火焰原子吸收光谱法测定儿童全血中铁、锌、钙的含量

谭 昆 王书安 胡 焰 刘卫东 王 健

徐州市医学科学研究所，江苏 徐州 221006

微量元素是占人体总重量的1/10000以下，每人每日需要量在100 mg以下的元素。其含量虽微，但对机体代谢起着极其重要的作用。婴幼儿微量元素缺乏对智力、免疫功能、生长发育等有较大影响[1-2]。目前，我国婴幼儿微量元素缺乏较为普遍。王冬莲等[3]研究表明台州地区儿童微量元素缺铁达到17.5%，缺锌达到32%，缺钙达到29.6%。火焰原子吸收光谱法测定微量元素直接采集末梢血稀释、测定，结果准确、可靠，适用于临床检验的需要。本研究通过对徐州市鼓楼区部分幼儿全血直接稀释，用火焰原子吸收光谱法测定微量元素含量，旨在分析本地区幼儿体内微量元素水平，为临床提供一定的理论依据，以便于早期预防。

1 对象与方法

1.1 研究对象

徐州市鼓楼区2011年2月1171名0～6岁正常体检儿童，其中 0～1岁组 191名，2～3岁组 382名，4～6岁组 598名。

1.2 主要仪器设备及试剂

AA-6300C原子吸收分光光度计（日本岛津），铁、锌、钙空心阴极灯；铁、锌、钙标准储备液1 mg/mL（国家标准物质研究中心），稀释液为0.5%曲拉通X-100（国药集团化学试剂厂）；超纯水。所用的容器均用HNO3处理过。

1.3 方法学评价

所有检测均是在仪器正常维护保养、检测结果在控的情况下进行的。

1.3.1 标准曲线的绘制 用含1%HNO3的0.5%曲拉通X-100依次稀释铁、锌、钙标准储备液，稀释后的各标准浓度如下，铁：0、0.50、1.00、1.50、2.00、3.00 mg/L；锌：0、0.10、0.25、0.50、0.75、1.00 mg/L；钙：0、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/L。 以各溶液浓度 C（mg/L）为横坐标，吸光度A为纵坐标，在常规条件下检测，绘制标准曲线。

1.3.2 批内及批间精密度测定 取多份标本充分混合，连续测定20次，计算批内精密度，再用该份标本每天测一次，连续测20 d，计算批间精密度，计算其平均值（x）、标准差（S）及变异系数（CV）。

1.3.3 回收率试验 随机抽取1份标本，按样品分析方法测标本中的铁、锌、钙的含量，同时做加标回收试验，铁元素测定加入浓度为100 mg/L，锌元素测定加入浓度为10 mg/L，钙元素测定加入浓度为50 mg/L，平行测5次。

1.4 样品的采集和处理

采集儿童左手无名指腹内侧指端末梢血40 μL加到1.56 mL含1%HNO3的0.5%曲拉通X-100稀释液中混匀（稀释40倍），用移液器吸取500 μL加入到2.0 mL0.5%曲拉通X-100稀释液中混匀（稀释5倍），总稀释200倍，待测。

1.5 样品测定

用AA-6300C原子吸收分光光度计在常规条件下测定铁、锌、钙元素，根据稀释倍数和标准曲线计算元素的含量。

2 结果

2.1 血样品中各元素线性回归结果

结果显示，各元素回归曲线线性良好，回归方程如下，铁： A=0.99728C，r=0.9984； 锌：A=0.065018C，r=0.9919；钙：A=0.063859C，r=0.9998。

2.2 方法的精密度测定结果

通过实验测定计算出批内变异系数Fe：3.7%，Zn：1.9%，Ca：1.5%，批间变异系数 Fe：4.5%，Zn：2.5%，Ca：2.7%。 见表1。

表1 血样品中元素含量均值及变异系数

2.3 测定微量元素回收率结果

各微量元素回收率的测定结果，见表2。2.40～6岁儿童微量元素异常分布情况

表2 样品分析及回收率结果

结果显示，该方法测定徐州市鼓楼区正常儿童1171名全血铁、锌、钙的含量，正常人全血微量元素的参考值为，铁：421～662 mg/L；锌：4.9～9.8 mg/L；钙：46～84 mg/L。 微量元素异常分布结果，见表3。

