联合检测CD146与P-选择素对2型糖尿病肾病的意义

王锋，汪年松，高许萍，范瑛

(上海交通大学附属第六人民医院肾脏科，上海200233)

联合检测CD146与P-选择素对2型糖尿病肾病的意义

王锋，汪年松，高许萍*，范瑛

(上海交通大学附属第六人民医院肾脏科，上海200233)

目的探讨2型糖尿病肾病患者外周血CD146与P-选择素表达的意义。方法选取2型糖尿病患者80例与正常对照20例，分为正常组(Non-DM)、糖尿病无肾病组(DN0)、微量蛋白尿组(DN1)、大量蛋白尿组(DN2)与肾功能不全组(DN3)，每组20例。用ELISA法检测外周血CD146与P-选择素的表达水平。结果DN0组患者外周血CD146表达[(319.6±15.9)ng/ml]与P-选择素水平[(57.9±3.1)ng/ml]明显高于对照组[(243.5±14.7)ng/ml和(45.3±2.7)ng/ml]，两组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。DN1，DN2，DN3三组的CD146与P-选择素水平高于DN0组，差异有统计学意义(P＜0.05)。DN1，DN2，DN3三组的CD146水平分别为(415.3±29.0)ng/ml、(486.6± 34.3)ng/ml、(515.9±36.9)ng/ml，P-选择素水平分别为(66.8±3.4)ng/ml、(79.6±4.6)ng/ml、(81.5±5.1)ng/ml。结论CD146与P-选择素水平在2型DN患者患者的表达水平随着DN进展而升高。

糖尿病肾病；CD146；P-选择素

CD146是一种近年发现的细胞粘附分子，属于免疫球蛋白超家族，可表达在内皮细胞、肿瘤细胞以及肾小管上皮细胞。CD146与粘附分子P-选择素均与内皮细胞损伤以及炎症有关，有研究提示其与肾脏疾病关系密切。本研究对2型糖尿病肾病(DN)患者的外周血CD146与P-选择素水平进行了检测，以探讨在2型DN中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2009年1月至2009年12月在我院期间就诊的2型糖尿病患者(T2DM)80例与健康对照20例，分别进行血清CD146与P-选择素水平测定。T2DM根据2003年美国糖尿病协会(ADA)制定的空腹及餐后2 h血糖标准进行诊断；DN依据2004年美国ADA制定的24 h尿白蛋白排泄率(UAER)分期及血清肌酐(Scr)标准进行诊断分组。非糖尿病对照组(Control，20例)患者，无糖尿病家族史，口服葡萄糖耐量实验(OGTT)检查结果血糖正常的本院退休职工及志愿者。所有患者均排除血液病、血栓性疾病以及服用抗凝药物。本项目获上海交通大学附属第六人民医院伦理委员会批准。

对于T2DM组，根据6个月内连续两次测定24 h尿蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)测定值，分为：①糖尿病无肾病组(DN0)20例：两次测24 h尿白蛋白排泄率(AER)＜30 mg/24 h或20µg/min；T2DM病程≥10年；②微量蛋白尿组(DN1)20例：300 mg/24 h＞AER≥30 mg/24 h或200µg/min＞AER≥20µg/min；③大量蛋白尿组(DN2)20例：两次测AER≥300 mg/ 24 h或≥200µg/min；④肾功能不全组(DN3)20例：临床蛋白尿伴两次Cr≥115µmol/L，进行替代治疗的患者不纳入研究。

1.2 检测方法CD146与P-选择素检测用ELISA试剂盒(上海闪晶生物公司提供)。空腹采血置2%EDTA抗凝试管，立即4 000 r/min离心5 min，取上清备用。其余操作步骤，遵照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法所有结果均采用均数±标准差(x-±SEM)表示，应用SAS(Version 6.04)软件分析数据，行t检验分析差异性，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

患者共80例，按照DN分期0～3期各20例，非糖尿病的正常对照组为20例。其年龄、性别比以及尿白蛋白定量、血清肌酐水平见表1。CD146与P-选择素的测定结果，见表2。

表1 一般资料比较

表1 一般资料比较

注：与DN0组和DN1组分别比较，*P＜0.05。

分组血清肌酐(μmol/L) 76±4 64±4 72±5 83±6*245±24*例数年龄(岁)性别(男/女)对照组DN0 DN1 DN2 DN3 20 20 20 20 20 59.2±2.9 61.5±2.5 64.7±2.0 66.3±1.6 67.4±2.2 10/10 13/7 7/13 12/8 14/6尿白蛋白定量(mg/24 h) 21±2 19±2 134±20 2799±440*4269±354*

