生物发光菌在锦州市废水检测中的应用

锦州市环境监测站 鲍士海

目前，检测企业废水排放状况的手段多采用理化指标。理化指标有单一性的缺陷。而企业废水对环境的污染是以综合毒性体现的，利用测定发光菌生物毒性，即可表征企业废水的综合毒性，同时又避免了生物毒理实验时间长的缺点。本文，笔者利用发光菌对锦州市部分企业废水进行了生物毒性测试，同时进行理化指标测试，将二者进行对比，结果表明，完全可以利用发光菌来检测企业废水排放状况。

一、材料

发光菌冻干粉和DXY-2型生物毒性测定仪（中科院南京土壤所），HgCl2分析纯，微量进样器。

二、方法

1.配制参比毒物标准液。以HgCl2为参比毒物，用3%NaCl作为溶剂，配制HgCl2母液，浓度为2 000 mg/L。

2.发光菌冻干粉复苏。从冰箱中取出发光菌冻干粉安瓿瓶和2%NaCl溶液，用1.0 mL注射器向发光菌冻干粉安瓿瓶中加入1 mL冷的2%NaCl溶液，充分混匀。在发光菌测试管中加入2 mL3%NaCl溶液，再用微量进样器加入10 μl复苏发光菌液，放入生物毒性测试仪中测定，若发光量大于800 mv，可用于测试。

3.测试方法。将参比毒物管或样品管与对照管CK（3%NaCl溶液）一一对应，按顺序排列，用微量进样器每隔15 s分别加入10 μl复苏菌液，从加第一支测试管开始精确计时，15 min后，按加菌液顺序依次测定其发光度，并按下式计算其相对发光度T（%）。

三、水样采集与予处理

1.水样采集。为了使采集的水样有充分的代表性，分行业、分类型，共采集了五家国控、省控企业排放废水。

2.水样予处理。混浊的水样过滤成清液，以备测试，用HCl或NaOH调整水样PH值在7左右，消除酸碱影响。

三、结果与分析

1.发光菌相对发光度与HgCl2浓度关系曲线。配制HgCl2系列溶液，浓度分别为 0.04，0.08，0.10，0.12，0.16，0.20 mg/L，按1.2.3测定方法分别测定其发光度，测定结果见表1。

建立HgCl2浓度（C）与其相对发光度T（%）均值的相关方程T=A+B*C*HgCl2，经 计 算 A=96.5，B=-415 得 出 方 程 T=96.5-415C*HgCl2，T为相对发光度，C为HgCl2浓度，r=-0.995 4，P＜0.01，Ec50HgCl2=0.119 9。由此可见，发光菌相对发光度与HgCl2浓度呈显著的线性相关。

2.用发光菌测定企业废水的生物毒性。将采集的废水按三.2节方法予处理，之后按二.3节方法测定其发光度，测定结果见表2。用生物毒性等级用表3来评价。

3.企业废水的理化指标测试。其结果见表4。

4.分析。由表2及表4可以看出，石油六厂和中策啤酒厂均属于低毒级，且理化指标也达到排放标准，说明这两厂家排放的废水对环境的污染是低的，其余三家（铁合金厂，锦州六四一厂，国营华光电子管厂）的理化指标有多项不符合排放标准，同时他们的毒性级别为剧毒级，说明了这三家排放的废水对环境的污染是严重的。生物毒性与理化指标显示了高度的一致性，其中铁合金厂的总铬，六四一厂的总铬、Cu，华光电子管厂的Cu超标排放均很严重，而且重金属对环境的污染都是很严重的。研究表明，用发光菌毒性实验的方法能够很好地在数据中表现出废水污染环境的综合效应。

表1 Hg Cl2系列溶液发光菌相对发光度

表2 各厂家废水的发光菌测定值

表3 发光菌测定水质毒性的分级标准

表4 各厂家测定的理化指标