利用植物性添加物防治番茄根结线虫病的研究

海飞，崔小伟

（1.河南农业职业学院，郑州，451450；2.河南省农科院植保所）

植物寄生线虫（Phytoparasitic nematode）中以根结线虫为害最为严重，广泛分布于世界各地。我国热带、亚热带及寒带地区温室蔬菜都有根结线虫病发生，尤其是在一些南方省份，根结线虫病已成为经济作物生产的严重障碍，特别是长期连作的田块。目前，植物根结线虫主要采用化学防治方法，但是广泛、大量和长期地使用化学农药易造成农药残留、虫害的抗药性增强等问题。因此，从植物材料中开发符合环保、健康和持续发展理念的高效、低毒和低残留的植物源杀线剂已成为当今农药研究的热点之一。

本研究通过室内盆栽试验、田间小区试验和田间示范应用，系统考察了一种由多种中草药材料混合而成的新型植物源线虫速杀剂对番茄根结线虫病的防治效果，为替代或减少高毒性、高残留杀线剂，提高农产品的质量安全提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

①供试植物 在调查和鉴定根结线虫病时，主要根据河南重要经济作物的种植分布以及各地的生态条件，选择沿黄地区自东向西的开封、中牟、郑州、许昌、洛阳、三门峡等地进行病样采集。主要采集茄科中的烟草、番茄、茄子根结线虫进行调查。

番茄种子由河南省农科院植保所提供。将准备好的番茄种子用55℃温水浸种25 min或用高锰酸钾1 000倍液浸种20 min后，再用清水淘洗2遍，滤去多余的水分；将吸足水分的种子盛于培养皿中，用湿纱布盖好，置于25～30℃的培养箱中催芽，每天用温水淘洗种子1～2次；经2～3 d，当多数种子露白时播于育苗盘中，待长到5～6片真叶时，挑选长势一致的植株用于试验。

用于田间小区试验和田间示范试验的番茄分别种植于河南农业职业技术学院科教园区自然发病田和洛阳农科院的根结线虫病病圃内。生产管理同当地正常生产。

②供试试剂、仪器及药剂 试验所用试剂均为进口或国产分析纯，所用仪器均为实验室常用试验仪器设备。供试药剂为15%植物源线虫速杀剂可湿性粉剂（河南农业大学提供），5%线敌颗粒剂（寿光双星农药厂生产），无线美（英国OMEX农用流体公司生产并提供，纯天然物质提取），肯邦线尊（泰山现代农业科技有限公司生产，5%阿维菌素颗粒剂），治线宝（山东寿光宜东肥料厂生产并提供，生物菌），15%铁灭克（涕灭威）颗粒剂（市售）。施药方法均为移栽时一次性穴施，施药量为推荐剂量。

③供试线虫 盆栽试验接种用的供试线虫由河南农业大学植物保护学院植物病理研究室采自田间番茄根结线虫发病植株。接种于感病的番茄植株，采用活体繁殖方法扩繁。将采自田间的病株病根切碎和病土按1∶3的体积比与无病土混匀待用。

1.2 试验方法

①番茄根结线虫病的发生程度调查方法 在番茄移栽后90 d左右采取5点取样法进行调查。

田间生长期番茄根结线虫病严重度分级标准、病株率、根结指数的计算参照行业标准（YC/T 39-1996）进行。收获期根结严重度的分级标准如下，0级∶根部正常，无可见根结；1级∶1/3以下根上有少量根结；2 级∶1/3～1/2 根上有根结；3 级∶1/2 以上根上有根结，少量根结上再次产生根结；4级∶几乎所有根上长满根结，甚至根结连接成团块状。

根结指数=[∑（各级植株数×相应级值）/（调查总株数×4）]×100。

②根结线虫病病原种类鉴定方法 a.根系组织内根结线虫的检查。采用酸性品红染色法，检查病株根系内线虫的存在，结果在所有发病根系中均发现了大量根结线虫的雌虫及卵块，以及少量的雄虫。雌虫为囊状、洋梨形或柠檬形；雄虫均为线形。

b.根结线虫雌成虫会阴花纹特征的种类鉴定。标本的采集与保存∶采用5点取样法，将根系连同一定的根际土壤装入自封袋中，贴上标签，带回实验室后直接分离和挑取线虫，或接种在消毒土种植的番茄苗上待用。

会阴花纹玻片的制作∶将带根结线虫的根用自来水洗净，置培养皿中加水挑取雌成虫。然后移置45%的乳酸中切成方形的会阴花纹，每载玻片上放置5个，调整在一条线上，用甘油作浮载剂，盖上盖玻片后用Znt胶封固，制成永久玻片，显微镜下观察和照相。

根据资料报道，常见4个种的会阴花纹特征简述如下。M.incognita（南方根结线虫）∶有明显高的背弓，无明显的侧线，一些线纹在侧面分叉。M.exigua（M.incognita acrita）（南方根结线虫 1号小种，曾用名为高弓根结线虫）∶会阴花纹平滑至波浪形，弓形完好。M.arenaria（花生根结线虫）∶背弓扁平至圆形，背弓线纹平滑至波浪状，线纹在侧线处稍有分叉，弓上线纹呈肩状凸起，背部线纹与腹部线纹在侧线处相交成角度。M.javanica（爪哇根结线虫）∶背弓圆，有明显的双侧线。M.hapla（北方根结线虫）∶会阴花纹呈近圆形的六边形至扁平的卵圆形，尾端区有刻点。