表2 血清CD146与P-选择素的表达

表2 血清CD146与P-选择素的表达

注：与对照组比较，*P＜0.05，**P＞0.05。

分组对照组DN0 DN1 DN2 DN3例数20 20 20 20 20 CD146(ng/ml) 243.5±14.7 319.6±15.9*415.3±29.0*486.6±34.3*515.9±36.9*P-选择素(ng/ml) 45.3±2.7 57.9±3.1*66.8±3.4*79.6±4.6*81.5±5.1**

3 讨论

人CD146是近年发现的免疫球蛋白超家族粘附分子[1]，表达在黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞、滤泡树突网状细胞以及活化T细胞。其中CD146在内皮细胞以及T细胞的表达与免疫炎症性疾病的关系最为密切，与内皮细胞损伤有关[2-3]。Neidhart等[4]发现类风关患者关节滑液中CD146水平与病情活动呈正相关。在一些脊柱关节病与Crohn's病研究中，也有类似发现[5-6]。另有证据表明牛皮藓患者存在CD146的高表达[7]。CD146已被认为是ANCA相关的系统性血管炎等疾病的病情活动标志之一[8]。P-选择素是粘附分子选择素家族的主要成员，是血小板活化的标志，亦与内皮细胞损伤有关。

糖尿病发病日益成为终末期肾病的主要原因[9-10]，其机制复杂，近年免疫、炎症学说倍受关注[11]，认为内皮功能紊乱与糖尿病发生、发展及其并发症密切相关。作为炎症标志之一，P-选择素也参与了DN的发病[12-14]。本研究发现糖尿病患者的血浆P-选择素水平高于正常对照组，而随着DN进展，其水平越来越高。CD146在糖尿病血液中的表达水平明显高于正常人，DN的患者CD146水平随着蛋白尿增加与DN进展而相应增加。这提示P-选择素与CD146可能与DN的肾损伤有关。

作为一个新发现的细胞粘附分子，CD146可反映血管内皮功能障碍，与糖尿病、肾脏疾病的关系研究也尚少[15-16]，鉴于其配体的研究较少，其生理与病理作用研究也受到一定限制，CD146在DN的意义还有待于深入研究。

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Clinical significance of combined detection of plasma CD146 and P-selectin in patients with type 2 diabetic nephrophathy.

WANG Feng,WANG Nian-song,GAO Xu-ping,FAN Ying.Department of Nephrology,the Six People'sHospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200233,CHINA

ObjectiveTo investigate the clinical significance of CD146 and P-selectin in peripheral blood in patients with type 2 diabetic nephrophathy.MethodsA total of 80 patients with type 2 diabetes nephrophathy were randomized into the diabetes group(DN0 group),micro-albuminuria group(DN1 group),Macro-albuminuria uria group(DN2 group)and renal insufficiency group(DN3 group),with 20 cases in each group.Twenty healthy individuals were enrolled as the control group(Non-DM group).ELISA was used to detect the expression of CD146 and P-selectin.ResultsThe levels of CD146 and P-selectin in DN0 group was significantly higher than those in Non-DM group[(319.6±15.9)ng/ml and(57.9±3.1)ng/ml vs(243.5±14.7)ng/ml and(45.3±2.7)ng/ml,respectively],P＜0.05.In DN1 group,DN2 group and DN3 group,the levels of CD146 and P-selectin was significantly higher than those in DN0 group(P＜0.05).The levels of CD146 in the three groups were(415.3±29.0)ng/ml,(486.6±34.3)ng/ml and(515.9±36.9)ng/ml,respectively,and the levels of P-selectin were(66.8±3.4)ng/ml,(79.6±4.6)ng/ml and (81.5±5.1)ng/ml,respectively.ConclusionExpression of CD146 and P-selectin in patients with type 2 diabetic nephrophathy is elevated with the progression of diabetic nephropathy.

Diabetic Nephropathy;CD146;P-selectin

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.11.043

R587.2

A

1003—6350（2012）11—102—03

2012-01-09)

国家自然科学基金(编号：81100528)；上海市卫生局基金项目(编号：2008Y04)；上海交通大学附属第六人民医院青年骨干培养计划(编号：1402)，院级课题项目(编号：1086)

王锋(1977—)，山东籍，副主任医师，博士。

*通讯作者：高许萍。E-mail：gaoxuping6204@126.com