P

饵料系数(FCR)=F/(Wt－Wo)

式中:Wo为试验开始时鱼体重/g;Wt为试验结束时鱼体重/g;F为饲料摄入量/g;P为饲料粗蛋白质质量分数/%;t为养殖试验天数/d。

表2 试验饲料组成及营养水平(风干基础，%)

样品采集:试验结束后，停食1 d，每个水族箱中随机取鱼5尾，放在冰盘上解剖，取肠道，肝胰脏，背肌(鳃盖后端，侧线上方肌肉)用4℃预冷后的生理盐水冲洗，然后用滤纸吸干水分。清除肠道内的食物，去除脂肪、肠系膜，用滤纸吸干后分别对肠道及肝胰脏部分称重。并分别加入相当于其重20倍的生理盐水，迅速用冰冻玻璃匀浆器匀浆后，低温条件用离心机在3 500 r/min转速下离心20 min，取上清液作为粗酶提取液，测定消化酶活性;用背肌测定肌肉营养成分。－20℃冷冻保存备用。

肌肉营养组成测定 肌肉粗蛋白质采用凯氏定氮法测定(GB 5009．5—2010);粗脂肪采用索氏抽提仪测定法(GB/T 6433—2006);水分采用干燥法(105℃)测定(GB/T 6435—2006);粗灰分采用马福炉灼烧(550 ℃)法测定(GB/T 6438—2007)［12］。消化酶活性测定 蛋白酶活性采用Folin－酚试剂法［13］;淀粉酶活性采用次碘酸法测定［13］;脂肪酶活性采用聚乙烯醇橄榄油水解法测定［13］。

1．4 数据统计与分析

采用SPSSStatistics 17．0对数据进行单因素方差分析(One－way ANOVA)，Duncan’s氏多重比较，差异显著水平为P＜0．05。以二元二次多项式来拟合WGR、SGR、PER、FCR与饲料蛋白水平及动物蛋白含量间的相关关系。试验数据以平均值±标准差(Means±SD)表示。

2 结果与分析

2．1 饲料蛋白水平及动物蛋白含量对齐口裂腹鱼生长性能的影响

表3 不同蛋白水平及动物蛋白含量对齐口裂腹鱼生长的影响n =3

由表3可知，A7组试验鱼的增重率、特定生长率、饲料蛋白质效率最大，分别为103．31%、1．42%/d和145．74%。分别比 A8 组提高了 46．08%、32．71%和55．36%，WGR、SGR除与A1和A2差异不显著外(P＞0．05)，与其余各试验组差异显著(P ＜0．05)，而PER则与其余各试验组差异显著(P＜0．05)。试验鱼的饵料系数在A5组最低，为1．97。除与A1差异不显著外(P＞0．05)，与其余各试验组差异显著(P＜0．05)。

饲料蛋白水平及鱼粉蛋白含量的交互作用对WGR、SGR、PER、FCR的影响见图1～图4。随着饲料中蛋白质水平上升，齐口裂腹鱼的WGR、SGR逐渐上升。当蛋白水平达到37%时，WGR、SGR达到最高点，之后则逐渐缓慢下降并趋于平稳。当鱼粉蛋白质量分数上升到20%时，随着饲料蛋白水平的上升，试验鱼的WGR、SGR达到一折点后上升缓慢。鱼粉蛋白含量处于较低水平时，随着饲料蛋白水平的升高，试验鱼PER呈缓慢上升趋势，鱼粉蛋白含量处于较高水平时，随着饲料蛋白水平的升高，试验鱼PER先呈升后降的趋势，而FCR则呈现出与PER相反的趋势。说明饲料中蛋白水平与动物蛋白含量间存在着明显的交互作用。在一定范围内，随着饲料蛋白水平上升，试验鱼的生长加快，但超过一定的水平后，齐口裂腹鱼的生长反而呈下降趋势。在饲料蛋白水平相等时，鱼粉蛋白含量越高，试验鱼对饲料有着更高的利用率，生长越好，但当鱼粉蛋白含量超过一定范围后，齐口裂腹鱼对饲料的利用率反而下降。

