江苏省淮安市猪乙型脑炎血清学调查

蒋法成 陈树霞 蒋锁俊 孙 浩 范 磊

（1江苏省淮安市动物疫病预防控制中心，江苏省淮安市 223001；2江苏省淮安市清浦区动物卫生监督所，江苏省淮安市 223002）

日本乙型脑炎（Japanese B Encephalitis，JE）简称乙脑，是由日本乙型 脑 炎 病 毒 （Japanese B Encephalitis virus，JEV）引起的一种重要的人兽共患传染病。乙脑病毒可致怀孕母猪流产、产死胎，可致公猪睾丸炎[1]，可致仔猪出现神经症状，给养猪业造成巨大经济损失。

为了解淮安猪场乙脑的免疫状况及野毒感染情况，为乙脑综合防控提供科学依据，2012年5月笔者应用ELISA试验对全市12个规模猪场共246份血清样品进行了抗体监测。现将监测情况报告如下。

1 材料与方法

1.1 血清样品

被检猪血清样品共246份，于2012年3月采自淮安市各县区的12个规模猪场，样品有关信息参见表1、表2。

1.2 检测试剂和仪器

1.2.1 试剂

猪乙脑酶联免疫吸附试验 （ELISA）试剂盒为武汉科前动物生物制品有限责任公司生产，生产批号为120101，购自江苏力通生物技术有限公司。

1.2.2 仪器

酶标仪：Rayto，RT－6000，深圳雷杜生命科学股份有限公司生产；移液器：Biohit，芬兰百得实验仪器 （苏州）有限公司生产；洗板机：KHB，ST－36WT，上海科华实验系统有限公司生产。

1.3 检测方法

按试剂盒说明书进行。 主要步骤如下： （1）1∶40的体积稀释待检血清（195μL样品稀释液中加入 5μL待检血清）、1∶40的体积分别稀释阳性对照和阴性对照血清 （234μL样品稀释液中加入 6μL对照血清）；（2） 取抗原包被板，将稀释好的待检血清和对照血清各取 100μL加入到抗原包被板，置37℃温育 30分钟；（3）洗板，加入稀释好的洗涤液200μL/孔，静置 3分钟，拍干，共洗涤5次；（4）每孔加酶标二抗 100μL， 置 37℃温育 30分钟； 洗涤 5次，方法同上；（5）每孔先加底物A 液 50μL、 再 加 底物 B 液 50μL 混匀，室温避光显色 10分钟；（6）每孔加终止液 50μL，10分钟内用 630nm波长测定结果。

1.4 判断标准

试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630nm值≥0.6，阴性对照孔平均OD630nm值＜0.3。 当样品 OD630nm值＞0.32时为猪乙脑抗体阳性，样品OD630nm值≤0.32时为阴性。

2 检测结果

2.1 淮安市猪场乙脑抗体水平监测总体情况

淮安市猪场乙脑抗体水平监测总体情况见表1。

2.2 不同猪场乙脑抗体水平情况

不同猪场乙脑抗体血清阳性率的检测结果见表2。

3 讨论

3.1 监测结果分析

淮安市12个规模猪场的不同猪群的乙脑抗体监测结果表明，在246份血清样品的检测中，免疫的母猪血清阳性率平均为 70.59% （表1），其中免疫较好的种猪场抗体阳性率为100% （表2），具备整齐的免疫水平。涟宏猪场的经产母猪抗体阳性率只有20%，经调查该场截止采样时与上次免疫时间已有12个月。未免疫猪群血清阳性率平均为21.83% （表1）。免疫猪群与未免疫猪群相比，血清阳性率平均值差异极显著 （P＜0.01）。

未免疫猪群之间抗体阳性率参差不齐，由最低为0到最高的100%不等（表2）。说明各猪场由于种猪来源不同、饲养环境不同、管理水平不同等原因，导致猪群乙脑感染率不同。

由表1可以看出未免疫的后备母猪和经产母猪其阳性率分别为35.09%和40%，而育肥猪和仔猪分别为18.89%和12.5%，母猪和育肥猪及仔猪的JEV抗体阳性率差异极显著 （P＜0.01）。

3.2 感染原因分析

猪、马、牛、羊、家禽和野鸟都可感染日本乙型脑炎病毒，马最易发病，人次之，其它家畜多为隐性感染，这些带毒动物在病毒血症阶段都可成为传染源。

乙脑主要通过蚊虫叮咬而传播，库蚊 （尤以三带喙库蚊）、伊蚊和按蚊都可成为该病的传播媒介。病毒能在蚊子体内繁殖和越冬，并可经卵传代，带毒越冬的蚊子能成为次年感染人畜的传染源，因此，蚊不仅是传染媒介，也是病毒的储存宿主[1]。

该病有明显的季节性，主要在夏秋季节流行，与蚊虫的孳生有关。猪是JEV的重要保毒动物，而感染JEV的蚊子可将该病传给人。因此有效控制猪群中发生JE，具有重要的公共卫生意义。

3.3 防控对策

为了控制JEV的区域流行，应加强猪乙脑的免疫接种，并且进行有效的灭蚊活动。尤其对于曾经发生过乙脑或JEV隐性感染较严重的猪场 （包括种猪场和商品猪场），应将乙脑疫苗纳入常规免疫程序，以防止暴发猪乙脑，并可有效控制该病在人群中的流行[2,3]。在乙脑流行地区，应对猪场的工作人员进行乙脑疫苗接种，以保护易感人群的安全 [4]。

对规模猪场以及散养户定期开展猪乙脑抗体监测，当生猪抗体水平较低时，应及时强化免疫。加强养殖场的规范化建设和管理，控制乙脑流行区的畜禽运往非流行区。蚊虫是本病的主要传播媒介，防蚊灭蚊是预防乙脑的有效措施。坚持自繁自养，必须要引进种猪时应加强检疫，病原学检测 （如PCR）为阴性方可引进。

表1 淮安猪场乙型脑炎监测总体情况

表2 不同猪场乙脑抗体血清阳性率的检测结果

[1]蔡宝祥主编.家畜传染病学.北京：农业出版社，1980：165－170.

[2]靳兴军，韩磊，纪蔚红，等.北京市猪乙型脑炎血清流行病学调查.中国兽医杂志，2008，44（8）：51－52.

[3]杨丽君，邓治邦，曹庸，等.湘西发生猪日本乙型脑炎. 中国兽医杂志，2003，39（1）：32－33.

[4]Yamanaka A,Mulyatno K C,Susilowati H,et al.Prevalence of Antibodies to Japanese Encephalitis Virus among Pigs in Bali and East Java，Indonesia，2008.Japanese journal of infectious diseases，2010，63（1）：58－60.