温灸法与温性药物治疗大鼠寒痹疗效观察

方若仪,邵晓梅

(1.浙江中医药大学第一临床医学院,杭州 310053;2.浙江中医药大学针灸神经生物学研究室,杭州 310053)

现今,风湿痹证是临床常见病症,由于患者感受寒邪、阳气不足,寒湿瘀阻的痛痹尤为显著,包括类风湿关节炎、风湿性关节炎、强直性脊柱炎等疾病。一般表现以肢体关节疼痛为主、病程长、关节功能障碍等为特点,因而又称痛痹或寒痹。由于西药治疗以非甾体类抗炎药治疗为主,但多伴有严重的副反应。中医药已广泛用于治疗痛痹,治疗原则有“活血化瘀”法、“行气止痛”法、“清热化痰”法、“温经通络”法等,但基于“寒则温之”的温通法治疗痛痹仍缺少足够的研究,因此在痛痹的治疗中难以充分发挥“寒则温之”的治疗特色与优势。本研究通过建立痛痹大鼠关节炎模型,观察在不同中医治法和疗法下,对实验性关节炎的炎症和疼痛程度等的影响,探讨“寒则温之”在实验性痛痹治疗中的应用效果与优势,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物分组与处理

46只 Wistar大鼠雄性,[(130±10)g]随机分为空白组、模型组、消炎痛组、中药组、艾灸组,空白组10只,其余各组均9只。消炎痛组在造模3 d后给予消炎痛灌胃,剂量3 mg/2 mL/只;中药组在造模3 d后给予中药(附子桂枝汤方)灌胃,剂量 2 mg/ 2 mL/只;艾灸组造模3 d后开始艾条温和灸治疗,艾条直径0.5 cm,取大椎、命门穴,艾灸距离2 cm,艾灸时间20 min/穴。每日治疗1次,共治疗7 d。空白对照组和模型组大鼠不作任何处理。

1.2 造模方法

将实验大鼠饲养于室温22℃、湿度65%的环境1星期,并于每日下午置冰浴[(2±1)℃]1 h,空白组大鼠不作冰浴处理;1星期后,将弗氏完全佐剂(Complete Freund's Adjuvant,CFA,美国Sigma公司)注射至大鼠右侧后足爪足跖皮下(0.1 mL/只),继续置于同样实验环境中3 d,建立实验性关节炎痛痹模型。

1.3 检测指标

1.3.1 足跖肿胀

本研究在造模前、造模后、治疗3 d后、治疗7 d后分别检测各组大鼠的足跖肿胀度。以容积测定法测定CFA大鼠足跖肿胀度。以大鼠足跖掌侧毛际处作为浸入水中的标记线,固定大鼠,将足爪浸入足跖容积测量仪内,测量并记录大鼠足跖部浸入水中的体积(mL)。造模后不同时期测定的足跖体积与造模前测定的足跖体积之间的差值即为足跖肿胀度。

1.3.2 机械痛阈

采用动态足底测量仪检测各组实验大鼠造模前、造模后、治疗3 d后、治疗7 d后4个时间点的患侧缩腿阈(PWTs)作为大鼠机械痛阈的指标。测量前,实验大鼠适应环境2 d;测量时,待大鼠安静后,将类似Von Frey丝的金属丝(直径0.5 mm)置于大鼠患侧足底中央,以2.5 g/s的速率递增,直至引发大鼠逃逸反应(缩腿),这时仪器显示的数字为大鼠的 PWTs,最大刺激力量50 g;连续测量4次,每次间隔3 min,取平均值。

1.3.3 热疼痛缩足阈潜伏期

采用足底测试仪检测造模前、造模后、治疗 3 d后、治疗7 d后4个时间点各组实验大鼠足底对红外热刺激的反应。测量前,大鼠适应性训练2 d。测量时,待大鼠安静后,聚焦红外光源于动物足底(32I.R.intensity),按下开关,等待动物缩回受测爪,仪器自动记录红外光强度和持续时间(以 s计),即为热疼痛缩足阈潜伏期。连续测量3次,每次间隔3 min,取平均值。

1.4 统计学方法

应用SPSS13.0软件进行统计学处理,数据以均数±标准差表示。方差齐性者,采用单因素方差分析,方差不齐者,比较采用非参数检验和Dunnett-t检验。均以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 研究结果

2.1 不同疗法对寒痹模型大鼠足跖肿胀度的影响

采用足跖容积测量法检测各组大鼠造模前、造模后、治疗3 d后、治疗7 d后的足跖肿胀度。由表1可见,与空白组比较,造模后、治疗3 d后和治疗7 d后各组足跖肿胀度明显增高,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)。治疗7 d后,中药组大鼠足跖仍明显肿胀,消炎痛组和艾灸组与中药组比较明显下降,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)。

表1 不同疗法对寒痹模型大鼠足跖肿胀度的影响 (s,mL)

表1 不同疗法对寒痹模型大鼠足跖肿胀度的影响 (s,mL)