2．2 齐口裂腹鱼主要生长指标与饲料蛋白水平及动物蛋白含量的回归关系

分别以齐口裂腹鱼的WGR、SGR、PER、FCR为因变量(分别为 Y1、Y2、Y3、Y4)，以饲料蛋白水平和鱼粉蛋白含量分别作为方程自变量，用X1、X2表示。以X1X2表示蛋白水平和鱼粉蛋白含量二者之间的交互作用，得到二元二次回归方程为:

WGR与饲料蛋白水平和动物性蛋白含量的回归方程:

则齐口裂腹鱼WGR最优时饲料蛋白水平和动物性蛋白质的质量分数分别为41．19%、32．82%。

SGR与饲料蛋白水平和动物性蛋白含量的回归方程:

1.3.1 术后患者恢复情况 患者术后下床活动时间、术后胃肠道恢复时间、胸腔引流管放置时间及住院时间。

齐口裂腹鱼SGR最优时饲料蛋白水平和动物性蛋白质的质量分数分别为:42．54%、30．67%。

PER与饲料蛋白水平和动物性蛋白含量的回归方程:

齐口裂腹鱼PER最优时饲料蛋白水平和动物性蛋白质的质量分数分别为:29．42%、45．47%。

FCR与饲料蛋白水平和动物性蛋白含量的回归方程:

齐口裂腹鱼FCR最优时饲料蛋白水平和动物性蛋白质的质量分数分别为:39．94%、37．93%。

2．3 饲料蛋白水平及动物蛋白含量对齐口裂腹鱼肌肉营养成分的影响

由表4可知:试验鱼肌肉中的粗蛋白含量为A1组最高(22．17%)，除与A2、A7组差异不显著外(P＞0．05)，显著高于其他各组(P ＜0．05);粗脂肪含量在 A4 组最高(7．13%)，除与 A1、A2、A5、A8 差异不显著外(P＞0．05)，显著高于其他各组(P＜0．05);饲料蛋白水平和鱼粉蛋白含量对试验鱼肌肉中水分和灰分的含量均无显著的影响(P＞0．05)。

表4 饲料蛋白水平及鱼粉蛋白含量对齐口裂腹鱼肌肉营养成分的影响(鲜重基础，%) n=10

2．4 饲料蛋白水平及动物蛋白含量对对齐口裂腹鱼消化酶活性的影响

3 讨论

3．1 饲料蛋白水平及动物蛋白含量对齐口裂腹鱼生长及营养成分的影响

蛋白质除了是鱼体的构成成分外，还能为鱼类提供能量。在适宜的蛋白质水平范围内，随着蛋白含量增加鱼体生长速度加快［14－15］。当幼鱼饲料中蛋白质超过55%时暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)幼鱼的增重率、饲料效率呈现不同程度的下降［16］。王武等［17］报道，饲料中蛋白质水平为37%时，瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus Vachelli)的绝对增重率、相对增重率最高，饵料系数最低。其可能的原因有:一是过量的蛋白质对鱼体产生毒害作用［18］，过高的饲料蛋白使鱼体氨排泄增加，造成蛋白质浪费［19］;二是多余的蛋白质在体内被作为能量而氧化分解［20－21］或转化为脂肪［22］;三是由于蛋白质的特殊动力作用增大了热能消耗，从而降低了能量利用率和蛋白质效率［23］。曹俊明等［24］发现草鱼(Ctenopharyngodon idellus)摄食蛋白水平较高的饲料后，可提高鱼类体蛋白质含量。而鱼类饲料蛋白是由动物蛋白和植物蛋白构成的，由于这两类蛋白源的氨基酸含量及组成不同，当饲料中这两类蛋白质的构成合理，则饲料中氨基酸平衡程度高，可提高鱼类的生长效果和对饲料的利用率。向枭等［25］认为，饲料蛋白水平为30%时，当动植物蛋白比为1:1．67时，淡水白鲳生长性最优，鱼体肌肉中粗蛋白含量最高。庄平等［26］报道，中华鲟(Aclpenser Sinensis)幼鱼饲料最佳动植物蛋白比1∶1;饲料中动植物配比为0．75～1∶1 时，既能保证花鱼骨生长性能和蛋白利用率又能降低养殖成本［27］。说明动植物蛋白之间有明显的互补效应。

