复方罗布麻片(Ⅰ)中氢氯噻嗪的含量测定研究

孙鲁江 王乃东

1 概述

复方罗布麻片(Ⅰ)为常见治疗高血压药物，应用非常广泛。复方罗布麻片(Ⅰ)由野菊花煎剂干粉、防己煎剂干粉、三硅酸镁、氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪、维生素B1、维生素B6等药物组成，主要用于治疗高血压，收载于《国家药品标准》化学药品第十一册[1]。

本研究采用高效液相色谱法(HPLC)等现代分析手段，对上述制剂中的氢氯噻嗪含量测定方法进行研究。并优选出一种科学、方便的分析方法，为药品质量标准的修订和生产工艺的改进提供科学依据。

2 立题意义

现行药品标准、药典、期刊杂志中无复方罗布麻片(Ⅰ)中氢氯噻嗪含量测定方法。针对市场上药品存在的质量问题，杜绝厂家的偷工减料行为，严格药品标准，规范药品市场，更好的保障人民群众的用药安全，经仔细研究，制定了全面的测定复方罗布麻片(Ⅰ)中氢氯噻嗪含量的方法。

3 实验部分

3.1 引言 氢氯噻嗪对碳酸酐酶抑制作用很弱，产生利尿作用，是复方罗布麻片(Ⅰ)中起降压作用的药效成分。降压作用持久，基本作用是排钠利尿，使细胞外液和血容量减少而致降压。本实验跟据国家药典标准上收载的中氢氯噻嗪的含量测定方法设计出复方罗布麻片(Ⅰ)中氢氯噻嗪含量的测定方法。

3.2 主要实验仪器[2，4]戴安P680高效液相色谱仪，四元梯度泵，色谱柱:KromasilC18(200mm×4.6mm，5μm)，20μl标准进样器。

3.3 实验条件[3，5]流动相的选择:根据氢氯噻嗪的溶解的性质，参考有关文献，按乙腈、水不同比例分别进行试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，选择乙腈∶水=88∶12为流动相，其分离效果最好。

检测波长的选择:配制氢氯噻嗪的标准溶液20ug/ml，在不同波长测定，在271nm氢氯噻嗪峰较大，基线平稳，确定为测定波长。流速:1.0ml/min，吸收波长:271nm。，外标法测含量。

3.4 对照品溶液标准曲线线性关系考察 标准曲线制备:精密称取氢氯噻嗪10mg，置100ml容量瓶，加流动相溶解并稀释至刻度。分别精密量取2ml，5ml，10ml、15ml、20ml、25ml置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，微孔滤，进样20μl，保留时间20min，图谱附后，回归方程为:

3.5 空白干扰试验 精密称取罗布麻药材28.3966g，置于2000ml烧瓶中，加水400ml，水煮提取，连续提取三次.提取液过滤，取续滤液水浴蒸干，得6.5366g罗布麻叶浸膏.精密称定罗布麻叶浸膏0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加80%甲醇50l，密塞，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失得重量，摇匀，滤过.吸取滤液进样20ul，结果对氢氯噻嗪无干扰.取防己粉适量，作干扰实验，另取盐酸异丙嗪对照适量，作干扰实验，结果表明对氢氯噻嗪无干扰，

3.6 加样回收实验

3.6.1 样品含量测定 取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于氢氯噻嗪10mg)置200ml容量瓶中，加乙腈20ml与冰醋酸2ml，超声处理15 min，再加流动相50ml，超声处理15min，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液10ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。微孔滤膜滤过，进样20ul，保留时间20 min。记录谱图，另精密称取氢氯噻嗪2.002 mg，置100ml容量瓶，加流动相溶解并稀释至刻度。微孔滤膜滤过，取20ul进样，记录谱图。

3.6.2 加样回收 精密称取氢氯噻嗪2.002mg，置100ml容量瓶。精密称定复方罗布麻片(Ⅰ)20片，分别取相当于罗布麻片(Ⅰ)2.50片三份，相当于罗布麻片(Ⅰ)1.25片五份，置200ml量瓶中，于后五份中加入0.2mg/ml的对照品溶液10ml.加乙腈20ml与冰醋酸2ml，超声处理15min，再加流动相50ml，超声处理15min，放冷，加流动相稀释至刻度，微孔滤膜滤过，取20 ul进样，结果见表1。

3.7 结果讨论 通过反复实验，得到的结果符合要求。实验方法得当，实验误差较小，可以作为一种可行的方法进行推广。

表1 氢氯噻嗪回收率测定结果

4 结论

4.1 高效液相色谱法具有空白干扰小，操作简便，线性关系好，灵敏度高等优点，本实验制定的高效液相色谱法测定药物中氢氯噻嗪含量的方法，专属性强，重现性高，适于作为质量控制标准推广应用。

4.2 通过对几个厂家的复方罗布麻片(Ⅰ)中氢氯噻嗪含量测定，我们发现药物中氢氯噻嗪含量较低，有的含量仅为标示量的17.9%，且含量极不均匀，最高值与最低值相差超过12%，有的超过30%。因此，我们认为有必要将复方罗布麻片(Ⅰ)质量标准中加入蒙花苷及氢氯噻嗪含量测定项目，这将极大地促进广大人民群众用药的安全、有效。

[1]国家药品监督管理局国家药品标准:第十一册，2002:235-236．

[2]吴艳琳，林志华，汪洋，陈世惠．高效液相色谱法测定复方利血平片中4种成分的含量．中国药师，2007，06．

[3]廖斌，丛欣．HPLC法测定常药降压片中两组分的含量．中国药科大学学报，2003．

[4]李冰，刘斐．复方罗布麻片质量标准鉴别方法的改进．山东医药工业，2002，21(1):36-36．

[5]赵雪梅，张淑琴.反相高效液相色谱法测定复方利血平片中6个组分的含量．药物分析杂志，1994，14(5):46-47．