TCT和HR-HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的价值

龙华泉，陈世豪，张伟坚

(南方医科大学附属广东省江门市新会区人民医院检验科，广东江门529100)

TCT和HR-HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的价值

龙华泉，陈世豪，张伟坚

(南方医科大学附属广东省江门市新会区人民医院检验科，广东江门529100)

目的评价超薄液基细胞学(TCT)和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV-DNA)检测在宫颈癌筛查中的诊断价值。方法对2010年2月至2012年3月本院妇科门诊患者已进行TCT及HC2-HPV-DNA检测的患者687例进行研究，患者均已做宫颈病理活检，以病理活检为金标准，按≥(宫颈上皮内瘤样变)CINⅠ级为阳性，同时以HPV-DNA检测的RLU/CO比值≥1.0诊断为阳性，TCT≥ASCUS为异常，分析TCT、HPV-DNA及两者联合检测结果对宫颈活检指征的分析。结果TCT、HPV-DNA、TCT联合HPV作为诊断试验指标：灵敏度(76.5%、84.7%、72.0%)，特异性(73.6%、52.7%、80.7%)，阳性预测值(57.9%、45.1%、64.5%)，阴性预测值(86.8%、88.3%、85.6%)，诊断符合率(74.5%、62.7%、77.9%)，Kappa值(0.46、0.30、0.51)。任一单种或联合检测方法的灵敏度和特异性差异有统计学意义(P＜0.05)，TCT和HPV-DNA联合检测有较高的阳性预测值，但三者的阴性预测值差异无统计学意义，符合率和Kappa值以联合检测方法最高，可靠性最好。结论TCT联合HPV检测比HPV、TCT单一指标更有利于宫颈癌的早期筛查。

液基细胞学；高危型人乳头瘤病毒;宫颈癌；活检；敏感性；特异性

每年约有20多万女性死于宫颈癌，而在发展中国家中妇科肿瘤发病率排行榜首，其发病率日益升高并有年轻化趋势[1]。目前，超薄液基细胞学检测(Thinprep liquid based cytology test，TCT)在宫颈疾病的诊断、治疗、监测及随访等方面为临床医生提供了可靠证据，已逐步取代宫颈巴氏涂片检查，成为国内外妇产科筛查宫颈癌前病变的常规方法[2]。而宫颈癌的致病原因已有大量证据证明是由人类乳头瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)引起的[3]，作为HPV-DNA检测技术第二代杂交捕获法(Hybrid capture 2，HC2)在宫颈癌筛查中的作用已获美国FDA批准。本文收集已进行TCT、HC2、宫颈活检的患者资料，以病理活检为金标准，分析两种检测方法对宫颈癌诊疗价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料收集2010年2月至2012年3月期间到本院妇科门诊就诊的687例女性患者，年龄26～65岁，平均(42±5.6)岁，均具有宫颈炎症状，临床诊疗过程中已进行TCT、HC2、宫颈活检三项检测。

1.2 研究方法

1.2.1 TCT细胞学检查采用TCT专用毛刷取材，将宫颈管内和鳞柱上皮交界处采集的细胞涮洗在TCT专用取样瓶中，经TCT专用制片机制成薄层涂片，经巴氏染色后镜检。宫颈细胞学诊断按照国际癌症协会推荐的TBS(2001)分类标准分为正常或炎症、意义不明的不典型鳞状细胞(Atypical squamouscell，ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(Low squamous intraepithelial lesion，LSIL)、高度鳞状上皮内病变(High squamous intraepithelial lesion，HSIL)、鳞状细胞癌和腺癌(CA)。本研究将＞ASCUC定为细胞学检查阳性。

1.2.2 高危型HPV-DNA检测标本采用美国Digene公司专用采样刷在宫颈外口处逆时针旋转3周，停留10 s，得到分泌物样本置于标本保存管中，保存液容量为1 ml。标本保存在2℃～8℃环境下，检测13种高危型HPV(16、18、3l、33、35、39、45、5l、52、56、 58、59和68)，RLU/CO比值≥1.0诊断为HPV阳性。

