无公害药剂防治五味子白粉病及对叶片主要生理指标的影响

邓 勋 宋小双 马晓乾

(黑龙江省林科院森林保护研究所，哈尔滨 150040)

北五味子(Schisandrachinensis(Turcz.)Baill)是天然分布于我国东北长白山和小兴安岭地区的重要野生果树资源[1]，含有多种化学成分，具有抗疲劳、抗衰老等药理作用[2]，是东北地区主要的药用植物栽培品种。近年来，随着五味子人工栽培的面积的逐年扩大，缓解了中药市场对北五味子生药材的需求，但是北五味子白粉病和黑斑病的大面积发生对栽培生产造成了重要的影响，其中白粉病最严重，由于白粉病病菌在北五味子叶片表面的生长，严重影响了叶片的正常生理活动，最后会导致整个叶片枯萎脱落[3]。目前生产上主要采用三唑酮、甲基托布津等传统农药进行防治，效果不甚理想，同时病原菌的抗药性问题日益突出，因此筛选高效低毒的无公害农药实现对白粉病的有效控制迫在眉睫。农药使用后对非靶标植物的影响已引起人们的关注，研究表明叶面喷雾、树干注药防治后，农药对植物生理生化指标均有影响[4]。吴进才等研究发现，药剂处理后可导致水稻体内叶绿素含量下降，光合速率受抑制，使水稻抗逆性下降[5]；而唐光辉等研究表明，树干注药后，可导致可溶性蛋白、叶绿素等主要生理指标的下降，对树体的正常生理代谢影响显著[6]。笔者选择6种无公害农药对五味子白粉病的防治进行筛选，研究了高效农药防治后对五味子叶片内可溶性蛋白、叶绿素等生理指标含量和POD酶、CAT酶活性的影响，为理想药剂的选择及使用安全性评价提供依据。

1 试验材料和方法

1.1 供试药剂

选择6种农药进行田间试验。农药名称、主要成分、生产厂家如下：多抗霉素(WP)13%水剂(有效成分：多抗霉素，台湾兴农生物有限公司)；阿米西达(SC)250g/L悬浮剂(有效成分：醚菌酯，瑞士先正达作物保护有限公司)；世高(WG)10%水分散颗粒剂(主要成分：苯醚甲环唑，瑞士先正达作物保护有限公司)；井冈核苷(AS)3%水剂(主要成分：井冈霉素+核苷素，浙江汇丰生化有限公司)；凯润(EC)250g/L乳油(主要成分：吡唑醚菌酯，德国巴斯夫上海有限公司)。

1.2 田间试验及调查方法

试验地位于黑龙江省牡丹江林副特产研究所北五味子栽培基地，五味子为3年生植株。

防治方法：将6种药剂分别设定3个浓度梯度(表1)，以清水作为对照，共19个处理，每处理两株，两次重复，各处理随机区组排列，在2011年6月20日-7月10日期间，连续防治3次，每次间隔10d。

调查方法：在第3次施药后第10d、20d分别进行病情调查，每株随机选取100片叶进行病叶统计和分级，计算病情指数和相对防效，病叶分级标准如下：0级：叶上无病斑；Ⅰ级:病斑面积占整个叶面积的1/4以下；Ⅱ级:病斑面积占整个叶面积的1/4～1/2；Ⅲ级：病斑面积占整个叶面积的1/2～3/4；Ⅳ级：病斑面积占整个叶面积的3/4以上。病情指数及相对防效计算方法如下：

1.3 主要生理指标测定

样品采集：在防治后的第10d、20d和30d采样。叶片采集方法：分别在植株的上、中、下三部分采样,然后将所采集的每一处理的样品混合(叶片总数不少于100片)。用毛刷刷去叶片表面的污物,并用蒸馏水洗净、擦干。

指标测定：将叶片用滤纸吸干水分，称量试验材料0.5g，放入预冷的研钵中，加入石英砂，研磨成匀浆，8 000r/min，离心10min，取上清液进行主要生理指标测定，采用考马斯亮蓝G-250法测定总蛋白含量，采用愈创木酚法测定过氧化物酶(POD)活性，采用NBT光照化学还原法测定超氧化物岐化酶(SOD)活性，采用丙酮浸提法测定叶绿素含量[7]。

