漾濞泡核桃青皮中脂溶性成分的GC-MS分析

李寅珊，李冬梅，刘 熙，刘光明

大理学院药学院有机药化教研室，大理 671000

漾濞泡核桃又名漾濞核桃、茶核桃、铁核桃，是胡桃科(Juglandaceae)胡桃属(Juglans)植物，主要分布于云南、贵州、四川西部及西藏雅鲁藏布江下游［1］。青龙衣是漾濞泡核桃(Juglans sigillata D.)同属植物胡桃(Juglans regia D.)和胡桃楸(Juglans mandshurica M.)未成熟果实的外皮。据《中华本草》记载，青龙衣味苦、涩，性平。归肝、脾、胃经。具有止痛、止咳、止泻、解毒、杀虫等功效。中医主要用其治疗脘腹胀痛、痛经、久咳、泄泻久痢、痈肿疮毒、顽癣、秃疮、白癜风等症［2］。现代药理学研究显示，青龙衣具有消炎镇痛、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗植物病毒、杀虫等生物活性［3-8］。化学成分研究表明，青龙衣主要含有醌及其苷类、黄酮类、脂肪醇类、鞣质类、生物碱类及强心苷类物质［9］。云南漾濞是漾濞泡核桃的主要产区之一，种植面积高达100万亩，年产3万余吨。每年采收后有数万吨青皮废弃于山野田间造成环境污染，如果可对其加以利用，不但能防止环境污染、避免资源浪费，还可变废为宝增加当地收入。本实验采用GCMS技术对漾濞泡核桃青皮脂溶性成分进行了研究与分析，以期为漾濞泡核桃青皮的后续研究和应用提供参考。

1 仪器与材料

漾濞泡核桃青皮于2011年10月采集于云南省漾濞县，由大理学院生药教研室周浓副教授鉴定，标本(DLXY-LGMZ-2011-10-26)保存在大理学院药学院。分析仪器为美国 Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS气相色谱-质谱联用仪。BUCHI Rotavapor R-210型旋转蒸发仪。甲醇、正己烷等化学试剂均为天津化学试剂公司分析纯产品。

2 实验方法

2.1 样品制备

称取干燥的漾濞泡核桃青皮0.6 kg，粉碎后用2000 mL甲醇连续回流提取1h，回收溶剂得提取物28.0 g。提取物经水分散后用正己烷萃取，正己烷萃取物经微孔滤膜过滤，回收溶剂至干得4.0 g样品，密封备做GC-MS。

2.2 气相色谱-质谱联用仪分析条件

2.2.1 气相色谱条件

HP-5MS石英毛细管柱(30 m ×0.25 mm，0.25 μm);柱温80℃，程序升温5℃/min，至260℃;柱流量1.0 mL/min;进样口温度250℃;柱前压100 kPa;进样量 0.6 μL;分流比 10∶1;载气为高纯氦气。

2.2.2 质谱条件

电离方式EI，电子能量70 eV，传输线温度250℃，离子源温度230℃，四级杆温度150℃;质量范围35～500;采用wiley7n.L标准谱库检索定性，同时利用面积归一法从总离子流图中计算各成分的相对百分含量。

3 结果与分析

通过GC-MS分析，并利用 wiley7n.L标准谱库检索定性，同时采用面积归一法从总离子流图中计算各成分的相对百分含量，得到漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的总离子流图，70 min内共分离出72个峰，鉴定出了其中55个组分的化学结构。由分析结果可知 β-谷甾醇 (18.68%)、4-乙基金刚烷酮(12.07%)、二十九烷 (9.04%)、二十七烷(7.43%)、棕榈酸(7.45%)、十八碳二烯酸(4.60%)、α-生育酚(3.53%)等是漾濞泡核桃青皮脂溶性成分中的主要组分。漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的化学组成及含量如表1所示。

表1 漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的组成及百分含量Table 1 The Fat-soluble components detected in the green rind of J.Sigillata

