原因不明习惯性流产患者绒毛共刺激分子B7-1和B7-2的表达水平变化

荣博会 刘影 张国华 方芳 张文真

近年来，国内外对原因不明习惯性流产病因的研究取得了很大进展，其病因十分复杂，涉及遗传、内分泌、免疫学机制、解剖和感染等诸多因素，已有研究证明80%的原因不明习惯性流产与免疫学机制有关［1，2］，其中淋巴细胞亚群及其相关细胞因子与原因不明习惯性流产关系更是目前研究的新热点。研究发现辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)比值失衡与原因不明习惯性流产有密切关系［3］。但导致其失衡的原因和机制尚不清楚，B7-1，B7-2是B7家族中重要的共刺激分子，有研究表明，B7家族介导的免疫应答反应参与T淋巴细胞的活化［4］。有关B7-1，B7-2在原因不明习惯性流产患者绒毛中表达的研究尚未见报道。本文运用流式细胞技术，首次检测原因不明习惯性流产患者绒毛B7-1、B7-2表达水平变化。

1 资料与方法

1．1 一般资料 选取2011年1至12月我院就诊的原因不明习惯性流产患者20例(流产组)，年龄22～45岁，平均年龄31．4岁。正常早孕孕妇15例(正常妊娠组)，年龄21～36岁，平均年龄29．1岁。

1．2 仪器与试剂 Epics-XLII型流式细胞仪，鼠抗人FITC-B7-1、PE-B7-2及阴性对照均购自美国Becton Dickinson公司。

1．3 检测方法 将2组流产术后绒毛组织机械碾碎，用贴壁法制备单个巨噬细胞悬液。取单细胞悬液1×106个/ml，加入鼠抗人FITC-B7-1、PE-B7-2单克隆抗体及FITC-IgG及PE-IgG各0．1 ml，洗涤、离心，设本底对照和阴性对照。采用流式细胞仪计数10 000个巨噬细胞中B7-1和B7-2阳性细胞百分比。

1．4统计学分析应用SPSS 17．0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

流产组绒毛组织中B7-1的表达高于正常妊娠组(P＜0．05);流产组绒毛组织中B7-2的表达百分比低于正常妊娠组(P ＜0．05)。见表1。

3 讨论

胚胎是一半同种移植物，妊娠成功有赖于胎儿-母体间免疫平衡，表现为妊娠免疫耐受。正常妊娠是一种“Th2现象”［5，6］，即趋向于 Th2 型细胞因子参与的免疫耐受，而偏离Th1型细胞因子参与的免疫损伤。原因不明习惯性流产的发生是Th1型细胞因子参与的免疫损伤，但导致其Th1现象的原因和机制尚不清楚。

表12组绒毛B7-1、B7-2表达水平比较%，±s

表12组绒毛B7-1、B7-2表达水平比较%，±s

注:与正常妊娠组比较，*P ＜0．05

B7-1 B7-2流产组(n=20) 11．8 ±1．4* 36．2 ±1．9组别*正常妊娠组(n=15) 10．2 ±1．1 38．9 ±4．4 P值0．001 0．017

B7-1，B7-2是B7家族是重要的共刺激分子，它们参与Th细胞的调节。本研究发现，原因不明习惯性流产患者绒毛组织中APC表面B7-2的表达低于正常妊娠女性，B7-1的表达高于正常妊娠女性，上述变化可能导致了Th细胞表达白细胞介素(IL)-2及IL-2受体，表现为免疫排斥，损害妊娠，使机体发生了原因不明习惯性流产。

综上所述，我们认为原因不明习惯性流产孕妇存在B7-1，B7-2异常，推测B7-1，B7-2异常可能促进了原因不明习惯性流产发生。我们期望B7-1，B7-2异常的现象，能为原因不明习惯性流产治疗提供新的思路。

1 Beydoun H，Saftlas AF．Association of human leucocyte antigensharing with recurrent spontaneous abortions．Tissue Antigens，2005，65:123-135．

2 Ksouri H，Zitouni M，Achour W，et al．Recurrent pregnancy loss related to immune disorders．Ann Med Interne(Paris)，2003，154:233-247．

3 邱丽华，林其德，洪燕，等．原因不明习惯性流产患者主动免疫前后T辅助细胞1、2型细胞因子变化的研究．中华妇产科杂志，2001，36:408-410．

4 Alegre ML，Fallarino F．Mechanisms of CTLA-4-Ig in tolerance induction．Curr Pharm Des，2006，12:149-160．

5 阎华，王爱华，王华芝，等．肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-10在反复自然流产患者母胎界面及绒毛组织中淋巴细胞的表达．生殖医学杂志，2003，12:232．

6 Makhseed M，Raghupathy R，Azizieh F，et al．Th1 and Th2 cytokine profiles in recurrent aborters with successful pregnancy and with subsequent abortions．Hum Reprod，2001，16:2219．