1.2.3 病理组织活检在阴道镜指引下进行，宫颈病理学诊断以WHO(2006版)《乳腺与女性生殖系统肿瘤病理与遗传学》[4]为标准，以CIN-I及以上病变为阳性。

1.3 统计学方法应用SPSS 13.0软件处理数据，计数资料采用卡方检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 单一或联合检测与病理活检的相关性以病理活检为金标准，TCT、HPV-DNA检测判断阳性结果以前述为标准，见表1。

2.2 TCT、HPV-DAN、TCT+HPV检测指标诊断评价以表1数据对三种检测方法在宫颈癌病变诊断评价中得出灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率、Kappa值等，见表2。单独检测HPV-DNA筛查中敏感性最高(84.7%)，但特异性(52.7%)以及阳性预测值(45.1%)最低，而TCT和HPV-DNA联合检测的特异性和阳性预测值都明显高于两者的单独检测，三种检测方法的灵敏度、特异性、阳性预测值差异均有统计学意义(P＜0.05)。可靠性指标中可见TCT联合HPV-DNA检测诊断符合率最高，作为与金标准一致性系数的Kappa值最大(0.51)。

表2 TCT、HPV-DAN、TCT+HPV检测指标诊断评价

3 讨论

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，近年发病有年轻化趋势，目前是唯一一种经过医学干预能使发病率和死亡率明显下降的恶性肿瘤。宫颈上皮内瘤变(Cervicalintraepithelial neoplasia，CIN)是与宫颈浸润癌密切相关的一组癌前病变，它反映宫颈癌发生发展中的连续过程。控制和预防宫颈癌的关键是通过筛查及时发现和治疗宫颈上皮内瘤变。作为宫颈癌金标准的阴道镜辅以病理宫颈活检是有创操作，用于筛查不太合适。近年使用宫颈液基薄层细胞学技术(Thinprep cytology test，TCT)改变了常规巴氏涂片操作方法，成为国内外妇产科筛查宫颈癌前病变的常规方法，国内已推广使用现行国际的用TBS(The Bethesda System)分类系统对宫颈病变进行细胞学诊断。但临床有报道TCT由于对ASCUS/AGU与病理诊断符合率低[5]，增加对宫颈早期病变的漏诊可能性，因而对宫颈癌早期病变诊断的敏感度愈发重要。对于女性，HPV的终身感染率累积可高达60%～70%。也就是说，60%～70%的女性在其一生中都感染过HPV，但这种感染通常是一过性的。而99.7%的宫颈癌中都存在HPV感染的证据[6]，所以HC2-HPV检测比细胞学具有更高的敏感度，阴性预测值高，没有高危型HPV感染，妇女在3～5年内发生宫颈癌的风险几乎为零，马晓星等[7]也有报道HPV检出率随病变程度加重呈趋势性增高，因而可以通过检测HPV来预测CIN的进展情况，并可作为治疗后的随访指标。

本文中HPV-DNA检测的敏感度最高，达到84.7%，相对TCT而言，对于早期宫颈癌的筛查作用更加突出，但特异性相对TCT较低，这与李青等[9]研究基本一致，另外三种检测筛选结果的阴性预测值差异无统计学意义，而对TCT和HPV-DNA联合检测分析，阳性预测值达到最高，与病理活检的一致性系数Kappa值最大(0.51)，表明两种检测方法可优势互补，收益性最好。

综上所述，对于宫颈癌的早期筛查，临床上既要防止漏诊带来的延误治疗，又要避免病理活检给患者带来不必要的痛苦，对于ASCUS阳性患者应做合适的分流管理，如同时检测高危型HPV-DNA显示阳性的，应立即做阴道镜病理活检，如阴性者，可重复行细胞学检测，必要时对高危型HPV-DNA进行跟踪检测。事实上，美国癌症学会推荐筛查方案中报告，细胞学和HPV检测可以每3年筛查一次，联合使用时筛查的频率不应超过每3年一次。所以，在客观科学证据的指引之下，对宫颈癌的早期筛查做出合理的诊断具有重大的意义。

[1]Ferlaya J,Formana D,Mathersb CD,et al.Breast and cervical cancer in 187 countries between 1980 and 2010[J].The Lancet,2012, 379(9824)：1390-1391.

