探讨UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿中红细胞、白细胞的干扰因素

王中全 朱秋红 宋改芳

尿沉渣检查在泌尿系统疾病的诊断中具有一定的临床应用价值，并成为治疗及疗效观察的重要指标之一。UF-1000i全自动尿有形成份分析仪能对尿液中多种有形成分进行定量计数分析，定量内容主要有:红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌、酵母样菌、结晶、精子等成分，同时提供多种有形成分的图像分析，并能判断血尿的来源。但我们在临床工作中发现，UF-1000i在检测尿红细胞时，结晶、酵母样菌、细菌、脂肪滴、卵磷脂小体及影红细胞可对其造成干扰;而对白细胞造成干扰的因素主要是上皮细胞、非晶形盐类结晶、大量细菌、小圆上皮细胞、滴虫等。尿干化学分析仪通过测定尿液中的化学物质而分析红细胞及白细胞，易受多种化学因素的影响，有较高的假阴性率。尿沉渣分析仪与干化学仪器在分析尿液有形成分时，受到多种因素的影响，两种仪器的检测结果与尿沉渣镜检尚存一定的差异。为此，本文通过对2000例尿液标本进行UF-1000i尿沉渣分析仪分析、URIT-1500尿液干化学分析仪测试、尿沉渣镜检，探讨这两种仪器测定尿中红细胞、白细胞的影响因素，分析引起误判的主要原因，并提出相应的解决方案，为临床提供真实可靠的检验结果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机抽取2012年8月至2012年9月我院2000例门诊、住院患者，患者年龄2～81岁，男800例、女1200例。用干净的一次性尿杯留取新鲜中段晨尿。

1.2 仪器与试剂 UF-1000i尿沉渣分析仪及配套试剂、配套低、高值质控品;URIT-1500尿液干化学分析仪及配套试纸条、专用定标条;Olympus显微镜;Xiang Yi L500水平离心机;10ml带刻度离心管。

1.3 检测方法 每天检测前，用专用定标条对URIT-1500尿液干化学分析仪进行定标，UF-1000i用低、高值质控品做质控，在保证仪器运行良好状况下，严格按照操作说明书进行检测。每例标本充分混匀后分3管，各10ml，其中第1管进行UF-1000i分析仪检测;第2管进行尿干化学检测;第3管用水平离心机RCF400g 1200～1300r/min离心5min后，弃去上清液，留取沉渣0.2ml混匀，吸取20μl滴在载玻片上，用18 mm×18 mm盖玻片覆盖，用10×40镜头观察鉴定红细胞、白细胞数量，观察10个视野所见最低和最高值，记录结果，两小时内检测完毕。

1.4 参考范围与判定标准 ①UF-1000i分析仪检测:男性:红细胞0～12μl，白细胞:0～12μl;女性:红细胞0～24/μl，白细胞:0～26/μl[1]。②尿干化学法:潜血:阴性;LEU:阴性。③显微镜镜检结果:红细胞:0～3/Hp;白细胞:0～5/Hp[2]。超过以上参考范围为阳性，3种方法以尿沉渣镜检做为“金标准”，当尿沉渣镜检阴性而UF-1000i和(或)干化学阳性时为假阳性;当尿沉渣镜检阳性而UF-1000i和/或干化学阴性时为假阴性。

2 结果

2.1 UF-1000i、尿沉渣镜检检测尿红细胞、白细胞结果 见表1。

2.2 干化学、尿沉渣镜检检测尿红细胞、白细胞结果 见表2。

2.3 两种方法检测尿红细胞、白细胞的影响因素 见表3。

表1 UF-1000i、尿沉渣镜检尿红细胞、白细胞检测结果比较

表2 干化学、尿沉渣镜检尿红细胞、白细胞检测结果比较

表3 两种方法检测尿红细胞、白细胞的影响因素

3 讨论

UF-1000i尿沉渣分析仪利用流式细胞技术和荧光染色的方法，通过前向侧向散射光及其脉冲宽度、荧光强度及其脉冲宽度以及细胞电阻抗等参数，对尿液中有形成分定量分析，从而区分尿中各种有形成分。具有操作简便、速度快、可报告多项参数等优点。干化学测定尿中隐血是根据血红蛋白接触活性法原理，通过血红蛋白具有的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物，使四甲基联苯胺氧化呈色;检测尿中白细胞是根据酯酶法的原理，粒细胞浆内的酯酶能水解3-羟基吲哚酚酯类底物，释放出酚，再与重氮试剂反应生成紫红色化合物。但由于仪器本身的局限性及尿液中有形成分的复杂性和多变性，容易对仪器分析尿液中的红细胞、白细胞造成干扰。有学者认为用单一尿沉渣分析仪或其他方法分析存在一定数量的假阳性和假阴性结果[3]。本文通过对2000例尿液中有形成分的检测发现，这两种检测方法与沉渣镜检相比较有一定的差异。

