不同配比花粉与黄豆粉饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中游离氨基酸含量的影响

方文富 郭海坤 林法俊 纪旭光 彭秋玫 贺 茜 段晓峰 张会杰

（福建农林大学蜂学学院，福州 350002）

花粉是蜜蜂生长发育所需营养蛋白质的重要来源。蜜蜂从花粉中摄取蛋白质，并通过消化将大分子的蛋白质分解成小分子的氨基酸，吸收后在体内组成适合本身生命活动所需要的各种蛋白质。在科学养蜂中，当外界缺乏花粉时常常通过补充饲喂人工花粉代用品来弥补粉源的不足，促进蜂群繁殖和提高蜂王浆产量。目前，人工花粉代用品已成为科学饲养蜜蜂重要的蛋白质补充饲料[1-3]，有关人工花粉代用品及其添加剂对蜜蜂的作用前人也作了一些有益的探讨[4-7]，但长期以来人工花粉代用品的大多是凭经验配制，究竟不同人工花粉代用品对蜜蜂的影响如何，尚缺乏深入的科学的研究。本文试图通过采用不同配比油菜花粉与黄豆粉的人工花粉代用品饲喂蜜蜂，就其对意大利蜜蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中游离氨基酸的影响进行探讨，以为丰富蜜蜂营养相关生理学理论和为养蜂生产采用适合的人工花粉代用品提供科学依据。

1 材料与方法

试验于2008年3～6月，在福建省福州市西郊福建农林大学蜂学学院教学蜂场进行。

1.1 试验蜂群

试验蜂群为福州本地意大利蜜蜂，25群，蜂群遗传性状一致，群势 1 足框，采用1/2脾蜂箱饲养。试验蜂群分5组，每组5群。试验期时，试验群巢门均安装蜂花粉采集器（脱粉板圆孔直径4.9 mm），防止蜜蜂把天然花粉带进蜂巢，并当日开始分别饲喂不同蛋白质饲料，饲喂时将人工蛋白质饲料制成花粉饼，置于蜂群内巢框上梁供蜜蜂自由采食，饲喂的量以略有剩余为度，每3天饲喂1次，持续到试验结束为止。

1.2 不同配比油菜花粉与黄豆粉饲料的配备

试验用油菜（Brassica napus L.）花粉产自甘肃省民乐县；黄豆（Glycine max Merrill）粉来自杭州市萧山区靖江镇；豆粉直径0.3 mm。

试验时，采用油菜花粉与黄豆粉按不同比例混合而成。1 号饲料（100%花粉），2 号饲料（75%花粉、25%黄豆粉），3 号饲料（50%花粉、50%黄豆粉），4 号饲料（25%花粉、75%黄豆粉），5号饲料（100%黄豆粉）。

1～5号饲料的蛋白质含量： 1 号饲料 24.5%，2 号饲料28.9%，3 号饲料34.4%，4 号饲料36.8%，5 号饲料38.8%。

1.3 试验用工蜂幼虫的提供

在饲喂人工蛋白质饲料10 d后，通过缩脾密集群势逼蜂造脾和逼蜂王产卵的方法限王产卵。方法是，每个试验蜂群中抽出1个脾，寄放在其他蜂群，原位插入1个础框，脾造好后蜂王立即在新脾上产卵，然后再用4根铁线标记蜂王在4～6 h 内的产卵区域，并做好记录，以便届时提取工蜂幼虫的样本。

1.4 工蜂幼虫血淋巴样本的提取

在标记产卵区的幼虫发育到6日龄时，分别从试验蜂群标记区提取供取血淋巴的工蜂幼虫，然后立即提取幼虫的血淋巴。每个试验群提取幼虫血淋巴约 1 ml。每种饲料饲喂的蜂群提取 5 群的工蜂血淋巴样本，5 种饲料饲喂的蜂群共提取25个试验群25个血淋巴样本。提取的血淋巴加入抗氧化剂（苯基硫脲）后至于冰箱的冷冻室冷冻保存供用。

1.5 血淋巴中游离氨基酸种类和含量的测定

采用磺基水扬酸法测定游离氨基酸。方法是将工蜂幼虫血淋巴用5%磺基水扬酸稀释10倍，充分混匀，然后在10000 r/min转速下离心10 min。析出沉淀物，取上清液直接上机测试。

1.6 数据统计分析方法

先采用F检验统计分析试验结果数据的差异显著性，当差异显著时再采用Q检验进行多重比较分析。

2 结果与分析

饲喂5 种不同比例油菜花粉与黄豆粉蛋白质饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中氨基酸含量影响的试验和统计结果如表1所示。

表1 不同配比油菜花粉与黄豆粉混合饲料对6日龄工蜂幼虫血淋巴游离氨基酸含量影响（单位：g/L）

由表1可见，采用不同配比油菜花粉与黄豆粉混合饲料饲喂的6 日龄工蜂幼虫不但其血淋巴中同种游离氨基酸含量之间均无显著性差异（P＞0.05），而且其血淋巴中游离氨基酸总量之间也无显著性差异（P＞0.05）。

3 讨论

蜜蜂幼虫血淋巴中的游离氨基酸是蜜蜂在消化、分解来自蛋白质饲料中蛋白质的重要产物之一，也是蜜蜂幼虫在体内组成适合本身生命活动所需要的各种蛋白质的物质基础之一。

对采用5种不同配比油菜花粉与黄豆粉混合蛋白质饲料培育的6日龄工蜂幼虫血淋巴中苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬草氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸和脯氨酸等16种游离氨基酸含量的试验结果显示，饲喂不同蛋白质饲料培育的6日龄工蜂幼虫血淋巴中16种游离氨基酸的含量之间和16种游离氨基酸总含量之间的差异均不显著（P＞0.05）。说明不同配比油菜粉和黄豆粉混合蛋白质饲料对6日龄工蜂幼虫血淋巴中的游离氨基酸，无论是同种氨基酸还是16种游离氨基酸总含量都没有影响。这可能是由于蜜蜂幼虫体内的蛋白质转化酶类能够把不同配比的油菜花粉与黄豆粉混合蛋白质饲料中的蛋白质消化、分解成发育所需种类和数量的游离氨基酸所致。

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