[2]Barcelos AC,Adad SJ,Michelin MA,et a1.Atypical squamous cells of undetermined significance：analysis of microbiology，cy2tological criteria and clinical conduct[J].Turmori,2006,92：213,218.

[3]Schiffman M,Castle PE,Jeronimo J,et a1.Human papillomavirus and cervical cancer[J].Lancet,2007,370(9590)：890-907.

[4]Tavassoli FA,Devilee P.乳腺及女性生殖器官肿瘤病理学和遗传学[M].北京：人民卫生出版社,2006：325-361.

[5]钱德英.重视宫颈癌前病变筛查的质量管理控制[J].中国实用妇科与产科杂志,2007,23(7)：497.

[7]Cai HB,Ding XH,Chen CC.Prevalence of single an d multiple human papillomavirus types in cervical cancer and precursor lesions in Hubei,China[J].Oncology,2009,76(3)：157-161.

[8]马晓星,李亚里,胡凌云,等.HR-HPV载量与宫颈病变的相关性分析[J].解放军医学杂志,2012,37(5)：477-481.

[9]李青,钱宁,张静敏,等.HC2-HPV-DNA检测与薄层液基细胞学检查在筛查宫颈癌中应用价值[J].南京医科大学学报(自然科学版),2009,29(8)：1172-1174.

Value of TCT and HR-HPV detection in the screening of cervical cancer.

LONG Hua-quan,CHEN Shi-hao, ZHANG Wei-jian.Department of Clinical Laboratory,Xinhui Hospital Affiliated to Southern Medical University, Jiangmen 529100,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo evaluate the value of liquid-based thin-layer cytological test(TCT)and high risk human papillomavirus(HR-HPV)detection in the screening of cervica1 cancer.MethodsTCT and HC2-HPV-DNA were detected in 687 patients in our hospital from February 2010 to March 2011.Cervical biopsy was taken as the gold standard,≥CINⅠ(cervical intraepithelial neoplasia)was regarded as positive,the ratio of RLU/CO≥1.0 inHC2-HPV-DAN test as positive,TCT≥ASCUS in TCT test as abnormal.The value of TCT detection,HPV-DNA detection and co-test of TCT and HPV-DNA were analyzed.ResultsThe results for TCT test,HPV-DNA test and co-test of TCT and HPV-DNA were as follows：sensitivity(76.5%,84.7%,72.0%),specificity(73.6%,52.7%,80.7%), positive predictive value(57.9%,45.1%,64.5%),negative predictive value(86.8%,88.3%,85.6%),diagnostic accordance rate(74.5%,62.7%,77.9%),Kappa value(0.46,0.30,0.51).There were significant differences among sensitivity and specificity of TCT test,HC2 test and co-test(P＜0.05).The co-test had higher positive predictive value than TCT test,HC2 test,but with no statistically significant difference.The diagnostic accordance rate and Kappa value of co-test was the highest,with the best reliability.ConclusionCo-test of TCT and HPV-DNA is more conducive for the early screening of cervical cancer than TCT test and HC2 test.

Thinprep cytology;High risk human papillomavirus;Cervical cancer;Biopsy;Sensitivity;Specificity

R737.33

B

1003—6350（2012）24—100—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.24.043

2012-06-06)

龙华泉(1968—)，男，广东省江门市人，副主任技师，学士。