1.4 数据分析

试验数据采用SPSS软件、Duncan法进行差异显著性分析[8]。

2 结果与分析

2.1 6种药剂防治五味子白粉病的药效对比

本文选用了6种无公害农药进行五味子白粉病的田间防治试验，不同药剂间防治效果差异显著(见表1)，施药后7d调查，阿米西达800倍液防治效果可以达到87.82%，防治效果最好，而阿米西达1 000倍液、2 000倍液、凯润800倍液、多抗霉素800倍液和世高1 000倍液的防治效果均在80%以上，可有效控制病害的发生，不同药剂防治效果从高到低依次为：阿米西达>凯润>多抗霉素>世高>402>井冈核苷。其中多抗霉素属于生物农药，800倍液的防治效果可以达到80.08%，与化学药剂凯润和世高的效果相当。施药后14d调查，6种药剂的防治效果均有下降，其中阿米西达800倍液、1 000倍液防治达到80%以上，其他各药剂的不同处理防治效果均在60%以上，不同药剂防治效果从高到低依次为：阿米西达>凯润>多抗霉素>世高>402>井冈核苷。

表1 无公害农药对五味子白粉病的防治效果

2.2 对叶片主要生理指标的影响

2.2.1 对可溶性蛋白含量的影响

从图1可以看出，各药剂处理均可在一定程度上降低叶片中可溶性蛋白的含量，同生物农药多抗霉素相比，阿米西达处理对叶片效果更显著，800倍液处理10d后降低了7.64%，随着施药时间的延长，叶片对药物处理逐渐适应，可溶性蛋白含量在逐步回升，30d后恢复到正常水平。而生物农药多抗霉素对叶片可溶性蛋白的影响较小，其中在1 000倍和2 000倍处理后20d，可溶性蛋白含量超过对照，1 000倍液处理30d后比对照提高了1.95%，起到了促进的作用。

2.2.2 对叶绿素含量的影响

叶面喷施杀菌剂对叶片的叶绿素含量影响显著，从图2可以看出，两种药物的不同处理方式均可导致叶片叶绿素含量的下降，影响光合作用和叶片正常的生理代谢，其中阿米西达800倍液处理，叶绿素含量降低最多，达到9.15%，多抗霉素处理对叶片影响较小，处理30d后，叶片叶绿素含量基本恢复到正常水平。

2.2.3 对POD酶和CAT酶的影响

CAT酶是一种以铁卟啉为辅基的酶，能清除SOD的歧化产物H2O2为O2和H2O，避免某些具有生理功能的蛋白质和巯基酶被氧化，丧失活性，对生物膜造成损伤。POD是清除H2O2与许多有机氢过氧化物的抗氧化酶之一，它对H2O2非常专一，POD和CAT均是植物重要的保护酶。叶片喷施杀菌剂后，叶片的CAT酶和POD酶活性菌明显下降(图3、图4)，影响效果同可溶性蛋白和叶绿素含量，阿米西达作用大于多抗霉素，其中多抗霉素在低浓度处理后30d后，增加了两种保护酶的活性，对植物生长起到了促进作用。

通过分析施药后，对叶片的主要生理指标影响可以看出，生物农药对植物的影响较小，在防治效果相差不多的情况下，推荐使用生物农药进行五味子白粉病的防治，可以在有效控制白粉病发生的同时，最大限度地减少对植物的影响，保持其正常生长。

3 结论

经过药剂种类、浓度筛选，从6月中旬开始，使用阿米西达800倍液或1 000倍液、多抗霉素800倍液，每隔7d防治1次，连续防治3次，可以有效控制五味子白粉病的发生和蔓

延，防治效果可以达到80%以上。

不同药剂对五味子叶片主要生理指标的影响不同，防治10d后，阿米西达和多抗霉素菌降低了叶片可溶性蛋白、叶绿素含量以及CAT酶和POD酶的活性，30d后可以恢复到正常水平，其中多抗霉素可以提高叶片可溶性蛋白、叶绿素含量以及CAT酶和POD酶的活性，在一定程度上对五味子的生理活动起到了促进作用，在防治效果相差不多情况下，推荐使用多抗霉素对五味子白粉病进行防治。

参考文献:

[1]郑明善,全炳武,金明植,等.北五味子的栽培与利用概述[J].延边大学农学学报,2001,23(2):129～134.

[2]王森，张建国.五味子的研究概况及其开发前景[J].经济林研究，2003，21(4)：126～127.

[3]李爱民,邢力.五味子白粉病和黑斑病及其防治[J].特产研究,1997，(2):55.

[4]冯绪猛，罗时石，胡建伟.农药对水稻叶片丙二醛及叶绿素含量的影响[J].核农学报，2003,17(6):481～484.

[5]吴进才，徐俊峰，冯绪猛.稻田常用农药对水稻3个品种生理生化的影响[J].中国农业科学，2003,36(5):536～541.

[6]唐光辉，田鹏鹏，冯俊涛.树干注药对柳树叶片几种生理指标的影响[J].农药学学报,2006,8(4):383～386.

[7]陈建勋，王晓峰.植物生理学实验指导[M].广州：华南理工大学出版社，2002：35～54.

[8]蔡建琼.SPSS统计分析实例精选[M].北京:清华大学出版社,2006:123～148.