黄芩有效化学成分及抑菌作用分析

刘国华 张延敏

黄芩是中医临床中比较常见的一味中药，该药物主要具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎的临床治疗功效。经过现代药理学的相关研究后表明，该药物主要具有非常理想的抗菌降压、保肝利胆、抗过敏等临床作用［1］。为了对中药黄芩的有效化学成分及其抑菌作用进行总结分析，使临床充分了解黄芩的有效成分及抑菌作用效果，为临床提供对药物的有效成分进行提取的理想方法，使该药能够更好的为广大临床患者服务，我们组织进行了本次研究。在研究的整个过程中，我们选用同一产地的黄芩，分别采用水煮法和超声提取法对其有效化学成分进行提取，针对其对肠炎沙门氏菌的活性抑制作用效果进行比较分析。现将分析结果报告如下。

1 资料和方法

1.1 一般材料 黄芩、MH肉汤、琼脂、其他试剂均为分析纯。

1.2 相关仪器 采用我院现有的旋转蒸发器、超净工作台、恒温培养箱、超声波发生器。

1.3 方法 分别采用水煮法和超声提取法对其有效化学成分进行提取，再将两种方法提取得到的有效成分物质制成结晶物，对提取得到的上述四种物质对肠炎沙门氏菌的活性抑制作用效果进行比较分析。

1.4 水煮法 水煎提取液:精称50 g黄芩饮片，分别加500 g和400 g的水各进行1次煎煮，每次进行1 h，过滤处理，将滤液合并，浓缩处理至50 ml，此时浓度为1000 mg/ml，灭菌处理后备用。结晶物制备:精称50 g黄芩饮片，分别加500 g和400 g的水各进行1次煎煮，每次进行1 h，过滤处理，将滤液合并，在滤液中加入适量的浓盐酸，将滤液pH值调节到1～2范围内，在80℃条件下保持30 min左右，静置12 h后将上清液弃去，沉淀物加入适量水，在搅拌均匀后加浓度为40%的NaOH溶液使黄芩素溶解，将pH值调节到6～7，加等体积的浓度为95%的乙醇，此时溶液含醇量在50%左右，加热至50℃，过滤处理，用浓度为10%的盐酸将pH值调至2～3，在50℃条件下水浴静置30 min左右，使黄芩结晶物完全析出，滤出，洗至中性，60℃条件下干燥至恒重，得黄芩结晶物，制成浓度为10 mg/ml溶液，灭菌处理后备用。

1.5 超声提取法 取适量同一厂家生产的黄芩饮片，在60℃条件下进行烘干处理，粉碎过10目筛，精称50 g粗粉，加入10倍量的水，在20kHz的频率下进行超声处理，随时对水进行补充，使液面的高度维持相对平衡，处理1 h左右在进行过滤操作，在滤液中加入适量盐酸，保证pH在1～2之间，在80℃条件下水浴加热处理30 min左右，待黄色结晶物析出完全后，进行过滤处理。中加蒸馏水进行搅拌，再加浓度为40%的NaOH溶液使黄芩素充分溶解，将pH控制在6～7之间，入等体积的浓度为95%的乙醇，此时溶液的含醇量在50%左右，加热至50℃，进行过滤，滤液用浓度为10%盐酸，将pH值调至2～3，50℃条件下水浴静置30 min左右，使结晶物完全析出，滤出结晶物，洗至中性，进行抽滤，60℃条件下干燥至恒重，得黄芩结晶物，配制成浓度为10 mg/ml溶液，灭菌处理后备用。

1.6 统计学方法 在本次研究过程中所得到的所有相关数据，均采用SPSS 14.0统计学数据处理软件进行处理分析，当P＜0.05时，我们认为数据之间差异有统计学意义。

2 结果

经过仔细研究后我们发现，采用水煮法得到的提取液对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度范围在130～520 mg/ml之间，采用超声提取法得到的提取液对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度范围在65.0～260 mg/ml之间，经水煮法提取再制成的黄芩结晶对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度范围在1.30～5.20 mg/ml之间，经超声法提取再制成的黄芩结晶对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度范围在0.65～2.60 mg/ml之间。

3 讨论

中医学研究认为黄芩主要具有清热解毒的临床治疗功效，现代药理学经过研究后认为该药物主要具有利胆、保肝、抗炎、抗变态反应等临床作用，该药具有非常广泛的抗菌谱，对临床上比较常见的金葡菌、沙门氏菌和绿脓杆菌都具有非常明显的抑制作用，在临床实际应用过程中主要将其用于对患有肺热咳嗽、热病烦燥、烦渴、湿热泻痢等疾病的患者进行治疗［2］。近些年来，相关临床研究结果显示，黄芩素还具有非常理想的抗病毒作用。目前对黄芩苷进行提取的方法主要以水煎煮提取法最为常见，但该法加热的时间比较长，且生产效率相对较低［3］。在本次研究过程，我们分别用采用水煮和超声提取两种方法对中药黄芩的有效成分进行提取分离，并通过制备得到两法提取的黄芩有效成分结晶物，对4种有效成分提取物对肠炎沙门氏菌体外活性抑制情况进行比较分别。最终研究结果显示，超声提取法所得到的提取液和结晶物对该菌种的体外活性抑制作用效果均较水煮法理想得多;两种方法提取的黄芩有效成分结晶物对试验肠炎沙门氏菌的抗菌活性均较提取液大出100倍左右。这一事实充分说明，采用超声提取法对中药黄芩的有效成分进行提取后其抑菌效果较水煮法更理想。

总而言之，黄芩苷元、黄芩苷、汉黄芩苷和汉黄芩素是中药黄芩的主要有效成分，采用超声提取法得到的黄芩的有效成的抑菌效果更加理想，可以将该方法作为临床对该中药进行有效成分提取的常规方法。

［1］赵铁华.黄芩茎叶活性部位抗菌作用的研究.中国药理学通报，2007，12(17):885-886．

［2］黎丹戎.汉黄芩素对人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠移植瘤生长及端粒酶活性的抑制作用.中国药理学通报，2007，23(14):537-538．

［3］魏述永.黄芩有效成分提取物对沙门氏菌的抑菌活性比较研究. 中国医药杂志，2008，16(11):240-241．