表3 0～6岁儿童微量元素异常分布

由表3可知，缺铁、缺锌在0～1岁婴儿较严重，缺钙的百分率相对缺铁、缺锌稍低，3个年龄组随着年龄的增长所缺乏的微量元素逐渐好转。

3 讨论

目前，微量元素常用的检测方法有分光光度法、电感耦合等离子体发射光谱法、原子吸收光谱法等。分光光度法操作简单，易于推广，但灵敏度较低，选择性不佳；电感耦合等离子体发射光谱法灵敏、准确快速、干扰小，可同时检测多种元素，但仪器价格昂贵，结构复杂，很难在临床推广。原子吸收分光光度法由于特异性高、精密度好、检出限低、操作简便、分析速度快等特点成为微量元素检测的推荐方法。全血检测采血量小，操作简便，易于为家长和儿童所接受，成为临床实验室检测婴幼儿微量元素最常用的方法。本研究通过对铁、锌、钙元素检测进行方法学评价，表明原子吸收光谱法线性好、精密度佳，准确度可靠。

微量元素的检测是为了研究微量元素在疾病的发生、发展过程中与疾病的相互关系，现已证实，许多疾病与各种微量元素的代谢密切相关[4]。因此准确地检测体内微量元素含量对疾病的诊断、治疗和预防有重要的意义[5]。

铁是人体含量最高的微量元素，主要合成血红蛋白，运输和贮存氧，构成细胞色素酶、过氧化物酶等人体必需酶类，参与能量代谢和调节免疫功能等[1]。缺铁易导致贫血，注意力不集中、倦怠乏力、烦躁等。本次调查显示1岁以下儿童缺铁较严重，缺乏率达37%，随年龄增长，铁缺乏逐渐得到纠正。加强幼儿保健，合理喂养，对较大儿童纠正偏食，多吃一些禽类、黑色食品、叶菜类、菌类、动物血等可有效补充铁元素。

锌主要通过十二指肠和空肠吸收分布至全身，由粪便、尿、汗、头发等排泄，以视网膜、胰腺及前列腺含锌量高。锌促进机体生长发育，是体内多种酶的功能成分，在蛋白质、脂肪、糖和核酸代谢中发挥重要作用。儿童生长发育迅速，锌的需求量大，再加上婴儿较小，吃的食物较单一，易导致锌的缺乏[6]。缺锌易导致消化功能减退、免疫力降低、厌食、生长发育迟缓、毛发枯黄、智力水平发展低下等[7-8]。缺锌的防治可采用饮食及锌剂来治疗，如多食瘦肉、蛋黄、动物肝脏等，葡萄糖酸锌由于口感柔和，适合儿童口味，是儿童补锌的首选锌剂。

钙盐是体内含量最多的无机盐，主要存在于骨骼和牙齿中。儿童长期缺钙易患佝偻病、骨软化病等。近年来，全民补钙的意识在增强，缺钙的儿童在减少，结果显示，随着儿童年龄的增长，摄入食物的多样化，缺钙情况好转，这与家长的合理膳食有关。

因此，了解儿童体内微量元素的含量，对纠正偏食挑食，加强儿童合理膳食，适时补充微量元素有指导作用。

[1]周新，涂植光.临床生物化学和生物化学检验[M].3版.北京：人民卫生出版社，2004：177-186.

[2]刘世洪，张青翠，吴晓宏.1660例少儿指血微量元素检测结果分析[J].中国医学创新，2010，4（10）：61-62.

[3]王冬莲，阮奕，周君.台州市儿童微量元素调查情况分析[J].实验与检验医学，2008，26（1）：85-86.

[4]龚得朋，徐建敏，章辉.微量元素的检测及实际意义[J].生物医学工程学进展，2010，31（1）：47-49.

[5]王琰.临床生物化学和生物化学检验[M].3版.北京：人民卫生出版社，2003：195-197.

[6]陈学成.我国儿童营养所存在的问题[J].中华儿童保健杂志，1993，1（1）：23.

[7]兰晓霞.锌缺乏与婴幼儿健康[J].国外医学：妇幼保健分册，2003，14（1）：49-50.

[8]张伟淳.微量元素锌在儿童生长发育中的作用[J].当代医学，2011，11（3）：41-41.