正常形态的红细胞直径约8 μm、双凹圆盘状，分布在散点图中荧光强度较低的区域，尿液中的红细胞可因多种因素的影响而使其变形。本文通过对2000例尿液中有形成分分析，UF-1000i尿沉渣分析仪检测红细胞的假阳性率占17.9%，常引起假阳性的有形成分分别如下:结晶、酵母样菌、细菌、脂肪滴、卵磷脂小体。大小形态与红细胞相似的尿酸结晶和双凹形草酸钙结晶，在散点图中与红细胞交叉分布，易造成假阳性;酵母样菌、脂肪滴或卵磷脂小体、数个非晶形结晶或细菌聚集成大小如红细胞，通过仪器分析，其荧光强度和散射光强度与红细胞相似，可对红细胞计数造成干扰。假阴性率占8.6%，影红细胞和红细胞碎片则常是引起假阴性的主要原因。这类细胞因其体积小、形态不规则，荧光强度极弱、位于低荧光区，仪器不能辨认可造成假阴性。尿中出现大量血红蛋白尿，沉渣中无红细胞，潜血试验呈阳性，常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿、血型不合输血、急性溶血疾病、病毒感染、手术后所致红细胞大量破坏等疾病，报告结果时须强调注明其物理性状，以提示尿中红细胞溶解，并及时和临床联系。干化学检测红细胞的假阳性率占10.2%，主要的影响因素有:产过氧化物酶的细菌、尿液中含强氧化剂、某些药物、对热不稳定酶等;干化学检测红细胞的假阴性率较高，占19.5%，主要的影响因素是尿液中含有大量的VitC，卡托普利、罗丁缓释片亦可降低测试灵敏度。

UF-1000i尿沉渣分析仪检测白细胞的假阳性率达20.1%，常引起假阳性的因素主要有:上皮细胞、非晶形盐类结晶、大量细菌、小圆上皮细胞、滴虫等。干扰机制可能是尿中非晶形盐类结晶、小圆上皮细胞、上皮细胞等成分的大小及染色程度与白细胞类似，产生的散射光、荧光及电阻信号与白细胞部分重叠[4];另外当尿液中有大量细菌聚集成团时，其散射光、荧光信号与白细胞相似，也有可能使白细胞检测结果呈假性升高。在临床工作中发现，孕妇尿液中常有大量的上皮细胞，会导致白细胞假性增多。白细胞的假阴性率较低，仅占3.3%，白细胞破碎常是引起假阴性的主要原因。对于肉眼血尿、混浊的尿标本，建议冲洗仪器，待仪器空白值通过后再进行下一个标本的测试，以免污染下一个标本造成假阳性。尿干化学通过粒细胞浆内的酯酶检测白细胞，中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞均有白细胞酯酶，试带法呈阳性结果，而淋巴细胞不含这种酯酶呈阴性结果。干化学检测白细胞的假阳性率占11.8%，主要的影响因素是阴道分泌物污染，分泌物中的鳞状上皮细胞浆内含有的磷酸酯酶与粒细胞酯酶化学性质相似导致假阳性;假阴性率占14.3%，主要的影响因素是淋巴细胞或者尿液中含有大量的葡萄糖(＞30 g/L)、高浓度白蛋白(＞5 g/L)及一些药物如呋喃妥因、庆大霉素、头孢氨苄、先锋霉素;草酸浓度增高时可抑制反应，也可导致干化学中的白细胞酯酶呈阴性反应[2]。

综上所述，多种因素可能干扰UF-1000i尿沉渣分析仪检测红细胞、白细胞。在分析红细胞过程中，易受结晶、酵母样菌及其他大量杂菌、精子等干扰，当仪器出现报警时，必须用镜检确认[5];也有学者认为，当尿沉渣分析仪与干化学检测结果不一致和出现异常散点图时，报告管型、酵母样菌、精子、不均一红细胞时沉渣镜检十分必要[6]。而白细胞易受上皮细胞、非晶形盐类结晶、大量细菌、小圆上皮细胞、滴虫等的影响。目前，UF-1000i和尿干化学检测尿液只能快速筛查，一定要重视沉渣镜检，尿沉渣镜检被公认为尿液有形成分检查的经典方法，只有三者结合互检，才能有效排除假阳性和假阴性结果，为临床相关疾病的诊断和治疗提供真实可靠的检验结果。

[1]丛玉隆，马骏龙，李云莲，等.尿沉渣测定四种方法参考值范围调查.中华医学检验杂志，1997，20(4):229-230．

[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社，2006:290-295．

[3]程颖，程燃.UF-100全自动尿沉渣分析仪影响因素的探讨.重庆医学，2006，35(4):349．

[4]陈忠，邹晓月，袁立新.UF-100尿沉渣分析仪和干化学检测尿中红细胞和白细胞及管型的干扰因素分析.中国实验诊断学，2008，12(4):534-536．

[5]丛玉隆，马骏龙.几种检测尿红细胞方法的价值与互补关系.中华检验医学杂志，2002，25(5):263-264．

[6]Ottiger C，Huber A R.Quantitative urine particle analysis:integrative approach for the optimal combination of automation with UF2100 and microscopic review with KOVA cell chamber.Clin Chem，2003，49(4):617-623．