24 27.92 十七烷酸 n-Heptadecanoic acid C17H34O2 0.42% 96%25 28.47 十八碳二烯酸甲酯(亚油酸甲酯)(Z，Z)-9，12-Octadecadienoic acid methyl ester C19H34O2 0.67% 99%26 28.94 植醇 Phytol C20H40O 1.05% 90%27 29.27 十八碳二烯酸(亚油酸)Linoleic acid C18H32O2 4.60% 98%28 29.75 十八烷酸(硬脂酸)Octadecanoic acid C18H36O2 1.46% 99%29 30.21 二十二烷 n-Docosane C22H46 0.90% 93%30 32.04 二十三烷 n-Tricosane C23H48 0.67% 93%31 32.36 2，6，10-三甲基-2，9-十一烷二烯-4-酮 2，6，10-Trimethylundecan-2，9-dien-4-oneC14H24O 0.89% 30%32 32.75 三十一碳烯醇 18-Nonadecen-1-ol C31H62O 0.26% 87%33 33.03 4，8，12，16-四甲基十七-4-内酯 4，8，12，16-Tetramethylheptadecan-4-olide C21H40O2 0.59% 70%34 33.68 二十四烷 Tetracosane C24H50 0.74% 99%35 34.20 二十二烷醛 Octadecanal C22H44O 0.60% 74%36 35.28 二十五烷 n-Pentacosane C25H52 1.85% 99%37 35.80 二十三烷醛 Octadecanal C23H46O 0.50% 86%38 36.11 二十六碳烯 1-Hexacosene C26H52 0.44% 86%39 36.84 二十六烷 Hexacosane C26H54 1.51% 94%40 37.47 二十四烷醛 1，21-Docosadiene C24H48O 0.49% 98%41 38.70 二十七烷 Heptacosane C27H56 7.43% 99%42 39.46 萝芙碱 Ajmaline C20H26N2O2 0.52% 87%43 39.89 环二十八烷 Cyclooctacosane C28H56 0.61% 83%44 40.88 二十八烷 Octacosane C28H58 2.18% 93%45 41.22 角鲨烯 Squalene C30H50 1.13% 93%46 41.89 二十六烷醛 Octadecanal C26H52O 0.77% 91%47 42.93 2-(＇2-苯并呋喃)-3-苯基-1H-吲哚 2-(＇2-benzofuryl)-3-phenyl-1H-Indole C22H17NO 0.57% 47%48 43.23(E，3aR，5S，6aR，11bS)-5-［1-(羟甲基)丙烯基］-7-(甲酰氧基-2，3，3a，4，5，6，6a，7-八氢-1H-吡咯［2，3-d］咔唑(E，3aR，5S，6aR，11bS)-5-［1-(Hydroxymethyl)propenyl］-7-(methoxycarbonyl)-2，3，3a，4，5，6，6a，7-octahydro-1H-pyrrolo［2，3-d］carbazole C20H26N2O3 0.15% 72%49 43.76 二十九烷 n-Nonacosane C29H60 9.04% 95%50 45.35 3，4-二氢-2，8-二甲基-2-(4，8，12-三甲基十三烷基)-2H-1-苯并呋喃-6-醇 C27H46O2 2.01% 99%51 47.04 三十烷 n-Triacontane C30H62 0.62% 95%52 48.73 β-生育酚 β-Tocopherol C28H48O2 0.93% 97%53 51.37 三十一烷 Hentriacontane C31H64 1.11% 94%54 53.14 α-生育酚 Vitamin E C29H50O2 3.53% 99%55 63.70 β-谷甾醇 β-stigmasterol C29H50O 18.68% 99%

4 讨论

通过GC-MS和wiley7n.L标准谱库检索，漾濞泡核桃青皮脂溶性成分主要含有脂肪烃(26.66%)、甾体(18.68%)、脂肪酸(10.67%)、不饱和脂肪酸(5.03%)、脂肪醛(2.75%)、不饱和脂肪烃(1.72%)及脂肪酸酯(1.34%)等类物质。其中，含量较高的β-谷甾醇、棕榈酸、亚油酸等物质研究应用较为广泛。β-谷甾醇不仅具有抗癌、抗炎、镇痛、降脂、降血糖、抗氧化等药理活性［10-13］，亦是合成一些降脂药、口服避孕药的原料［12，14］。作为一种从植物中分离的到得天然成分，β-谷甾醇不仅对害虫杀灭能力强，且毒副作用较小，是制造农药比较理想的原料［15］。棕榈酸广泛存在于自然界中，几乎所有油脂中都含有数量不等的棕榈酸。其不仅是人体重要的产能脂肪酸，在人体脂肪代谢中起着重要的作用［16］，也是第一种从脂肪生成中产生的脂肪酸，可以由它产生更长的脂肪酸及其他工业原料。因此，棕榈酸在化工、建材、化妆品、制药、食品等多个行业皆有应用。随着生活水平的提高，人们逐渐意识到在日常食用的油脂中添加一些不饱和脂肪酸更有利于健康。研究表明，共轭亚油酸不但能防止动脉粥样硬化、调节机体免疫、抗氧化、降血脂、改善骨组织代谢，而且许多共轭亚油酸具有较好的抗肿瘤活性。目前国内外对其抗肿瘤活性的研究报道也较多［17-19］。由此证明，漾濞泡核桃青皮具有一定的开发利用价值。

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