植烟土壤中吡嘧磺隆和苯噻酰草胺残留量的同时检测与分析

易丽君 ，龚道新，陈 金，张素芳

（1.湖南农业大学烟草工程技术研究中心，湖南 长沙 410128；2.桃源县烟草专卖局，湖南 常德 415700；3.湖南农业大学农业环境保护研究所，湖南 长沙 410128）

吡嘧磺隆和苯噻酰草胺是目前应用较为广泛、使用比较安全的除草剂，同时也是生产除草混剂较好的原料药品。采用高效液相色谱法分别测定分析这两种农药单剂的研究已有报道，而且单独测定的方法成熟、简便、易操作，但同时检测分析这两种农药的研究却未见报道。为了同时检测分析土壤中吡嘧磺隆和苯噻草胺混合颗粒剂的残留，特以植烟土壤为材料进行高效液相色谱分析，分析效果较为理想。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

仪器：HP1100 型高效液相色谱仪（HPLC），SHY-2AS 水浴恒温振荡器，TP-220A 电子天平，SHZ-D（III）循环水式真空泵，RE-2000A 型旋转浓缩仪，玻璃层析柱（长20 cm，直径1.5 cm），梨形抽滤瓶，具塞三角瓶，量筒，250 mL 分液漏斗，布氏漏斗，容量瓶，移液管，滴定管，玻璃棒等常用实验仪器。

试剂：弗罗里硅土（用前在650℃下烘3～5 h，冷却后以2%蒸馏水脱活，保存在130℃的烘箱中，备用），二氯甲烷、冰乙酸，甲醇、无水硫酸钠、氯化钠等，以上试剂均为分析纯级别。

1.2 试验方法

1.2.1 药品检测 （1）样品的制备。在未施用过吡嘧磺隆和苯噻草胺农药的植烟土壤中随机采10 个点取0～15 cm 的耕作层土壤约500 g，去除植物根系及砾石等非土壤部分，混合均匀后过10 目筛，按四分法留样300 g，盛装在洁净的封口塑料袋中，置于-20℃条件下冷冻保存。（2）提取。准确称取已制备好的土壤样品20.0 g，置于250 mL 具塞三角瓶中，加入80 mL 甲醇，并加入适量冰乙酸调节pH值至5～6，在水浴恒温（25℃）振荡器中振荡30 min，经布氏漏斗减压抽滤，再用甲醇洗涤残渣和抽滤瓶2 次（30 mL/次），合并抽滤液无损转入250 mL 具塞三角瓶中，在旋转蒸发仪上浓缩近干，转入盛有20 mL 10%NaCl 溶液的250mL 分液漏斗中，再分别用二氯甲烷30 mL，30 mL，20 mL 连续萃取3 次，合并二氯甲烷萃取液，在旋转蒸发仪上浓缩近干，用5 mL 二氯甲烷和甲醇的混合液（1∶1，v∶v）溶解，待弗罗里硅土层析柱净化。（3）净化。弗罗里硅土（Florisil）层析柱从下至上依次装填有少许脱脂棉、2 cm 厚无水硫酸钠、5 g 弗罗里硅土、2 cm 厚无水硫酸钠，在装柱的过程中要敲紧敲实，在层析柱装好后，先用20 mL 二氯甲烷和甲醇的混合液（1∶1，v∶v）预淋，再将上述提取浓缩液无损移入弗罗里硅土净化柱中，用70 mL 二氯甲烷和甲醇的混合液（1∶1，v∶v）淋洗（每次5 mL 左右），收集淋出液，于旋转蒸发器上浓缩近干，再用色谱甲醇定容至5.0 mL，待HPLC 检测。（4）液相色谱检测。液相色谱柱：150 mm×4.6 mm，Cl8 不锈钢色谱柱；检测波长：240 nm；流动相为甲醇∶水∶冰乙酸的混合液（70∶30∶0.3，v∶v∶v）；流速：0.6 mL/min；柱温：30℃；进样量：20 μL；检测运行时间：14 min。

1.2.2 标准曲线绘制 采用梯度稀释法配制吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的浓度分别为0.05、0.10、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L 的标准工作溶液，在上述选定的HPLC 条件下检测，测定出各浓度的标准工作溶液所对应色谱峰的峰面积。然后以标准工作溶液的浓度（X，mg/L）与所对应的色谱峰的峰面积（Y）绘制标准工作曲线。

1.2.3 添加回收率试验 在植烟土壤空白对照样品中分别添加吡嘧磺隆的标准溶液，使样品中吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的浓度分别为0.05、0.10、1.00 mg/kg，每个处理重复5 次，按上述所选定的分析方法及检测条件进行样品的分析与检测，

2 结果和讨论

2.1 标准曲线

从图1 和图2 可知：当药品浓度在0.05～2.00 mg/L 范围内变化时，吡嘧磺隆和苯噻酰草胺标准工作溶液的浓度与其所对应的色谱峰的峰面积之间呈良好的线性关系，经分析得到吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的回归方程式分别为：Y=115.84 x+0.970 8；Y=152.05 x-0.177 9，相关系数均为0.999 9，达到了极显著水平。这表明该检测方法可满足定量分析吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的要求。

图1 吡嘧磺隆的标准曲线

图2 苯噻酰草胺的标准曲线

2.2 最小检出量和最小检验浓度

试验结果表明：在所选定的液相色谱分析条件下，吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的最小检出量为：1.0×10-9g，最小检出浓度为：1.25×10-2mg/kg。

2.3 添加回收率试验

从表1 可知：当添加浓度为0.05、0.10、1.00 mg/kg 时，吡嘧磺隆在土壤中的添加回收率在82.15%～97.12%之间，平均回收率为84.00%～95.32%，相对标准偏差为1.39%～1.55%；苯噻酰草胺在土壤中的添加回收率在81.11%～101.15%之间，平均回收率为84.47%～98.53%，相对标准偏差为0.85%～3.50%。结果表明吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的添加回收率和相对标准偏差均在农药残留试验准则允许的范围内，这说明所选定的方法符合农药残留量分析与检测的技术要求。

表1 吡嘧磺隆和苯噻酰草胺在植烟土壤中的添加回收试验

2.4 仪器检测条件的选择

苯噻酰草胺和吡嘧磺隆混剂在分别中性、弱碱性和弱酸性条件下的检测情况显示：在弱碱性条件下基本无峰；在中性条件下检测峰形拖尾，苯噻酰草色谱峰与吡嘧磺隆色谱峰相距较近、不易分离，且线性关系不理想；在弱酸性条件下检测峰较为理想。

3 讨 论

研究并建立了采用高效液相色谱同时测定吡嘧磺隆·苯噻酰草胺混剂的分析方法，该方法有抗干扰能力强、操作简易、准确度和灵敏度较高等特点。当添加浓度为0.05～1.00 mg/kg 时，吡嘧磺隆在土壤中的添加回收率在82.15%～97.12%之间，相对标准偏差为1.39%～1.55%；苯噻酰草胺在土壤中的添加回收率在81.11%～101.15%之间，相对标准偏差为0.85%～3.50%；该方法测定植烟土壤中残留的吡嘧磺隆和苯噻酰草胺，其最小检出浓度均为1.25×10-2mg/kg。综上所述，说明该方法能有效检测植烟土壤中的吡嘧磺隆和苯噻酰草胺残留，可推广应用于其他类型土壤的农残检测。

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