骨髓间质干细胞治疗急性脑梗死患者60例

詹三华 张鲁峰 姚卫民 杨明辉 宋晓玲 (武警河南总队医院神经内科，河南 郑州 450052)

脑梗死治疗后存活者多数遗留瘫痪、言语不清等严重功能障碍，进一步恢复极其困难。因此，如何积极有效地在急性期恢复神经功能是促进痊愈、减少残疾的关键，是治疗重点。近年来干细胞移植在治疗脑梗死的基础与临床研究取得了较好效果〔1〕，给脑梗死治疗带来了突破性进展。本研究重点观察自体骨髓干细胞移植治疗急性脑梗死(ACI)的疗效及安全性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010年1月至2010年12月我院神经内科住院的ACI患者120例，分为观察组60例，男32例，女28例，年龄40～76(平均57.5)岁，发病时间(1.5±1.1)d;对照组60例，男35例，女25例，年龄41～75(平均57.3)岁，发病时间(1.5±1.2)d;两组性别、年龄、病情轻重程度、病程分布均衡，无显著差异，具有可比性。均符合2000年全国脑血管病专题研讨会修订的ACI诊断标准，发病72 h以内，并行头颅CT及MRI检查确诊为颈内动脉系统脑梗死，且患者无意识障碍。

1.2 治疗方法 观察组在常规治疗基础上，于发病后第1周内，取自体骨髓150～200 ml，进行骨髓细胞分离，分离出的骨髓间质干细胞(BMSCs)(图1)分成2份，其中1份干细胞当天应用，另外1份干细胞进行体外定向培养扩增7 d后应用，应用方式为通过腰椎穿刺注射到蛛网膜下腔(图2)。对照组给予常规药物治疗，同时配合康复锻炼。

1.3 疗效评定及预后评估 分别在治疗前、治疗后半个月及1个月进行Barthel指数(BI)评分和中国脑卒中评分(CSS)。BI评分:0～20分极严重残疾;25～45分严重残疾;50～70分中度残疾;75～95分轻度残疾;100分为正常。CSS评分:0～15分轻度神经功能缺损，16～30分中度缺损，31～45分重度缺损。

1.4 统计学处理 计数资料用Ridit检验，计量资料以±s表示，组间比较用t检验。

2 结果

两组在治疗半个月后日常生活能力BI评分即有显著改善(P＜0.01);治疗后1个月，两组BI评分增加，观察组BI评分明显优于对照组(P＜0.01)。两组治疗后半个月CSS评分均有所下降，两组差异显著(P＜0.01);治疗后1个月，CSS评分均有所下降，两组差别显著(P＜0.01)。见表1。观察组鞘内注射患者术后无明显不适，定期复查血尿常规、肝肾功能、头颅CT及MRI较前无明显异常。

表1 两组治疗前后BI、CSS评分比较(± s，n=30)

表1 两组治疗前后BI、CSS评分比较(± s，n=30)

与治疗前比较:1)P＜0.01;与对照组比较:2)P＜0.01

组别 BI治疗前 治疗后 半个月CSS治疗前 治疗后 半个月观察组 34.71±7.62 68.25±6.511)2) 77.02±22.621)2) 25.31±6.21 15.21±4.241)2) 11.13±6.251)2)对照组 35.23±6.51 53.21±5.741) 61.12±15.101) 24.64±8.15 19.41±5.211) 16.67±5.431)

图1 培养7 d后BMSCs(×200)

图2 BMSCs经腰穿移植蛛网膜下腔

3 讨论

近年来，脑梗死患者在脑卒中单元接受超早期溶栓、脑神经营养、脑保护药物及康复理疗、护理等措施取得明显效果，但存活者仍有50%～70%遗留肢体瘫痪、言语不清等严重功能障碍，因此，在急性期积极有效地促进脑缺血区恢复神经功能是促进疾病痊愈、减少残疾的关键，是治疗的重点。

干细胞具有很强的自我复制能力、多项分化潜能、自我更新能力、对损伤和疾病反应能力。多项动物脑缺血模型实验中，BMSCs移植在急性期应用，脑缺血区域有移植后神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞标志蛋白表达，神经功能均明显恢复〔2～4〕。所以，在脑梗死急性期于神经功能损伤区补充外源性干细胞对促进神经功能恢复有重要意义。外源性干细胞可能通过重建受损神经元回路、释放递质或分泌多种神经营养因子、减轻脑卒中诱导的炎症反应、诱导血管形成起作用〔5〕。多项研究显示，干细胞具有旺盛的分泌能力，能分泌多种神经生长因子、脑源性神经营养因子、胶质细胞系神经营养因子等，可以对神经干细胞的活性、神经细胞轴突生长起显著作用，从而改善临床症状〔6，7〕。从临床观察看，患者移植后短期内临床症状改善应该是干细胞的营养作用发挥的结果。

本研究结果表明，联合干细胞移植治疗较常规治疗能明显促进患者肌力、肌张力、语言、智力等恢复，并降低致残率，提高患者生活质量，安全可靠，未发现毒副作用。但本次研究样本量小，远期疗效尚无结论。干细胞移植在脑梗死急性期应用尚属于探索阶段，其应用指征、途径、干细胞纯化程度、应用数量、远期疗效等有待于临床上进一步更大样本研究。

1 Hennemann B，Ickenstein G，Sauerbruch S，et al.Mobilization of CD34+hematopoietic cells colony-forming cells and long-term culture-initiating cells into the peripheral blood of patients with an acute cerebral ischemic insult〔J〕.Cytotherapy，2008;10(3):303-11.

2 Zhao LR，Duan WM，Reyes M，et al.Human bone marrow stem cells exhibit neural phenotypes and ameliorate neurological deficits after grafting into the ischemic brain of rats〔J〕.Exp Neurol，2002;174(1):11-20.

3 Li Y，Chen J，Zhang CL，et al.Gliosis and brain remodeling after treatment stroke in rats with marrow stromal cells〔J〕.Glia，2005;49(3):407-17.

4 Wang L，Li Y，Chen X，et al.MCP-1，IL-8 and ischemic cerebral tissue enhance human bone marrow stromal cell migration in interface culture〔J〕.Hematology，2002;7(2):113-7.

5 叶丽莎，白 雪.神经干细胞移植治疗缺血性脑卒中研究新进展〔J〕.现代诊断与治疗，2010;21(1):38-40.

6 Lu P，Jones LL，Snyder EY，et al.Neural stem cells constitutively secrete neurotrophic factors and promote extensive host axonal growth after spinal cord injury〔J〕.Exp Neural，2003;181(2):115-29.

7 Pluchino S，Quattrini A，Brambilla E，et al.Injection of adult neurospheres induce recovery in a chronic model of multiple sclerosis〔J〕.Nature，2003;422(6933):688-94.