长春西汀片溶出度测定方法的研究

黄文姝，李久旭，孟 莉，赵 娟，王 虹

长春西汀是吲哚类生物碱药物，广泛用于缺血性脑血管疾病的治疗［1］。长春西汀片目前所执行的质量标准仍为暂行部颁标准［WS-11(X-08)-93］，随着制药行业的发展，其所执行的部颁标准已不能完全体现并控制产品的质量。溶出度检查项是口服固体制剂的必检项目，部颁标准中该检查项采用中国药典溶出度检查第一法，每篮中投入2片供试品，溶出液经0.3 μm滤膜过滤后，采用分光光度法进行测定。测定时每篮投入2片样品的原因是为了满足分光光度法测定浓度的需要。该方式反映的是2片的平均溶出情况，不能体现出一个制剂单位的溶出行为，显然不符合溶出度检查项的目的和要求，因此需要改进。本文在原标准基础上，对其溶出度方法进行改进，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 日立L-2000高效液相色谱仪，ZRS-8G型药物溶出仪，PE Lambda35紫外-可见分光光度计，赛多利斯天平型号 MSU125P-100-DU及CPA2P，色谱柱为 C18柱(4.6mm ×250 mm，5 μm)。

1.2 试药 长春西汀对照品(东北制药集团股份有限公司，纯度99.7%)，长春胺乙酯对照品(东北制药集团股份有限公司，纯度98.1%)，阿朴长春胺对照品(东北制药集团股份有限公司，纯度97.3%)，长春西汀片(A厂家，批号分别为0909101、0911102、100101)，长春西汀片(B 厂家，批号为090502);乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶出条件的选择

2.1.1 溶出度试验条件的选择 参照本品原部颁标准中的溶出度试验条件，采用溶出度测定第一法(中国药典2010年版二部附录XC)，以稀盐酸12 mL，加水至500 mL为溶剂(即0.067 mol/L盐酸)，转速为100 r/min。

2.1.2 测定方法的选择 长春西汀片在224、270及314 nm波长处有最大吸收，见图1。考虑与本品含量测定项的一致性，采用280 nm作为测定波长。本品中含有VC等辅料，如采用分光光度法，在225、270 nm波长处对主成分的测定均有较大干扰，见图2。在314 nm波长处虽然辅料没有干扰，但溶出液吸光度值＜0.3，不适于定量测定，考虑以上因素，采用HPLC法进行本品溶出度测定。

图1 长春西汀紫外光谱图

图2 长春西汀片辅料紫外光谱图

2.2 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;0.2 mol/L醋酸铵溶液-乙腈(30∶70)为流动相，检测波长为280 nm。分别称取长春胺乙酯、阿朴长春胺和长春西汀对照品适量，置同一量瓶中，加0.067 mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1 mL中均含10 μg的溶液，作为系统适用性试验溶液，取50 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，长春胺乙酯、阿朴长春胺与长春西汀之间的分离度均应符合要求。理论板数按长春西汀峰计算不低于3 000，见图3。

图3 长春西汀片溶出度测定系统适用性图谱

2.3 溶出度测定方法 取本品，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录XC第一法)，以稀盐酸 12 mL，加水至 500 mL为溶剂，转速为100 r/min，依法操作，经30 min时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，作为供试品溶液，进样50 μL;另精密称取长春西汀对照品适量，用溶出介质溶解并稀释制成每1 mL中约含10 μg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，计算每片的溶出量。限度为标示量的85%，应符合规定，相关图谱见图4。

2.4 辅料干扰试验 取本品辅料适量，用上述溶出介质溶解后，按溶出度测定项下的色谱条件进行试验，结果表明，本品辅料对测定无干扰，见图5。

图4 长春西汀片溶出度测定HPLC图谱

图5 长春西汀片溶出度测定空白辅料HPLC图谱

2.5 线性试验 取长春西汀对照品适量，加上述溶出介质溶解并稀释制成浓度为3.0～15.0 μg/mL的溶液，按溶出度测定项下的色谱条件操作，以长春西汀的峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，得到回归方程为A=83 984 C-2 830.8，相关系数 r=0.999 7，结果表明，在3.12～15.11 μg/mL范围内，长春西汀色谱峰面积与其浓度呈良好的线性关系。

2.6 回收率试验 分别按处方比例称取本品辅料及相当于主成分60%、80%及120%的长春西汀对照品适量，加溶出介质溶解并定量稀释，按上述条件进行测定，结果本品的回收率为99.4%(n=9)，RSD=0.60%。

2.7 溶液稳定性试验 取任意溶出度测定溶液，分别于0、2、8、18 h进行测定，结果表明，溶液放置18 h，可保持稳定。

2.8 溶出曲线均一性 取本品(批号:100101)，依据溶出度测定法，分别在5、13、20、30和45 min取样测定，6片样品的溶出结果见图6，表明样品的溶出均一性良好，长春西汀片各片溶出趋势一致，从第二时间点开始，溶出量的 RSD不超过10%，30 min时平均溶出量为 98.2%，RSD为3.3%。

图6 长春西汀片溶出曲线均一性(批号:100101)

2.9 样品累积溶出量测定 取上述4批样品，按上述方法进行累积溶出量测定，结果见表1。

表1 4批样品累积溶出曲线结果(%，n=6)

3 讨论

3.1 笔者对本品的溶出度分别采用中国药典第一法(篮法)和第三法(小杯法)进行了考察，结果表明，采用小杯法，不同厂家的长春西汀片各批样品的溶出量均在50%以下，均一性很差，不适合本品的测定。且小杯法是对于小规格固体制剂，当紫外法检测无法满足测定要求时，从第二法(桨法)衍生而来，截至目前仅我国收载［2］。该方法对于某些活性成分无法满足溶出度漏槽条件，不能真实反映药品的质量。因此，在建立溶出度方法时，通常的趋势是尽量不采用小杯法，特别是仿制品种或拟出口的制剂品种，国际和国内上推荐采用经典且公认的转篮法及桨法。通过加大进样量，采用HPLC法等高灵敏度检测手段，可满足低浓度溶出液测定方法学验证的要求［3］。

3.2 长春西汀在0.067 mol/L盐酸中略溶，而溶出度试验漏槽条件通常规定为溶出介质体积要大于溶解药物主成分(制剂最大规格量)所需体积的3～5倍，以保证药物溶出不受其溶解性的显著影响，长春西汀片的规格为5 mg/片，0.067 mol/L盐酸作为溶出介质则能够满足漏槽试验条件，因此，选择该溶剂为溶出介质。

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［1］张冬平，于燕.长春西汀治疗急性脑梗死疗效观察［J］.实用药物与临床，2008，11(5):297-298.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［3］谢沐风，操洪欣.溶出度测定中的若干问题［J］.中国医药工业杂志，2006，37(12):859-861.