注:与空白组比较1)P＜0.05;与中药组比较2)P＜0.05;与模型组比较3)P＜0.05

组别 n 造模前 造模后 治疗3 d后 治疗7 d后空白组 10 0.79±0.05 0.92±0.04 1.09±0.04 1.08±0.04模型组 9 0.81±0.04 1.41±0.081) 1.65±0.131) 1.49±0.081)消炎痛组 9 0.82±0.05 1.48±0.201) 1.61±0.231) 1.46±0.171)2)中药组 9 0.84±0.06 1.53±0.091) 1.73±0.101) 1.69±0.091)3)艾灸组 9 0.84±0.04 1.53±0.161) 1.63±0.151) 1.52±0.101)2)

2.2 不同疗法对寒痹模型大鼠机械痛的影响

本研究采用机械痛阈测量法检测了各组大鼠造模前、造模后、治疗3 d后、治疗7 d后的机械痛。由表 2可见,在造模前,各组机械痛组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。造模后,各组机械痛明显高于空白组,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)。治疗3 d后,与模型组比较,中药组和艾灸组明显增高,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05),中药组明显高于消炎痛组和艾灸组,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)。治疗7 d后,与模型组比较,消炎痛组、中药组和艾灸组明显增高,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05),其中中药组明显高于消炎痛组,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

表2 不同疗法对寒痹模型大鼠机械痛的影响 (s,g)

表2 不同疗法对寒痹模型大鼠机械痛的影响 (s,g)

注:与空白组比较1)P＜0.05;与同组造模前比较2)P＜0.05;与中药组比较3)P＜0.05;与模型组比较4)P＜0.05

组别 n 造模前 造模后 治疗3 d后 治疗7 d后空白组 10 9.75±1.49 10.39±1.40 9.89±2.34 10.23±3.02模型组 9 9.70±1.38 4.46±0.971) 4.45±1.361)2) 5.15±1.671)2)消炎痛组 9 9.63±2.94 4.40±1.111) 5.76±0.671)2)3) 7.61±1.201)3)4)中药组 9 9.89±1.00 4.75±0.821) 8.85±1.731) 10.36±0.924)艾灸组 9 9.10±2.30 3.49±1.061)3) 6.67±1.091)2)3)4) 8.58±1.534)

2.3 不同疗法对寒痹模型大鼠热痛的影响

由表3可见,造模后,各组热疼痛缩足阈潜伏期明显低于空白组,组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05)。治疗3 d后显示,与模型组比较,消炎痛组的缩足阈潜伏期明显增高,组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05),中药组和温灸组有增高趋势。治疗 7 d后,消炎痛组大鼠的缩足阈潜伏期仍明显高于模型组(P＜0.05),中药组和艾灸组大鼠有与治疗3 d后比较有进一步增高趋势。

表3 不同疗法对寒痹模型大鼠热痛的影响 (s)

表3 不同疗法对寒痹模型大鼠热痛的影响 (s)

注:与空白组比较1)P＜0.05;与同组造模前比较2)P＜0.05;与中药组比较3)P＜0.05;与模型组比较4)P＜0.05

组别 n 造模前 造模后 治疗3 d后 治疗7 d后空白组 10 14.67±5.02 14.62±4.15 14.62±3.53 17.04±2.87模型组 9 15.15±2.77 5.61±1.871) 7.29±1.101)2) 9.84±1.741)2)消炎痛组 9 13.94±5.24 4.00±2.071) 12.25±3.341)3)4) 14.09±2.751)3)4)中药组 9 14.49±2.90 3.20±0.881) 9.16±2.541)2) 11.38±2.291)艾灸组 9 13.16±4.16 4.29±1.531) 9.09±1.551)2) 11.26±2.071)

3 讨论

痹证是指人体肌表和经络感受风、寒、湿、热等诸邪,引起以肢体关节及肌肉酸痛、麻木、重着、屈伸不利,甚至关节肿大、灼热等为主要表现的一类病证。《金匮翼·痹证统论》:“痛痹者,寒气偏胜,阳气少,阴气多也。夫宜通而塞则为痛,痹之有痛,以寒气入经而稽迟,注而不行也。”寒痹的主要病机为人体营卫气血失调,寒湿外邪侵入人体,注于经络,留于关节,痹阻气血而发病[1]。寒为阴邪,其性凝滞,主收引,血气受寒,凝而留聚;湿性属阴,其性重浊粘滞,阻碍气机,故以“寒则温之”为基本治则。附子桂枝汤以附子为君药,补命门真火,祛风寒湿邪,辅以桂枝、白芍、细辛等温通而不伤阴,达到温经散寒、除湿通络的治疗作用[2]。大椎和命门艾灸,补督脉元阴元阳,以温阳、祛寒、止痛。

以往对针灸治疗炎症性疼痛的研究多从对炎症介质的控制着手,认为针灸通过炎症局部前炎症细胞因子的干预达到抗炎镇痛作用[3,4]。研究证实,艾灸能明显抑制实验性关节炎症疼痛模型炎症局部组织的炎症过程和炎性细胞的分泌功能,改善其炎性病理形态,减轻关节滑膜的炎性细胞浸润、滑膜细胞增生,减轻炎症肿胀[5]。但是本研究中发现,消炎痛、中药和艾灸3种方法对寒痹大鼠的足跖肿胀度均无明显干预,其中中药组大鼠的肿胀更为严重,我们认为这可能与本研究的寒痹模型有关,我们将在后续工作中进一步验证,以明确三种疗法在治疗炎性疼痛时的适应证。

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