雄虫∶从根中分离出雄虫后用热TAF液杀死，然后用TAF液作浮载剂，Znt胶封固制成半永久玻片，以备观察和照相。

二龄幼虫∶将卵块放在装有清水的培养皿中，置于培养箱中（25～28℃）孵化，将幼虫用热TAF液杀死后，用TAF液作浮载剂，Znt胶封固制成半永久性玻片，以供观察。

③盆栽试验 a.供试植物材料的准备。将采自田间的病株病根切碎连同病土按V/V=1/3的比例与无病土混合均匀，装入营养钵中，将长至5～6片真叶的番茄苗移栽至营养钵中，每钵1株，同时进行药剂处理。

b.药剂处理与试验设计。试验共设置6个药剂处理，667 m2使用剂量分别为植物源线虫速杀剂2 kg，线敌 1.8 kg、无线美 100 mL、肯邦线尊 3 kg、治线宝20 kg、铁灭克 0.9 kg，另设不施药处理作对照（CK），每个重复4株，每个处理4次重复。分别称取试验所需药量与细土充分拌匀，穴施于接种根结线虫的营养钵中，其中无线美用清水稀释后，浇灌于营养钵中，植株定植后，覆土浇透水。

c.调查内容与方法。分别于番茄移栽后30 d左右（发病初期）、90 d（线虫病高峰期间）调查番茄植株根结线虫病的病株率和病情指数。根据病株率、病情指数或根结指数分别计算相对防效，并利用SPSS软件对数据进行Duncan氏检验。

④小区试验 a.药剂处理与施药方法。试验在中牟温室大棚中进行。小区试验药剂处理同盆栽试验，采用随机区组设计，每个处理4次重复，每个重复不少于200株。

施药时分别称取试验所需药量与细土充分拌匀，在番茄移栽时穴施，其中无线美用清水稀释后，浇灌于定植穴中。

试验地番茄的栽培管理按照常规进行，但不施用供试药物之外的任何杀虫剂或杀线剂。

b.调查内容与方法同盆栽试验。

⑤示范应用 a.药剂处理与试验设计。示范地点设在河南农业职业学院科技园番茄田中，具有根结线虫病严重发病史。示范药剂667 m2的使用剂量分别为植物源线虫速杀剂2 kg、肯邦线尊3 kg、铁灭克4 kg，另设空白对照（CK）。每个处理面积不少于 1 333.3 m2，空白对照面积不少于 667 m2，随机排列，但不设重复。

试验地番茄的栽培管理按照常规进行，但不施用供试药物之外的任何杀虫剂或杀线剂。

b.调查内容与方法。于番茄移栽（药剂处理）后90 d（发病高峰期）调查根结线虫病的病株率和病情指数。采收结束后拔根调查根结指数，调查方法同盆栽试验。

2 结果与分析

2.1 盆栽试验

由表1可知，植物源线虫速杀剂对番茄根结线虫具有十分显著的防治效果，平均防效最高可达到75.33%，和其他药剂防效存在极显著差异，在降低番茄发病高峰期（移栽后90 d）根结指数方面效果最为显著，对发病初期（移栽后30 d）的病株率也有一定的降低作用。在供试的6种药物中，以植物源线虫速杀剂防效最为突出，铁灭克效果次之，线敌、无线美和治线宝效果中等，而以阿维菌素（肯帮线尊）效果最差。

表1 不同药剂处理对盆栽番茄根结线虫防治效果

2.2 小区试验

由表2可知，在所有供试药剂中以植物源线虫速杀剂防治番茄根结线虫病效果最为显著，在移栽后 30 d，防效达到 69.54%，和其他药剂之间存在极显著差异；在移栽后90 d，防效仍可达到68.87%。由此可见，植物源线虫速杀剂在控制番茄根结线虫病发病高峰期的病情指数方面效果较为突出，可有效降低番茄根结线虫病发病初期的发病率和发病高峰期的根结指数。在供试的其他几种药剂中，铁灭克防效略低于植物源线虫速杀剂，线敌、治线宝和无线美防效中等，而以阿维菌素（肯邦线尊）效果最差，防效最高仅为24.92%。

表2 不同药剂处理对小区番茄根结线虫的防治效果

2.3 示范应用

由表3可知，2009-2010年连续2 a的田间示范试验结果与小区试验结果相似，无论在番茄正常生长期还是根结线虫病发病高峰期，植物源线虫速杀剂均表现出十分显著的防病效果，移栽后90 d和采烤末期的平均相对防效分别为79.54%和73.46%，防效极显著优于化学杀线剂铁灭克以及生物杀线剂肯帮线尊（阿维菌素），值得在生产上进一步推广应用。

表3 植物性添加物防治番茄根结线虫病示范应用效果

3 结论

植物源线虫速杀剂能有效防治番茄根结线虫病。室内盆栽试验和田间小区试验均表明，植物源线虫速杀剂对番茄根结线虫具有十分显著的防效，最高平均防效可达到75.33%，和其他药剂之间存在极显著差异，在降低番茄发病高峰期根结指数方面效果最为显著，对降低发病初期的病株率也有一定的作用，且极显著优于其他几种供试药剂；田间示范应用试验结果表明，在移栽后90 d和采烤末期，植物源线虫速杀剂平均相对防效分别为79.54%和 73.46%，极显著优于其他药剂，值得在生产上进一步推广应用。