本试验中，蛋白水平和鱼粉蛋白含量之间存在显著的交互作用。饲料蛋白水平对齐口裂腹鱼生长速度的影响较大，且二者间的不同组合对其生长有显著影响，高蛋白、中等鱼粉蛋白含量组合的试验饲料使齐口裂腹鱼表现出较好的生长效果。当齐口裂腹鱼的WGR、SGR、PER、FCR达到最优时，本试验中齐口裂腹鱼饲料中的适宜蛋白水平和动物蛋白质量分数分别为 39．94%～ 42．54%，30．67%～ 45．47%。这与何雷等［10］的结论有一定的差异，可能与试验鱼的规格、饲料组成及试验条件等多种因素有关。

表5 不饲料蛋白水平及动物蛋白含量对对齐口裂腹鱼消化酶活性的影响(鲜物质基础，U/g)n=10

蛋白水平为 41．95%，鱼粉蛋白质量分数为34．14%时能显著提高齐口裂腹鱼肌肉中粗蛋白含量，饲料蛋白水平为32．05%，鱼粉蛋白质量分数为5．86%的时则可显著提高试验鱼肌肉粗脂肪含量，不同的蛋白水平和鱼粉蛋白含量对试验鱼肌肉中水分和粗灰分的影响均不显著。这与张显娟等［28］对牙鲆(Paralichthys olivaceus)、刘永坚等［29］对红姑鱼(Sciaenops ocellatus)的报道有一定的差异，可能与鱼类的食性有关。

3．2 饲料蛋白水平及动物蛋白含量对齐口裂腹鱼消化酶活性的影响

消化酶是维持机体正常代谢的活性物质，对生物体内的各种化学变化起催化作用。消化酶活性的提高，可促进鱼类对营养物质的消化吸收，提高鱼类的生长速度。但消化酶活性的变化受到饲料中蛋白质含量等多种因素的影响［30］，且饲料的性质可影响鱼类消化酶的活性［31］。Lee等［32］认为饲料中蛋白源的种类对南美白对虾(Penaeus vannamei)蛋白酶活力的影响大于蛋白质含量所造成的影响;摄食蛋白水平为10．26%的饲料时蟾胡子鲇(Clarias batrachus)肠道蛋白酶的活性低于摄食蛋白质水平为21．85%的饲料［33］，大口黑鲈(Micropterus salmoides)［34］、大西洋鲱(Clupea harengus)［35］幼鱼的消化酶的活性均与所摄取的食物性质有关。用豆粕替代50%的鱼粉时，能提高斑点叉尾鮰的淀粉酶活性［36］，向枭等［37］报道，饲料中动植物蛋白比为0．18∶1时，鲤蛋白酶、淀粉酶活性和脂肪酶活性均达到最大。表明饲料中适宜的动植物蛋白比例在一定程度上刺激了消化酶的分泌，提高了鱼类对各种营养成分的消化率和蛋白质利用率，促进鱼类的生长。

