cyclinD1在肾癌中的表达及临床意义

暴希照，宋爱新

(1.汤阴县人民医院，河南 汤阴456150;2.安阳市第三人民医院，河南 安阳455000)

CyclinD1 蛋白是细胞分裂周期中非常重要的负性调节剂，是CDK4/6 活化因子，参与并调控细胞从G1 期到S 期的分裂，与其结合后共同促进细胞周期。研究表明cyclinD1 蛋白过度表达可以加速G1/S 期转化，使损伤的DNA 得不到修复而导致细胞异常增殖。然而，关于cyclinD1 在肾癌中的表达及其相互关系目前尚不明确。本文旨在研究cyclinD1 蛋白在肾癌中的表达及其与肿瘤生物学行为的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选用该院2006 ～2009年泌尿外科肾癌切除术后经病理证实的标本63 例，年龄在23 ～67 岁，平均46 岁;男性35 例，女性28 例;按Fuhrman 分级标准:G1 期28 例，G2 期20 例，G3 期15例;临床分期按UICC 标准:T1 期22 例;T2 期18例;T3 期15 例;T4 期8 例。另取10 例正常肾组织作为对照组，标本均来自肾外伤肾切除手术患者。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 全部标本均经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋，连续切片，厚约4 μm，苏木精-伊红染色。

1.2.2 试剂与方法 鼠抗人cyclinD1 多克隆抗体、DAB 试剂盒、SP-9003 免疫组化试剂盒均购自北京中山生物公司。操作过程严格按照说明书进行。

1.3 结果判断 cyclinD1 阳性染色定位于细胞核。随机选取10 个高倍视野，计数1 000 个肿瘤细胞，计算阳性细胞百分率。阳性细胞百分率低于10%为阴性“-”，10% ～50% 为弱阳性“+ ”，高于50% 为阳性“++”，弱阳性和阳性例数之和作为阳性总数。

1.4 统计学分析 采用SPSS 10.0 统计软件包分析，2 组均数间比较用t 检验，计数资料组间比较采用卡方检验和Pearson 相关分析，以P ＜0.05 为有统计学意义。

2 结果

2.1 cyclinD1 在肾组织中的表达 cyclinD1 主要在细胞核中表达，在细胞核中出现棕黄色颗粒为阳性表达。在正常肾组织中，cyclinD1 蛋白的阳性表达率为24.3%，肾癌组织中的阳性表达率为60.8%，明显高于正常肾组织，差异有统计学意义(P ＜0.05)。

2.2 cyclinD1 表达与肾癌生物学行为的关系 cyclinD1 阳性表达率在肾癌中随着临床肿瘤分级级别的增高逐渐减低，差异无统计学意义(P ＞0.05);cyclinD1 阳性表达率在肾癌中随着肿瘤组织学分级级别的增高也逐渐减低，差异有统计学意义(P ＜0.05)。cyclinD1 在肾癌中的阳性表达与年龄、性别无关，见表1。

表1 cyclinD1 在肾癌中的表达及与临床各参数的关系

3 讨论

细胞周期调控失调是肿瘤发生、发展的重要环节，细胞周期紊乱是基因组不稳定的中心环节，可使不稳定细胞发生癌变的几率明显提高，从而参与肿瘤的发生、发展［1］。

cyclinD1 基因定位于染色体l1q13，编码由295个氨基酸组成的蛋白产物。研究认为cyclinD1 的作用与视网膜神经胶原瘤蛋白(Rb 蛋白)有关，当Rb失活或功能减低或cyclinD1 过度表达时，都有可能影响到正常的细胞周期调控，使细胞周期越过G1/S限制点，导致各种原因受损伤的DNA 修复障碍及细胞增殖周期加快，最终使细胞恶变或恶性增殖［2］。Umekita 等报道在乳腺癌患者中，低级别的较高级者更易表达cyclinD1［3］。Lee 等在乳腺癌患者中发现，CyclinD1 阳性表达率高于正常乳腺组织，但随肿瘤分级增高，阳性率逐渐下降，CyclinD1 的表达与乳腺癌病理分级呈负相关［4］。该实验研究发现:在正常肾组织中，cyclinD1 蛋白的阳性表达率为24.3%，肾癌组织中的阳性表达率为60.8%，明显高于正常肾组织，差异有统计学意义。cyclinD1 在肾癌中随着临床肿瘤分级级别的增高其阳性表达率逐渐减低，差异无统计学意义，而随着肿瘤组织学分级级别的增高其阳性表达率也逐渐减低，差异有统计学意义，cyclinD1 在肾癌中的阳性表达与年龄、性别无关，与Lee 等的研究结果基本一致。在肾癌早期cyclinD1 高表达，随着肿瘤的进展，肿瘤细胞的生长转化为其他癌因子调控，不需要cyclinD1 的调控，从而引起cyclinD1 的低表达，这也就可以解释在组织学分级低的肾癌标本中，cyclinD1 高表达，而在恶性程度较高、组织学分级较高的肾癌标本中低表达这一现象。

综上所述，cyclinD1 在肾癌的发病机制中起着重要作用，有望成为判断肾癌恶性程度分级的标志物，但这一点还有待于对肾癌患者术后的随访调查而进一步完善。

［1］Hoeijmakers JH.Genome maintenance mechanisms for preventing cancer［J］.Nature，2001，411(6 835):366 -374.

［2］Diehl JA.Cycling to cancer with CyclinD1［J］.Cancer Biol Ther，2002，1(3):226 -231.

［3］Umekitay，Oh IY，Sagaray，et al.Over expression of cyclinD1 predicts for poor prognosis in estrogen receptor-negative breast cancer patients［J］.Int J Cancer，2002，98(3):415 -418.

［4］Lee CC，Yamatnoto S，Morirnura K，et al.Significance of cyclinD1 over expression in transitional cell carcinoma of the urinary bladderand Its correlation with histopathologic features［J］.Cancer，1997，79 (4):780 -789.