尿液有形成分定量分析方法学探讨

张秋菊 贾莉婷 王丹

尿液有形成分分析是尿液常规检查中的重要组成部分，是临床诊断疾病和病程评估的重要依据。随着科技的发展，尿液有形成分分析的检测水平不断提高。在实践中，不同的检测方法在识别和计数各种有形成分时与标准方法的测定结果存在一定差异。笔者采用AVE-763B、UF-1000i、不离心镜检法3种方法对不同尿液标本进行检测，比对这两种机器性能，探讨差异的原因，寻找更准确方法。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择门诊及住院患者324人份新鲜尿液标本(经人工显微镜确定挑选异常标为主)。

1.2 方法 采用AVE-763B全自动尿有形成分分析仪、UF-1000i全自动尿沉渣分析仪、KOVA尿液定量计数板镜检法，分别测定尿液中有形成分(红细胞、白细胞、管型)。患者留取晨尿，留取标本前清洗尿道口，采集后2 h内完成检测。仪器法测定，严格按仪器说明书操作步骤进行操作。

1.3 参考范围依据 UF-1000i参考范围：红细胞≤28个/μl，白细胞≤28个/μl。AVE-763B参考范围：红细胞≤7个/μl，白细胞≤14个/μl。不离心镜检法：红细胞≤7个/μl，白细胞≤14个/μl。考虑目前尿液有形成分没有统一定量参考范围，本实验以全国6个城市(北京、长沙、南昌、武汉、杭州、西安)的9家医院对健康人群调查所得尿液有形成分参考范围为依据[1]。

2 结果

通过AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪、UF-1000i全自动尿沉渣分析仪、不离心定量计数板镜检法3种方法对324例尿液标本测定，结果以不离心镜检法为金标准进行统计。见表1、表2。

表1 白细胞对照结果分析表 例

表2 红细胞对照结果分析表 例

对白细胞AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪与不离心镜检法的符合率为94.75%，UF-1000i与其符合率为89.81%。对红细胞AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪与不离心镜检法的符合率为90.12%，UF-1000i与其符合率79.32%。

3 讨论

尿液有形成分分析是尿液分析中不可缺少的重要内容。尿液分析对泌尿系统疾病、肾脏疾病、循环系统疾病及感染性疾病等有重要的诊断及鉴别诊断意义，也是临床用药检测、健康普查的一项重要手段。

3.1 对尿液中红细胞的鉴别 对红细胞AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪与不离心镜检法的符合率为90.12%，UF-1000i 与其符合率为79.32%。其中不离心镜检为阳性而UF-1000i阴性的有27例，AVE-763B阴性10例，有10例UF-1000i测定结果与AVE-763B、不离心镜检法检测结果相差显著，笔者认为尿液中红细胞有多种形态，特别是肾性红细胞，可呈环形、盔形、椭圆形、多边形、芽胞形、小型固缩形等多种形态，增加了仪器判读鉴别的难度。有文献报道制备红细胞悬液进行对比分析符合率较高[2]，笔者认为因制备红细胞形态接近正常，易于机器辨认。

3.2 尿液中白细胞的鉴别 对白细胞AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪与不离心镜检法的符合率为94.75%，UF-1000i与其符合率为89.81%。在尿液中，白细胞形态变化受尿液渗透压和酸碱度的影响较大，由于炎症程度的加重发生变性而出现形态改变，内部结构崩解，体积膨胀，边缘不清，白细胞常聚集成团，称浓细胞，再加上小圆上皮细胞和逆行上皮细胞体积与膨胀变性的白细胞在显微镜下的形态特点非常相近，故仪器容易误判。

3.3 尿液中管型的鉴别 对分析的324例尿液标本，AVE-763B经“人工辅判”后检测出管型11例，UF-1000i检测出管型65例，不离心镜检法检测出管型10例。UF-1000i对管型的测定假阳性率高，测定结果也明显高于不离心镜检法，实际临床检验工作中发现黏液丝，上皮细胞对管型检测结果有明显干扰[3]。而AVE-763B经人工辅判后和不离心镜检法比较接近。

3.4 显微镜检测技术 尿液中红细胞、白细胞的显微镜检测技术，目前国内外尚无统一标准，主要有离心镜检、不离心镜检及倒置显微镜镜检法。有文献报道，不离心镜检法直接计数尿红细胞、白细胞，能较真实地反映尿中红细胞、白细胞浓度，接近真值[4]。

3.5 AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪、全自动尿沉渣分析仪UF-1000i检测原理 全自动尿沉渣分析仪UF-1000i检测原理是对尿液标本染色后，利用流式技术和电阻抗原理，以荧光、散射光和电阻抗的信号技术识别计数红细胞、白细胞、上皮细胞、细菌、结晶等[5]，由于尿液有形成分复杂，有时受干扰物质影响会产生假阳性或假阴性。AVE-763B全自动尿液有形成分分析仪利用“机器视觉”技术，实现显微镜检识别全自动化。通过摄像头自动地在低倍镜下对大量的尿液标本中各种有形成分进行扫描，计算机自动准确定位后，再在高倍镜下对所采集的有形成分图像进行分析、处理、并与已建立的各种有形成分的模型数据库进行对比分析，计数红细胞、白细胞、结晶等定量结果[6]。对分析的324例尿液标本，UF-1000i有11例(红细胞9例，白细胞2例)测定结果明显高于不离心镜检法。镜检确认由草酸钙结晶、非晶型盐类结晶、真菌、精子、细菌等因素引起。AVE-763B有7例因结晶、真菌、精子、黏液丝等因素影响细胞计数结果，可通过软件“人工辅判”功能直接对图像分析进行审核报告，纠正不必要的错误信息。对细胞浓度过高的标本，如肉眼血尿和脓血尿，AVE-763B、UF-1000i测定结果与不离心镜检法计数结果相差较大(仪器测定值比镜检法要低)，应将标本稀释后再进行检测。

综上所述，经“人工辅判”AVE-763B测定白细胞、红细胞、管型与不离心镜检法的检测结果优于其他类型仪器。还应指出，镜检是形态学检查的金标准，仪器分析细胞仍存在许多局限性。在产生疑问时，仍需显微镜检确诊，决不能不加分析作为确诊依据。

[1] 丛玉隆，马骏龙，岳秀玲，等.中国健康人群尿液显微镜检测法有形成分结果调查[J].临床检验杂志，2006，24(2)：81-84.

[2] 丛玉隆，马俊龙，张时民，等.尿液细胞成分定量分析方法学研究[J].中华检验医学杂志，2006，29(3):211-214.

[3] 郭慧，王萍等.干化学法UF-1000i尿沉渣分析仪检测结果与手工法检查的一致性观察[J].实用医技杂志，2011，18(2):168-169.

[4] 丛玉隆，马骏龙.尿沉渣测定四种方法参考值范围调查[J].中华检验医学杂志，1997，20(4):229-231.

[5] 张时民.实用尿液有形成分分析技术[M].北京:人民卫生出版社，2008:148-151.

[6] 丛玉隆.现代尿液分析技术与临床[M].北京:人民军医出版社，2007:162-164.