本试验中，在一定蛋白水平范围内，齐口裂腹鱼消化酶活性的变化趋势基本与其生长性能和饲料转化率的变化趋势相一致。肠和肝胰腺蛋白酶活性随着饲料中蛋白水平的增加而增高，当蛋白水平后达到一定程度后，消化酶活性趋于稳定甚至有所下降。饲料CP为37%，FP为40%的组合能有效提高齐口裂腹鱼蛋白酶、淀粉酶活性，但与CP为41．95%，FP为34．14%的组合无明显差异(P＞0．05);齐口裂腹鱼肠脂肪酶在饲料CP为30%，FP为20%时活性最高，肝胰脏脂肪酶则在饲料 CP为32．50%，FP为31．14%时活性最高。说明一定的饲料蛋白水平和动物蛋白含量能有效促进齐口裂腹鱼消化道酶的分泌，提高消化酶的活性，从而提高对饲料的消化利用率，促进齐口裂腹鱼的生长。

4 结论

综上所述，齐口裂腹鱼饲料中蛋白水平和动物蛋白含量在WGR、SGR、PER、FCR等指标上存在显著的交互作用。综合考虑各生长指标、肌肉营养成分、消化酶活性及各指标间的相关性和成本因素，建议齐口裂腹鱼幼鱼饲料中蛋白水平和鱼粉蛋白质量分数分别以 39．94%～42．54%，30．67%～45．47% 为宜。

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Effects of Dietary Protein and Animal Protein Levels on Growth，Body Composition and Digestive Enzyme Activities of Juvenile Prenant's Schizothoracin(Schizothorax prenanti)

Xiang Xiao1，2Zhou Xinghua1 Chen Jian1Li Dianjin1Wang Wenjuan1 Zhou Xiaoqiu2

(Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development，Ministry of Education，Key Laboratory of Aquatics Science of Chongqing，Department of Fisheries in Rongchang Compust，Southwest University1，Chongqing 402460)
(Animal Nutrition Institute，Sichuan Agriculture University2，Ya'an 625014)

A 50－ day feeding trial of 5 dietary protein levels(30%，32．05%，37%，41．95%，44%)and 5 dietary fishmeal protein levels(0，5．86%，20%，34．14%，40%)designed with 3 replications was conducted to determine the effects of dietary protein and fishmeal protein levels on growth，muscle composition and digestive enzyme activities of juvenile prenant＇s schizothoracin ［initial body weight:(11．45 ± 0．39)g］．Using two－ factor，five－ level，orthogonal regression rotational combination design，fish were fed respectively to apparent satiation by 9 experimental diets．The results showed that the Weight Gain Ratio(WGR)，the Specific Growth Ratio(SGR)and Protein Efficiency Ratio(PER)of fish were significantly affected by dietary protein × fishmeal protein interaction(P ＜0．05)．All of the WGR，SGR and PER of prenant＇s schizothoracin were highest(103．31% ，1．42%od－1，145．74%respectively)when fed the CP37%and AP40%diet，FCR was the lowest(1．42)when fed the CP44%and AP20%diet．Using binary regression analysis of the WGR，SGR，PER，FCR，the optimal levels of protein and fishmeal protein in diet was 39．94% －42．54%and 30．67%－45．47%respectively．Muscle protein and lipid levels was influenced by dietary protein and fishmeal protein levels(P ＜ 0．05)，however，there had no significant effects on muscle moisture and crude ash of prenant＇s schizothoracin(P ＞0．05)．Activities of digestive enzyme were improved at a certain levels of dietary protein and fishmeal protein．In conclusion，this study suggests that growth performance of juvenile prenant＇s schizothoracin is improved at a suitable protein × fishmeal protein in diet．Fish fed diet containing 39．94%～42．54%protein and 30．67%～45．47%fishmeal protein got the best growth performance and the ideal body conposition．

prenant＇s schizothoracin(Schizothorax prenanti)，protein levels，growth performance，muscle composition，digestive enzyme activities

S965．1

A

1003－0174(2012)05－0074－08

中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2009C165)，西南大学水产养殖学科基金(SC1002)

2011－08－20

向枭，男，1973年出生，博士，副教授，水产动物营养与饲料

周小秋，男，1965年出生，教授，博士生导师，水产动物营养与饲料