215株血培养病原菌种类及耐药性分析

饶荣 刘志军

随着现代医学的发展，侵入性诊疗手段增多，免疫制剂、广谱抗菌药物的广泛使用，耐药菌、条件致病菌和非条件致病菌的发病率显著增多，由血液感染引起的败血症和脓毒血症的病死率逐年增加，了解血液病原菌的分布及药敏情况，是监测医院感染、指导临床合理用药、控制细菌耐药性产生的重要手段。近年来血标本中革兰阳性菌已成为主要病原菌，尤其是免疫力低下者。现对我院2007～2010年门诊及住院病人215例血液细菌培养阳性标本的菌株分布及药敏结果进行回顾性分析报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 以无菌操作采取病人静脉血液5 ml注入血培养瓶中，立即送检。2007年1月至2010年12月期间门诊及住院病人血液细菌培养标本共688份，年龄10天～90岁，其中男125例，女90例。

1.2 仪器及试剂 BD BACTECTM9120/9240全自动血培养系统及配套的血培养瓶，HX-21细菌鉴定仪及配套试剂，药敏试验采用K-B法(药敏纸片购自英国Oxoid)，结果依据2006年和2007年美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的纸片扩散法判读结果。

1.3 ESBLs检测 按2004年NCLLS推荐的K-B法，用头孢噻肟(30μg)、头孢噻肟/克拉维酸(30μg/10μg)、头孢他啶(30μg)、头孢他啶/克拉维酸(30 μg/10μg)，药敏抑菌环直径相差≥5mm时，判定ESBLs阳性。

1.4 质控菌株 湖北省临床检验中心提供的金黄色葡萄球菌 ATCC25923、大肠埃希菌 ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.5 数据分析 应用WHONET-5软件进行分析。

2 结果

2.1 病原菌的分布情况见表1。

2.2 革兰阳性菌对常用抗菌药物敏感性见表2。

表1 215株病原菌的分布情况

表2 革兰阳性菌对常用抗菌药物敏感性(%)

2.3 革兰阴性菌的药物药敏结果61.29%的大肠埃希菌和41.67%的肺炎克雷白菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷白菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高。结果见表3。

3 讨论

我院血培养4年阳性标本数215份，阳性率为12.7%，与国内其他文献报道相似[1-2]。我院血培养病原菌以革兰阳性菌为主，革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌分离率较高，革兰阴性菌以大肠埃希菌和铜绿假单胞菌分离率较高，这与李凡金等[3]报道的相一致。肺炎克雷白菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性为100%，对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的敏感性也较高。大肠埃希菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高，此外大肠埃希菌对阿米卡星和妥布霉素的敏感性为＞70%。铜绿假单胞菌检出率较高，对阿米卡星和氨曲南的敏感性为＞70%，其他的耐药率均较高。铜绿假单胞不仅是血培养中重要的致病菌，也是医院感染常见病原菌，由该菌引起的院内感染较为普遍，且治疗困难，常形成多种耐药，特别是对于介入治疗、ICU及老年免疫力低下者的多重型耐药性较高，应引起临床高度重视，耐药机制为:产生抗菌药物灭活酶或修饰酶、改变抗菌药物作用靶位、膜屏障与外排泵高表达[4]，高突变株的产生等。本研究中共检出产ESBLs菌株24株，其中大肠埃希菌19株，肺炎克雷白菌5株，产ESBLs的菌株耐药性高于非产ESBLs的菌株，耐药机制为:药物诱导的靶位点基因突变、qnr基因通过质粒介导而耐药。产ESBLs菌和非产ESBLs的菌引起的感染治疗不同，临床医生应根据药敏结果选择用药，以减轻抗生素的选择性压力。

本研究中，凝固酶阴性葡萄球菌占分离菌的首位，凝固酶阴性葡萄球菌为条件致病菌，以前认为是共栖于皮肤、黏膜的非致病菌，但近来研究表明其具有细胞黏质等致病因子，有一定的致病能力，近年来报道由此菌引起的感染逐年增多[5]。因产凝固酶阴性葡萄球菌产生黏质，它不但有抗吞噬作用，还有助于粘附定植，并阻止抗菌药物向细菌内渗透，故凝固酶阴性葡萄球菌检出率高，但此菌同时也是血培养中最常见的污染菌，是否被污染，要根据病人血管内移植物、血管内导管和其他人工装置等危险因素，患者是否具有血液感染典型的临床症状、血培养的报警时间、血培养阳性≥2次、分离菌的耐药谱等判断，本组分离中也可能存在污染，临床在标本采集过程中应注意防止污染，在参考试验结果时应结合患者具体情况进行分析。 从表2可见，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌对复方新诺明、红霉素、四环素的耐药率＞70%，对利福平的敏感性较高，凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对万古霉素和替考拉宁无耐药株，但国外已有耐万古霉素的报道[6]，临床应注意监测。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌、甲氧西林敏感凝固酶阴性的葡萄球菌，这与抗生素的使用负荷和它们的多重耐药机制有很大关系。肠球菌除对万古霉素和替考拉宁无耐药株，对高浓度庆大霉素、氨苄西林、呋喃妥因的敏感性也较高。由于广谱抗生素及免疫抑制剂的使用，血培养真菌感染亦呈上升趋势。

表3 革兰阴性菌对常用抗菌药物敏感性(%)

综上所述，我院血培养病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主，其次为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷白菌。病原菌对抗菌药物耐药性较高。在以后工作中，应作好血液感染病原菌的监测，根据药敏结果合理选用抗生素，更有效控制感染，减少耐药菌株的产生。

[1]郝金中，张红升.血培养仪 Versa TREK-240检测血样本结果分析[J].检验医学与临床，2011，8(6):695-697.

[2]王炜，许淑珍.2004～2007年医院血培养病原病的种类及耐药性变迁[J].陕西医学杂志，2011，40(2):188-191.

[3]李凡金，汪平都.550份血培养阳性标本细菌分布及耐药性分析[J].检验医学与临床，2011，8(5):530-532.

[4]刘永芳，吕晓菊，宗志勇，等.铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药表型与外排泵表达水平的关系[J].中华检验医学杂志，2008，31(9):979-983.

[5]吴均竹，侯伶俐，周作华，等.血培养中病原菌的分布及耐药性分析[J].实用诊断与治疗杂志，2007，21(3):178-180.

[6]Zhang XC，Xu JZ.Introduction to THz wave photonics[M].Berlin:Springer，2010:175-235.