非小细胞肺癌患者血清TNF-α水平变化及其临床意义

郭宇玲，孙 哲，吴 薇

（南昌大学第一附属医院肿瘤科，南昌 330006）

肺癌是我国常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类健康，目前研究认为肺癌的形成是一个多阶段、多步骤、多基因参与的过程，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在恶性肿瘤的发生、发展过程中起重要作用，TNF-α可直接杀伤肿瘤细胞、诱导细胞凋亡、介导肿瘤溶解，刺激细胞增殖、促进肿瘤血管生成、激活基质降解酶，有利于肿瘤浸润和转移、增强肿瘤细胞的活性，具有广泛的诱导炎症和免疫调节功能。肿瘤细胞可激活单核细胞且肿瘤细胞具有自分泌功能从而使恶性肿瘤患者血清TNF-α升高［1-2］。本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定不同分期非小细胞肺癌患者血清中TNF-α的水平，探讨不同分期非小细胞肺癌患者血清中TNF-α水平的变化及其临床意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2008—2009年南昌大学第一附属医院收治的初治非小细胞肺癌患者60例（肺癌组），男48例，女 12 例，年龄 38～82 岁，平均（59.2±13.2）岁，均经影像学及病理学确诊，未行放化疗及手术治疗，其中鳞癌38例、腺癌22例，Ⅰ＋Ⅱ期 14例、Ⅲa期17例、Ⅲb＋Ⅳ期 29例。选择同期在本院体检健康者62例为对照组，男45例，女17例，年龄32～70岁，平均（56.5±9.6）岁，X 线检查排外肺部疾病。2组一般资料相比差异无统计学意义（P＞0.05），具可比性。

1.2 主要试剂与仪器

人TNF-αELISA试剂盒（北京晶美生物工程有限公司）；JA1003电子天平（上海精科天平厂）、电热恒温干燥箱（上海跃进医疗器械厂）、超低温冰箱（Sanyo，Japan）等。

1.3 研究方法

1）标本采集:受试者均于清晨、空腹时采集外周静脉血标本2 mL。

2）标本处理:静脉血自然凝固后，分离血清，-70℃保存待测。

3）ELISA法测定血清TNF-α水平:将试剂盒与标本平衡至室温→配置洗涤液、标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液→取出板条、加样、孵育→洗板5次→加入生物素化抗体工作液、孵育→洗板5次→加入酶结合物工作液、孵育→洗板5次→加入显色剂→加入终止液，混匀后即刻测量OD450值→绘制标准曲线，并通过标本的OD值在标准曲线上查出浓度。

1.4 统计学方法

2 结果

2组血清TNF-α水平比较见表1，表1结果显示:肺癌组患者血清中TNF-α水平显著升高,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.001）。不同病理类型肺癌患者血清TNF-α水平比较见表2，表2结果显示:不同病理类型肺癌患者血清TNF-α水平差异不明显，腺癌与鳞癌相比差异无统计学意义（P＞0.05）。不同临床分期肺癌患者血清 TNF－α水平比较见表3，表3结果显示:随着病情进展,肺癌患者血清TNF－α水平有逐渐增高的趋势，各临床分期肺癌患者血清 TNF－α水平相比差异均有统计学意义（P＜0.05 或 P＜0.001)。

表1 2组血清TNF－α水平比较 ，ρ／（ng·L-1）

表1 2组血清TNF－α水平比较 ，ρ／（ng·L-1）

*P＜0.001与对照组相比。

组别 n TNF－α 水平对照组 62 75.39±35.45肺癌组 60 242.21±116.97*

表2 不同病理类型肺癌患者血清TNF－α水平比较 ，ρ／（ng·L-1）

表2 不同病理类型肺癌患者血清TNF－α水平比较 ，ρ／（ng·L-1）

病理类型 n TNF－α水平腺癌 22 266.11±130.00鳞癌 38 228.49±109.61

表3 不同临床分期肺癌患者血清TNF－α水平比较 ，ρ／（ng·L-1）

表3 不同临床分期肺癌患者血清TNF－α水平比较 ，ρ／（ng·L-1）

*P＜0.001与Ⅰ＋Ⅱ 期相比；﹟P＜0.05与Ⅲa期相比。

临床分期 n TNF－α水平Ⅰ＋Ⅱ 期 14 125.48±48.92Ⅲa期 17 236.84±89.05*Ⅲb ＋Ⅳ期 29 308.08±116.80*﹟

3 讨论

TNF-α是迄今发现抗肿瘤作用最强的细胞因子。TNF-α生物学作用与其水平的关系密切，低水平TNF-α可增强机体免疫力，TNF-α水平升高可致免疫力降低，内稳态失衡，并引起一系列病理损伤［3-4］。TNF-α水平与恶性肿瘤有相关性，正常情况下人体分泌少量TNF-α；当机体患恶性肿瘤时，血清TNF-α水平明显升高，而肿瘤得到有效控制后TNF-α水平则呈下降趋势；TNF-α高表达与某些肿瘤晚期恶病质有关；TNF-α表达水平的高低与某些恶性肿瘤临床分期及某些肿瘤细胞分化程度有关［5-7］。

本研究结果显示，肺癌患者血清TNF-α水平明显高于对照组，且随分期发展，其水平逐渐升高，这表明，血清TNF-α水平检测对肺癌的辅助诊断、疾病分期及活动情况有重要意义；不同病理类型间相比，血清 TNF-α 水平无明显差异，这与文献［7］报道一致。肺癌患者体内高水平的TNF-α并没有表现出抑制或杀灭肿瘤的效应,这可能与TNF-α影响机体免疫力、促进肿瘤血管生成及肿瘤转移有关；另一个可能的原因是肿瘤细胞表面缺乏与TNF-α相结合的TNF受体。

［1］Bastürk B,Yavascaoglu I,Vuruskan H,et al.Cytokine gene polymorphism as potential risk and protective factors in renal cell carcinoma［J］.Cytokine，2005,30（1）:41-45.

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［4］王俊杰，李忠钢，杨建良，等.肿瘤患者血清TNF-α变化的临床意义［J］.中国肿瘤临床与康复，1999，6（3）:15.

［5］Seynhaeve A L，de Wilh J H，van Tiel S T，et al.Isolated limb perfusion with actinomycin D and THF-alpha results in improved tumor reponse in soft tissue sarcomabearing rats but is accompanied by sever local toxicity［J］.Br J Cancer，2002，86（7）:1174-1179.

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［7］吕俊杰，戴天阳，詹福生，等.食管癌患者血清 CEA和TNF-α 的水平和意义［J］. 放射免疫学杂志，2004，17（5）:350-351.