HIV（1＋2）抗体／P24抗原联合法与胶体硒法在临床检测HIV中的应用研究

杨晓亮，詹廷西，李 青，张国珍

（重庆医科大学附属第一医院输血科 400016）

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）破坏人体免疫功能，最终导致获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），即艾滋病。由于AIDS的治疗没有特效药以及HIV疫苗研制的失败，AIDS病死率相当高，已成为本世纪严重威胁人类健康的病毒性疾病之一［1－3］。目前最有效的手段仍以预防为主，能否对HIV感染做出快速、准确的诊断是阻止其流行扩散的关键。检测HIV的酶联免疫吸附测定（enzyme－linked immunosorbent assay，ELISA）试剂经历了4代发展［4－5］。目前第4代HIV诊断试剂是利用P24蛋白氨基酸顺序高度保守这一特性，在第3代试剂基础上加入了P24抗原检测系统，可同时检测血清或血浆中的HIV（1＋2）抗体与P24抗原，使诊断窗口期与第3代ELISA检测试剂相比平均缩短4d。本院从2010年9月开始使用第4代HIV诊断试剂，现将其与胶体硒法、Western blot的检测结果进行比较，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集本院2010年9月至2011年7月住院患者的静脉血标本51 433例，其中，男27 532例，女23 901例。

1.2 主要试剂与仪器 第4代ELISA诊断试剂购自北京科卫临床诊断试剂有限公司，胶体硒试剂由Inverness Medical Japan Co.，Ltd.提供，Western blot试剂由重庆市疾病预防控制中心提供；汇松洗板机和TECAN酶标仪（Sunrise）由重庆恩鸣医疗设备有限公司提供。

1.3 检测方法 用进口胶体硒试剂和国产第4代HIV（1＋2）及P24抗原联合检测ELISA试剂盒对每一份标本进行初检，操作严格按照试剂说明书进行。2种试剂均阴性，判为阴性；其中1种试剂阳性或2种试剂均阳性，判为初筛阳性；初筛阳性标本送重庆市疾病预防控制中心进行Western blot确证试验。

2 结 果

2.1 住院患者的HIV检测 采用第4代ELISA试剂检测HIV抗体，阳性结果192例；胶体硒检测，阳性结果164例。将上述可疑阳性的标本送重庆市疾病预防控制中心采用Western blot进行确诊，结果阳性153例，不确定15例，阴性24例。ELISA试剂、胶体硒及 Western blot 3种方法检测HIV的阳性率分别为0.37%、0.32%及0.30%。对15例Western blot检测不能确定的标本进行分析：第4代ELISA试剂和胶体硒试剂均阳性5例；第4代ELISA试剂检测HIV阳性，而胶体硒检测HIV阴性8例；第4代ELISA试剂检测阴性，而胶体硒检测阳性2例。第4代ELISA试剂的HIV漏检率（1.3%）低于胶体硒试剂（4.9%）。对24例 Western blot检测结果为阴性的标本进行分析：第4代ELISA试剂和胶体硒试剂均阳性1例；第4代ELISA试剂检测阳性，胶体硒检测阴性18例；第4代ELISA试剂检测阴性，胶体硒检测阳性5例。第4代ELISA试剂的假阳性率（0.03%）高于胶体硒试剂（0.01%），并且18例ELISA假阳性的患者中，男6例，女12例，男女比例为1∶2；妇科和产科患者7例，约占38.9%。见表1。

表1 第4代ELISA试剂的18例假阳性结果分析

3 讨 论

近年来，HIV感染和AIDS的发病率迅速增加，形势严峻［6］。在没有特效药和疫苗的情况下，尽早准确检测出 HIV感染已成为人们关注的焦点。P24蛋白是HIV病毒颗粒的主要结构蛋白，在病毒的包装和成熟过程中发挥重要作用，其氨基酸序列在HIV各毒株之间高度保守，缺失P24会导致病毒无法正常组装［7］。在HIV感染早期，病毒大量复制而产生抗体极少时，第3代ELISA试剂是不能满足临床需要的［8］。通过检测血清或血浆P24抗原，可以将“窗口期”缩短，此时HIV抗体尚为阴性［9－10］。目前，ELISA试剂已经发展到 HIV（1＋2）抗体与P24抗原联合检测阶段。

本研究将所使用的第4代ELISA试剂、胶体硒试剂和Western blot进行初步比较，一方面，第4代ELISA试剂检测HIV的假阳性率高于胶体硒法，而其与Western blot确证试验的阳性一致率明显低于胶体硒法与Western blot确证试验的阳性一致率，也有文献报道与本研究结果一致［11］。在24例Western blot确证阴性病例中，18例为第4代ELISA试剂检测HIV假阳性，妇科和产科7例，约占38.9%，是否该科室患者血清中某种物质与第4代ELISA试剂发生交叉反应导致较高的假阳性率，还有待进一步观察研究。另一方面，第4代ELISA试剂检测 HIV的漏检率（1.3%）低于胶体硒法（4.9%）。15例Western blot检测不确定的样本中，胶体硒法检测结果呈阳性者少于第4代ELISA试剂检测结果呈阳性者，后者具有很好的初筛作用。这一特性，决定了第4代ELISA试剂适于大批量筛查［12－13］。并且国产第4代ELISA试剂盒实际应用的敏感性和特异性与进口第4代ELISA试剂盒相差不大［14］。

综上所述，HIV（1＋2）抗体与P24抗原联合检测为一种操作简单、经济、省时高效的实验方法，但缺点是假阳性率高；而胶体硒试剂检测漏检率高，二者联合使用可以互相弥补不足，为临床提供快速、准确的信息，在疾病的早干预、早治疗，降低输血感染风险，估计发病率等方面具有重要意义［15］。

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